常霄巍 巴俊杰

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010100)

蒙藥齒緣草的薄層色譜鑒別研究△

常霄巍 巴俊杰*

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010100)

目的：建立蒙藥齒緣草的薄層色譜鑒別方法。方法：薄層色譜法。結(jié)果：供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)。結(jié)論：建立了蒙藥齒緣草的薄層色譜鑒別方法，為提高該蒙藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了薄層色譜鑒別方法。

蒙藥；齒緣草；薄層色譜鑒別

齒緣草，蒙藥名額布森-瓦德，為紫草科植物石生齒緣草Eritrichium rupestre (Pall.)Bunge 的干燥地上部分，分布于我國(guó)的東北、華北和西北的東部，西伯利亞和蒙古也有分布，主產(chǎn)于內(nèi)蒙古的中西部和甘肅、寧夏等地[1-3]。該藥材收載于《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》蒙藥分冊(cè)，有殺“粘”、清熱、解毒之功能，用于治療瘟熱流感，“協(xié)日”人脈癥，“協(xié)日”熱，炭疽等[4]，為常用蒙藥。鑒于目前尚未見(jiàn)蒙藥齒緣草薄層色譜鑒別方面的系統(tǒng)研究，本文填補(bǔ)了這方面的研究空白，建立了該蒙藥的薄層色譜鑒別方法，這對(duì)提高該蒙藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制水平具有重要意義。

1 儀器、試劑與材料

SLD-1 型薄層色譜攝像儀(天津思利達(dá)色譜技術(shù)開(kāi)發(fā)公司)，TD-Ⅱ型全自動(dòng)薄層鋪板器(上?？普苌萍加邢薰?，ZDZ-6型三用紫外分析儀(上海安亭電子儀器廠)，薄層展開(kāi)槽(上海信誼儀器廠)，薄層色譜點(diǎn)樣管(kimble，3μL、5μL)，預(yù)制硅膠G薄層板1(煙臺(tái)市化學(xué)工業(yè)研究所，批號(hào)140514，規(guī)格200mm×50mm，200mm×100mm，200mm×200mm)，預(yù)制硅膠G薄層板2(青島碩遠(yuǎn)化工有限責(zé)任公司，批號(hào)140210，規(guī)格200mm×100mm，200mm×200mm)，自制硅膠G薄層板(硅膠為青島海洋化工集團(tuán)公司，規(guī)格200mm×100mm，200mm×200mm)；甲苯、環(huán)己烷、乙酸乙酯、甲酸、甲醇、三氯化鋁均為分析純。

對(duì)照藥材齒緣草采自?xún)?nèi)蒙古呼和浩特市武川縣大青山(該產(chǎn)地齒緣草作為對(duì)照藥材正在中國(guó)食品藥品檢定研究院審批中)。實(shí)驗(yàn)用樣品藥材齒緣草分別采自?xún)?nèi)蒙古呼和浩特市和林格爾縣、內(nèi)蒙古包頭市趙長(zhǎng)城地區(qū)、內(nèi)蒙古包頭市固陽(yáng)縣、內(nèi)蒙古烏海市海南區(qū)、內(nèi)蒙古赤峰市克什克騰旗和寧夏銀川市賀蘭山地區(qū)。所采集的藥材均經(jīng)內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)藥用植物學(xué)教授鞠愛(ài)華和蒙藥學(xué)教授那生桑鑒定為石生齒緣草。

2 方法與結(jié)果

2.1 薄層色譜鑒別方法 :取本品粉末2g，加60%甲醇50mL，加熱回流1h，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，用石油醚(30～60℃)振搖提取2次，每次20mL，棄去石油醚液，水液加鹽酸5mL，加熱回流1h，冷卻后用乙醚振搖提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗滌，棄去水洗液，乙醚液揮干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另取齒緣草對(duì)照藥材同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2015版通則0502)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3 %三氯化鋁乙醇溶液，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色熒光斑點(diǎn)。

2.2 方法學(xué)考察

2.2.1 重復(fù)性試驗(yàn): 取同一批次的對(duì)照藥材，按2.1項(xiàng)下薄層色譜鑒別方法操作，重復(fù)做3次，結(jié)果顯示效果良好，見(jiàn)圖1。

2.2.2 不同年份對(duì)照藥材試驗(yàn): 分別取不同年份的對(duì)照藥材，按2.1項(xiàng)下薄層色譜鑒別方法操作，結(jié)果顯示不同年份的樣品薄層結(jié)果一致，見(jiàn)圖2。

2.2.3 樣品鑒別試驗(yàn): 取對(duì)照藥材和不同產(chǎn)地的樣品，按2.1項(xiàng)下薄層色譜鑒別方法操作，結(jié)果顯示不同產(chǎn)地的樣品薄層結(jié)果與對(duì)照藥材一致，見(jiàn)圖3。

2.2.4 不同廠家薄層板的薄層色譜試驗(yàn):取對(duì)照藥材、不同產(chǎn)地的樣品和3種不同廠家的薄層板，按2.1項(xiàng)下薄層色譜鑒別方法操作，考察不同廠家薄層板的薄層色譜。試驗(yàn)表明，不同廠家的薄層板對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)影響，結(jié)果見(jiàn)圖4。

2.2.5 不同溫度的薄層色譜試驗(yàn):取對(duì)照藥材和不同產(chǎn)地的樣品，在室溫25℃和10℃下，按2.1項(xiàng)下薄層色譜鑒別方法操作，考察不同溫度的薄層色譜，結(jié)果表明溫度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)顯著影響，見(jiàn)圖5。

2.2.6 不同濕度的薄層色譜試驗(yàn):取對(duì)照藥材和不同產(chǎn)地的樣品，在濕度75%和濕度20%下，按2.1項(xiàng)下薄層色譜鑒別方法操作，考察不同濕度的薄層色譜，結(jié)果表明濕度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)顯著影響，見(jiàn)圖6。

3 討論

3.1 供試品溶液制備方法的選擇: 方法1，取對(duì)照藥材粉末2g，加60%甲醇50mL，加熱回流1h，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，用石油醚(30～60℃)振搖提取2次，每次20mL，棄去石油醚液，水液加鹽酸5mL，加熱回流1h，冷卻后用乙醚振搖提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗滌，棄去水洗液，乙醚液揮干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。

方法2，取對(duì)照藥材粉末2g，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流至提取液無(wú)色，棄去石油醚液，藥渣揮干石油醚，加甲醇-水-鹽酸((12∶7∶1))混合溶液50mL，回流1h，濾過(guò)，濾液蒸至近干，加水30mL使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20mL，合并乙醚液，用水30mL洗滌，棄去水洗液，乙醚液揮干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。

方法3，取對(duì)照藥材粉末2g，置索氏提取器中，加石油醚(30～60℃)適量，加熱回流至提取液無(wú)色，棄去石油醚液，藥渣揮干石油醚，加甲醇50mL，回流提取1h，濾過(guò)，濾液濃縮至約1mL，作為供試品溶液。

吸取上述供試品溶液各5μL，點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以3 %三氯化鋁乙醇溶液，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果見(jiàn)圖7，方法1為最佳，故采用該法為供試品溶液制備方法。

3.2 展開(kāi)系統(tǒng)的選擇:取對(duì)照藥材粉末2g，按2.1項(xiàng)下薄層色譜鑒別方法制備供試品溶液和對(duì)照藥材溶液，參考《中國(guó)藥典》2010年版一部木賊、地棉草、翻白草項(xiàng)下薄層鑒別展開(kāi)系統(tǒng)[5]，選用3種展開(kāi)系統(tǒng)展開(kāi)，分別為展開(kāi)系統(tǒng)1：環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(2∶1∶0.1)、展開(kāi)系統(tǒng)2：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2∶1)、展開(kāi)系統(tǒng)3：甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)，結(jié)果見(jiàn)圖8，經(jīng)比較展開(kāi)系統(tǒng)2較好。

考慮到2的最低熒光點(diǎn)的Rf值較小，不在規(guī)定的0.2～0.8 之間，故將展開(kāi)系統(tǒng)調(diào)整為甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)，取得了較好的結(jié)果，結(jié)果見(jiàn)圖9，故最后選擇的展開(kāi)系統(tǒng)為甲苯-乙酸乙酯-甲酸(6∶2.5∶1)。

[1]內(nèi)蒙古植物志編輯委員會(huì). 內(nèi)蒙古植物志(第二版)[M]. 第四卷.呼和浩特: 內(nèi)蒙古人民出版社, 2000,170.

[2] 朱亞民. 內(nèi)蒙古植物藥志(第二卷)[M]. 呼和浩特: 內(nèi)蒙古人民出版社, 2000,417.

[3] 白清云. 中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)蒙醫(yī)學(xué)[M]. 上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社, 1992,212.

[4] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)(蒙藥分冊(cè))[S]. 1998,29.

[5] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì). 中國(guó)藥典[S].一部. 中國(guó)中醫(yī)藥科技出版社，2010，63, 127, 383.

2015年11月14日收稿

TLC Identification of Mongolian Medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge

Chang xiaowei Ba junjie

School of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University, Hohhot 010110, China

Objective: To establish the method for TLC identification of mongolian medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge. Methods: Thin layer chromatography (TLC). Results: The same color fluorescent spots are displayed in chromatography of test products and the control product. Conclusion: The method for TLC identification of mongolian medicine Eritrichium rupestre (Pall.) Bunge has been established in order to improve the quality standard of the Mongolian medicine.

Mongolia medicine; Eritrichium rupestre (Pall.) Bungeo; TLC identification

△國(guó)家藥典委員會(huì)藥品標(biāo)準(zhǔn)提高項(xiàng)目( 453)

常霄巍(1990 -)，男，漢族，遼寧沈陽(yáng)人，碩士研究生，主要從事有機(jī)藥物合成研究。

R291.2

B

1006-6810(2016)10-0051-04

*通訊作者：巴俊杰(1957 -)，男，蒙古族，內(nèi)蒙古通遼人，教授，碩士研究生導(dǎo)師，主要從事蒙藥質(zhì)量控制和有機(jī)藥物合成研究。