崔錦良，金秋萍，方志成，鄭麗卿，闕小峰，司文會

（1.蘇州泰事達檢測技術(shù)有限公司，江蘇蘇州 215002；2.蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學院，江蘇蘇州 215008）

芡實中直鏈淀粉的測定研究*

崔錦良1，金秋萍1，方志成1，鄭麗卿1，闕小峰2，司文會2

（1.蘇州泰事達檢測技術(shù)有限公司，江蘇蘇州 215002；2.蘇州農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學院，江蘇蘇州 215008）

文章采用雙波長分光光度法測定芡實中直鏈淀粉。該試驗方法供試液直鏈淀粉含量在0～3 mg之間線性良好，精密度試驗相對標準偏差為1.62%，回收率在92.0%～103.0%之間。

雙波長分光光度法 芡實 直鏈淀粉

芡實是睡蓮科芡屬植物芡的成熟果仁，別名為雞頭米，雞頭苞，雞頭蓮，刺蓮藕[1]。原產(chǎn)于東南亞，我國自古就有栽培，分布于湖泊，塘灘地。芡實種子內(nèi)的種仁可供食用，其含有豐富的淀粉、脂肪、鈣、磷、鐵、硫胺素、核黃素、尼克酸、抗壞血酸和微量胡蘿卜素[2]。

淀粉不是單純的分子，而是一種混合物，由2種不同類型的淀粉組成，一種是直鏈淀粉，一種是支鏈淀粉[3]。淀粉是芡實中含量最高的組分，其直鏈淀粉和支鏈淀粉含量比例對芡實品質(zhì)、口感具有決定性影響。

近年來科研工作者著重研究了芡實的育種和栽培技術(shù)，芡實的化學成分，蛋白質(zhì)的氨基酸組成，以及芡實的藥學價值和食用方法。對芡實中直鏈淀粉和支鏈淀粉的研究較少。

文章對芡實中直鏈淀粉測定方法進行了研究試驗，根據(jù)直鏈淀粉遇碘形成純藍色復合物基團，支鏈淀粉遇碘形成紫紅色復合物基團的顯色特征，運用雙波長分光光度法進行測定直鏈淀粉的含量[4]。該試驗芡實樣品選自蘇州車坊水八仙種植基地和蘇州陽澄湖芡實種植基地。

1 試驗部分

1.1 主要試劑與儀器

直鏈淀粉標準品；氫氧化鉀：分析純；鹽酸：分析純；碘化鉀：分析純；碘：分析純。

碘試劑：稱取2 g的碘化鉀，用少量蒸餾水溶解，再加入0.2 g的碘振蕩溶解并用蒸餾水定容至100 ml。

氫氧化鉀溶液（0.5 mol/L）：稱取2.805 5 g的氫氧化鉀，加蒸餾水溶解，并定容至100 ml。

鹽酸溶液（0.1 mol/L）：取8.5 ml的濃鹽酸注入蒸餾水中，并定容至1 000 ml。

直鏈淀粉標準液（0.5 mg/ml）：稱取直鏈淀粉50 mg于100 ml容量瓶，加入氫氧化鉀溶液10 ml，用封口膜封住容量瓶口，置于沸水浴加熱，不時地振搖，30 min后取出，冷卻，用蒸餾水定容至100 ml。

TU-1810紫外可見分光光度計；pHS-25 pH計；HH-2數(shù)顯恒溫水浴鍋；XW-80A漩渦混勻器。

1.2 試驗方法

1.2.1 直鏈淀粉標準溶液的圖譜繪制

取5 ml的直鏈淀粉標準液于100 ml燒杯中，加入50 ml的蒸餾水，用鹽酸溶液調(diào)pH至3.5左右，混勻，加入1 ml的碘試劑，用蒸餾水定容至100 ml。用1 cm的比色皿在400～800 nm波長下掃描，繪制圖譜。

1.2.2 直鏈淀粉標準曲線的繪制

分別取直鏈淀粉標準液（0.5 mg/ml）0，1，2，3，5，6 ml于100 ml比色管中，加入50 ml的蒸餾水，用鹽酸溶液調(diào)pH至3.5左右，混勻，加入1 ml的碘試劑，用蒸餾水定容至100 ml。用1 cm的比色皿在535 nm和570 nm波長下測定吸光度，以ΔA=A570-A535為縱坐標，直鏈淀粉含量為橫坐標，繪制直鏈淀粉標準曲線。

1.2.3 樣品中直鏈淀粉測定

取勻質(zhì)的樣品100 mg左右于100 ml燒杯中，加入10 ml 氫氧化鉀溶液，用封口膜封口，置于沸水浴加熱，不時振搖，30 min后取出，冷卻，用蒸餾水定容至100 ml。過濾，取濾液待用。分別取2份15 ml的濾液于100 ml的比色管中，1份加入40 ml的蒸餾水，用鹽酸溶液調(diào)pH至3.5左右，加入1 ml的碘試劑，用蒸餾水定容至100 ml，混勻，靜置15 min，待測。

另1份加入40 ml蒸餾水，用鹽酸溶液調(diào)pH至3.5左右，加蒸餾水定容至100 ml，混勻，靜置15 min，待測。以零管為參比，用1 cm比色皿測定檢測波長下的吸光度值。

2 結(jié)果與討論

2.1 測定波長的確定

直鏈淀粉與碘作用產(chǎn)生純藍色基團，支鏈淀粉與碘作用生成紫紅色基因。根據(jù)雙波長比色原理，若試樣溶液在2個波長處均有吸收，則2個波長處的吸光度差值與溶液中待測物質(zhì)的濃度成正比。取直鏈淀粉和支鏈淀粉掃描液在400～800 nm波長下掃描，然后在同一坐標中繪制，見圖1。根據(jù)上述原理和掃描的圖譜，確定直鏈淀粉的測定雙波長為535 nm和570 nm。

圖1 直鏈淀粉和支鏈淀粉掃描圖譜

圖2 直鏈淀粉標準曲線

表1 直鏈淀粉含量與吸光度測定數(shù)據(jù)

表2 直鏈淀粉精密度測定數(shù)據(jù)結(jié)果

2.2 直鏈淀粉標準曲線繪制

以零管為參比，采用雙波長法測定535 nm和570 nm下的吸光度。測定數(shù)據(jù)如表1。以直鏈淀粉含量為橫坐標，以ΔA=A570-A535為縱坐標，繪制標準曲線如圖2。根據(jù)線性回歸，所得曲線為ΔA=0.023 4 x+0.001，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 7，結(jié)果表明該試驗具有良好的線性。

2.3 精密度試驗

分別取直鏈淀粉標準液（0.5 mg/ml）5 ml，加入50 ml的蒸餾水，用鹽酸溶液調(diào)pH至3.5左右，混勻，加入1 ml的碘試劑，用蒸餾水定容至100 ml。用1 cm的比色皿連續(xù)測定10次，結(jié)果表明，直鏈淀粉含量相對標準偏差1.62%。測定數(shù)據(jù)結(jié)果見表2。

表3 樣品中直鏈淀粉加標回收率試驗結(jié)果

2.4 回收率試驗

在芡實樣品中分別加入不同量的直鏈淀粉標準溶液，按照該試驗方法來測定樣品加標回收率，測試結(jié)果見表3。

結(jié)果表明，直鏈淀粉加標回收率在92.0%～103.0%，該方法具有較好的準確性。

2.5 結(jié)論

該試驗采用雙波長分光光度法測定芡實中直鏈淀粉含量，供試液中直鏈淀粉在0～3 mg之間線性關(guān)系良好，精密度試驗相對標準偏差1.62%，回收率在92.0%～103.0%之間。結(jié)果表明該試驗方法可操作性強，測定結(jié)果準確。

[1] 趙有為．中國水生蔬菜．北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1999

[2] 中國科學院中國植物志編輯委員會．中國植物志 第二十七卷．北京：科學出版社，1976

[3] 孫成斌．直鏈淀粉與支鏈淀粉的差異．黔南民族師范學院學報，2000，（2）

[4] GB 7648-1987，水稻、玉米、谷子籽粒直鏈淀粉測定法

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