周君安　孫　琳孫井龍（江蘇豪森藥業(yè)集團有限公司　連云港222000）

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利奈唑胺中對映異構(gòu)體的測定

周君安孫琳*孫井龍（江蘇豪森藥業(yè)集團有限公司連云港222000）

摘要：目的：對利奈唑胺中的對映異構(gòu)體進行測定。方法：采用高效液相色譜法，CHIRALPAK AD-H（250mm×4.6mm 5μm）；以正己烷-異丙醇-二乙胺（85∶15∶0.2）為流動相；紫外檢測器；流速為1.0mL/min；檢測波長為254nm；柱溫為40℃。結(jié)果：利奈唑胺中對映異構(gòu)體能得到良好的分離，峰面積與濃度在一定的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論：該方法作為利奈唑胺中對映異構(gòu)體的檢測方法準(zhǔn)確、可靠。

關(guān)鍵詞：利奈唑胺液相色譜對映異構(gòu)體

利奈唑胺（linezolid）屬噁唑烷酮類抗菌新藥。該藥對葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬等革蘭陽性菌具有良好的抗菌作用，包括多重耐藥菌，如MRSA、多重耐藥肺炎鏈球菌、萬古霉素耐藥腸球菌[1，2，3]。該藥于2000年獲得美國FDA批準(zhǔn)，2007年進入中國市場。根據(jù)ICH指導(dǎo)原則及《中國藥典》四部通則指導(dǎo)原則要求[4]，本實驗建立了利奈唑胺中對映異構(gòu)體的檢測方法。

1　儀器與試劑

儀器：電子分析天平，梅特勒XS105；Agilent 1200液相色譜儀，安捷倫色譜工作站；色譜柱：CHIRALPAK AD-H（250mm× 4.6mm 5μm）。試劑：正己烷-異丙醇-二乙胺均為色譜純，來自MERCK公司；利奈唑胺及利奈唑胺對映異構(gòu)體均為本公司自制。

2　試驗過程與結(jié)論

2.1色譜條件：照液相色譜測定法（《中國藥典》2015年版通則0512），以正己烷-異丙醇-二乙胺（85∶15∶0.2）為流動相；紫外檢測器；流速為1.0mL/min；等度洗脫；檢測波長為254nm；柱溫為40℃；進樣體積10μL。

2.2試驗溶液配制：取利奈唑胺適量，精密稱定，加適量甲醇溶解，并用流動相稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，加流動相稀釋制成每1mL中含5μg的溶液，作為對照溶液；取利奈唑胺及利奈唑胺對映異構(gòu)體對照品適量，加適量甲醇溶解，用流動相稀釋制成每1mL中約含0.25mg的溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液。

2.3系統(tǒng)適用性試驗：量取系統(tǒng)適用性溶液10μL，注入高效液相色譜儀，記錄液相圖譜。從實驗圖譜看出，利奈唑胺與對映異構(gòu)體分離度良好，分離度為5.0，表明該分析方法專屬性良好。

2.4定量限和檢測限試驗：將對照溶液逐步稀釋，分別進樣至信噪比（峰高/基線噪聲）為3±1為檢測限，至信噪比為10±2為定量限。結(jié)果見下表。

檢測限　　定量限檢測濃度比值（%）對映異構(gòu)體　1.2　 120　 0.025　 2.5　 250　 0.05利奈唑胺　1.2　 120　 0.025　 2.5　 250　 0.05名稱　濃度（ng）檢測量（ng/mL）檢測濃度比值（%）濃度（ng）　檢測量（ng/mL）

2.5線性關(guān)系試驗：按照標(biāo)準(zhǔn)限度配制線性關(guān)系試驗溶液，利奈唑胺對映異構(gòu)體在0.25～500μg/mL的范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù)皆大于0.9990，說明線性良好。

名稱　　回歸方程　　相關(guān)系數(shù)利奈唑胺對映異構(gòu)體　A=29.627×C-0.173　r=0.9998

2.6系統(tǒng)精密度：考察供試品溶液及對照溶液連續(xù)六針進樣試驗結(jié)果見下表。

項目對映異構(gòu)體（%）對映異構(gòu)體平均值（%）　　未檢出SD對映異構(gòu)體（%）　/ 第1次　第2次　第3次　第4次　第5次　第6次未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出

由結(jié)果可見，利奈唑胺對映異構(gòu)體平行測定六次，均未檢出，說明本方法系統(tǒng)的精密度符合實驗要求。

2.7溶液穩(wěn)定性:考察供試品溶液及對照溶液在選定稀釋液中的穩(wěn)定性，試驗結(jié)果下表。

放置時間對映異構(gòu)體（%）0h　 2h　 4h　 8h　 12h　 24h　　結(jié)論未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　未檢出　無降解

由結(jié)果可以看出，利奈唑胺樣品在流動相中24h內(nèi)穩(wěn)定，無對映異構(gòu)體降解產(chǎn)生。

2.8回收率：稱取利奈唑胺約50mg，置50mL量瓶中，作為回收率基質(zhì)樣品；另精密稱取利奈唑胺對映異構(gòu)體對照品約5mg，置250mL量瓶中，加適量乙腈溶解后，用稀釋液稀釋定容至刻度，作為儲備溶液。以對映異構(gòu)體限度為基準(zhǔn)100%，分別精密量取儲備溶液制成含雜質(zhì)40%、100%和120%的溶液各三份，作為供試品溶液。定量測定的利奈唑胺對映異構(gòu)體的平均回收率介于95%～104%之間，RSD為5.43%，說明本分析方法對利奈唑胺對映異構(gòu)體的測定是準(zhǔn)確的。

3　討論

用高效液相色譜法測定利奈唑胺中對映異構(gòu)體專屬性良好；對檢測限、定量限進行測定，說明本方法檢測靈敏度高，能保證對低限度溶劑的良好檢測；另外對線性關(guān)系、系統(tǒng)精密度、溶液穩(wěn)定性、回收率進行測定，發(fā)現(xiàn)本方法均能滿足上述實驗的要求，對利奈唑胺中對映異構(gòu)體進行準(zhǔn)確定量，能滿足對利奈唑胺中對映異構(gòu)體的含量控制。

參考文獻

[1]李娉，李慶林，劉麗萍，等.利奈唑胺和萬古霉素對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染療效的Meta分析[J].安徽醫(yī)藥，2015，19（5）：969-973.

[2]毛銳.利奈唑胺治療醫(yī)院獲得性耐甲氧西林金黃色葡萄球菌肺炎的療效觀察[J].北方藥學(xué)，2015，12（5）：60-61.

[3]劉麗.利奈唑胺治療老年人革蘭陽性菌感染的療效[J].吉林醫(yī)學(xué)，2015，36（15）：3289-3290.

[4]國家藥典委員會.中國藥典四部通則[S].中國醫(yī)藥科技出版社，2015：59，374.

Determination of enantiomers in linezolid

Zhou Junan Sun Lin*Sun Jinglong（Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Co.，Ltd. Lianyungang 222000 China）

Abstract：Objective: To establish a method for detection of enantiomers in linezolid Methods The enantiomers in linezolid was determined by HPLC with CHIRALPAK AD -H（250mm×4.6mm 5μm）column; the mobile phase was in the phase of hexane -isopropanol -diethylamine-（85∶15∶0.2）and with UV detector; The flow rate was 1.0mL/min; detection wavelength was 254nm; column temperature was 40℃; Results The enantiomers could be completely separated，and the calibration curves hand good liner relationship within a certain range Conclusion this method is proved accurate and reliable，it can be used for the determination of enantiomers in linezolid

Key words：Linezolid HPLC Enantiomers

*通訊作者

中圖分類號：R917

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1672-8351（2016）04-0001-02