徐自強(qiáng)，何云強(qiáng)，傅紅興，徐艷艷，蔡勇，夏鵬（.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院　移植中心，浙江　溫州　505；.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院　外科實(shí)驗(yàn)室，浙江　溫州　505；.溫州醫(yī)科大學(xué)　藥學(xué)院，浙江　溫州　505；.麗水市中心醫(yī)院藥劑科，浙江　麗水　000）

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微囊化胰島移植聯(lián)合腎動(dòng)脈重建緩解糖尿病腎病大鼠早期腎臟病變

徐自強(qiáng)1，何云強(qiáng)2，傅紅興3，徐艷艷4，蔡勇1，夏鵬1
（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院移植中心，浙江溫州325015；2.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院外科實(shí)驗(yàn)室，浙江溫州325015；3.溫州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，浙江溫州325035；4.麗水市中心醫(yī)院藥劑科，浙江麗水323000）

[摘 要]目的：建立微囊化胰島移植聯(lián)合腎動(dòng)脈重建大鼠模型，并觀察該模型對(duì)糖尿病腎?。―N）大鼠早期腎臟病變的療效。方法：SD大鼠單次大劑量腹腔注射鏈脲佐菌素建立糖尿病模型。實(shí)驗(yàn)分為3組：①DN組；②微囊組（采用微囊化胰島腹腔移植）；③聯(lián)合組（進(jìn)行微囊化胰島移植聯(lián)合腎動(dòng)脈重建）。各組觀察4周后，收集24 h內(nèi)所有尿液，檢測(cè)尿蛋白總量，并隨機(jī)檢測(cè)各組血糖。收集各組腎臟和腎動(dòng)脈分別進(jìn)行PAS染色和HE染色，并觀察結(jié)果。結(jié)果：微囊化胰島移植聯(lián)合腎動(dòng)脈重建可以降低大鼠血糖，明顯減少尿蛋白。腎臟PAS染色提示聯(lián)合組和微囊組均可以減輕腎小球硬化，但2組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。聯(lián)合組和微囊組腎動(dòng)脈內(nèi)膜增厚不顯著。結(jié)論：微囊化胰島移植聯(lián)合腎動(dòng)脈重建可以顯著減輕早期DN病變。

[關(guān)鍵詞]胰島移植；糖尿病腎?。荒I小球硬化癥；大鼠

糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病患者最常見的全身性微血管并發(fā)癥之一，具有治療難、發(fā)展快、預(yù)后差等特點(diǎn)，是導(dǎo)致終末期腎病的主要原因之一[1]。糖尿病對(duì)腎臟的損傷是多方面的，首先，糖尿病可累及腎臟內(nèi)部所有結(jié)構(gòu)；其次，糖尿病還可累及腎動(dòng)脈，臨床上表現(xiàn)為動(dòng)脈粥樣硬化性腎血管病[2]。因此，改善甚至逆轉(zhuǎn)糖尿病患者的腎臟病變需要采用綜合治療策略。

通過(guò)微囊化技術(shù)包裹胰島[3]，可達(dá)到移植物免疫隔離并延長(zhǎng)移植物生存期的目的。其原理是應(yīng)用生物相容性較好的半透膜如海藻酸鈉-聚賴氨酸-海藻酸鈉（alginate-polylysine-alginate，APA）微囊，允許糖、氧氣等營(yíng)養(yǎng)成分自由進(jìn)出，但阻止胰島細(xì)胞與受者免疫系統(tǒng)接觸[4]。胰島細(xì)胞經(jīng)過(guò)微囊包裹，移植后不再需要使用免疫抑制劑，且術(shù)后使受者血糖能較好地維持在正常水平。腎動(dòng)脈重建可以治療動(dòng)脈粥樣硬化性腎血管病，恢復(fù)腎臟良好的血供。本實(shí)驗(yàn)探索性建立這種聯(lián)合治療模型，研究改善早期DN大鼠腎臟病變的可行性。

1　材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康成年雄性SD大鼠18只，體質(zhì)量200～220 g，其中14只用于DN模型的建立，4只作為血管移植供體。健康成年雄性Wsitar大鼠16只，體質(zhì)量200～250 g，作為分離胰島細(xì)胞供體。其中2只Wsitar大鼠分離的胰島經(jīng)微囊化后移植給1只SD大鼠受體。所有實(shí)驗(yàn)大鼠均由溫州醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2實(shí)驗(yàn)材料 海藻酸鈉（上海精細(xì)化工科技有限公司）；聚左賴氨酸（wt 15 000～30 000）、V型膠原酶（Sigma公司，美國(guó)）；雙硫腙（dithizone，DTZ，上海三愛思試劑有限公司）；胎牛血清FBS（天津市灝洋生物制品科技有限責(zé)任公司）；Ficoll-Paque PLUS溶液（GE公司，美國(guó)）；Hepes（ShangHai Mdmy Science & Technologies公司）；鏈脲佐菌素（Sigma公司，美國(guó)）；Hank’s液（吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司）；大鼠胰島素ELISA試劑盒（上海朗頓生物科技有限公司）；RPMI 1640培養(yǎng)液（Gibco，Thermo Fisher Scientific，USA）；HE試劑盒（北京索萊寶科技有限公司）。

1.3胰島細(xì)胞分離和微囊化 Wsitar大鼠持續(xù)吸入異氟烷麻醉后，腹部作V形切口，用動(dòng)脈夾夾閉于膽總管入十二指腸端；大鼠破心處死后，于膽總管左右肝管分叉處用套管針行膽總管插管；逆行胰管灌注V型膠原酶溶液8～10 mL（0.8 mg/mL，pH= 7.8）。待其膨脹后輕輕將其胰腺剝離后整塊取下，放入同濃度V型膠原酶溶液離心管中；37 ℃恒溫水浴震蕩消化約15 min，待胰腺組織消化至大部分成乳糜狀后，加入35 mL 4 ℃ Hank’s液終止消化，輕搖振蕩后以離心半徑4.5 cm 1 000 r/min離心3 min；棄去上清液，再加入25 mL 4 ℃ Hank’s液振搖50 s，用一次性滴管反復(fù)吹打沉淀，使其充分分散；溶液經(jīng)過(guò)800 μm不銹鋼篩網(wǎng)，收集濾液后同上法離心洗滌3 min；將沉淀轉(zhuǎn)移至15 mL離心管中，加入RPMI 1640培養(yǎng)液至15 mL，以離心半徑6.5 cm 1 000 r/min離心洗滌5 min。在消化后的胰腺組織中加入5 mL Ficoll-Paque PLUS溶液，吹打使其充分混勻，在其液面上小心加入Hank’s液5 mL，以離心半徑6.5 cm、2 000 r/min離心15 min，吸取Hank’s液和Ficoll-Paque PLUS液交界層液面的組織懸塊，即為純化的胰島，充分洗滌后，加入RPMI1640培養(yǎng)液置于37 ℃、5% CO2中培養(yǎng)，準(zhǔn)備制備胰島微囊[5]。

FDA-PI染色計(jì)算胰島活性：分別加入已配制好的PI、FDA各7 μL，混勻后在熒光顯微鏡下觀察胰島細(xì)胞熒光染色情況，估算存活的細(xì)胞所占的比例，計(jì)數(shù)50個(gè)左右的胰島細(xì)胞團(tuán)的活性比例，計(jì)算出平均值作為胰島活性大小。

胰島當(dāng)量（islet equivalent，IEQ）計(jì)算：鏡檢計(jì)數(shù)DTZ陽(yáng)性細(xì)胞團(tuán)，分別用標(biāo)尺測(cè)量其直徑，并根據(jù)IEQ表?yè)Q算為直徑相當(dāng)于150 μm胰島的IEQ，再根據(jù)以下公式計(jì)算總胰島當(dāng)量：總IEQ=（3次總IEQ）×20×樣本量（mL）。

將約4 000當(dāng)量的胰島與5 mL海藻酸鈉溶液（濃度為15 g/L）均勻混合。采用高壓靜電成囊技術(shù)將上述混合液滴入CaCl2溶液（濃度為0.1 mol/L）中，形成海藻酸鈣微膠珠，并轉(zhuǎn)移入0.5%聚左賴氨酸溶液中輕輕振搖；再用海藻酸鈉溶液（濃度為1.5 g/L）包裹微囊；最后以枸櫞酸鈉溶液（濃度為55 mmol/L）液化囊心，0.9%氯化鈉溶液洗滌3次后，得到微囊化的胰島，即包裹胰島的APA微囊。

1.4大鼠糖尿病模型的建立 SD大鼠按50 mg/kg劑量一次性腹腔注射（溶劑為0.1 mol/L枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液，pH=4.2）鏈脲佐菌素。每日予以正常飲食。72 h后，大鼠血糖連續(xù)3次檢測(cè)維持在16.6 mmol/L以上，則認(rèn)為糖尿病建模成功。糖尿病建模8周后，將糖尿病大鼠隨機(jī)分為3組：DN組，6只，腹腔注射枸櫞酸-枸櫞酸鈉緩沖液；微囊組，4只，腹腔移植胰島2 000當(dāng)量的APA微囊；聯(lián)合組，4只，腹腔移植胰島2 000當(dāng)量的APA微囊聯(lián)合腎動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈旁路顯微吻合術(shù)。

1.5移植實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取體質(zhì)量相匹配的4只健康SD大鼠為供體。腹腔注射水合氯醛，麻醉成功后。腹部縱形切口，游離下段腹主動(dòng)脈和雙側(cè)髂外動(dòng)脈。選擇分支較少的一側(cè)髂外動(dòng)脈，游離約0.5 cm，在腹主動(dòng)脈分叉處結(jié)扎對(duì)側(cè)髂外動(dòng)脈。切取腹主動(dòng)脈約1.5 cm和延續(xù)的髂外動(dòng)脈0.5 cm。肝素生理鹽水沖洗血管腔。標(biāo)本浸泡在0.9%氯化鈉溶液中，準(zhǔn)備搭橋時(shí)用。受體為建模成功的DN組大鼠。大鼠經(jīng)麻醉成功后，上腹部縱向切口，將腸管和胃推向右側(cè)，顯露左側(cè)腎蒂血管，顯微鏡下在左腎靜脈后方小心游離腎動(dòng)脈，套絲線牽引，再游離部分腹主動(dòng)脈。血管夾阻斷腎動(dòng)脈兩端，腎臟周圍留置冰塊。在腎動(dòng)脈表明面切一長(zhǎng)約1 mm小口，在顯微鏡下將供體髂血管端和腎動(dòng)脈行端側(cè)吻合。然后阻斷腹主動(dòng)脈兩端行一長(zhǎng)約3 mm切口，將供體血管腹主動(dòng)脈端和受體腹主動(dòng)脈行端側(cè)吻合。開放血管夾，吻合口局部加壓止血。觀察5 min，吻合口無(wú)明顯出血，腎臟顏色恢復(fù)正常，將腸管復(fù)位，關(guān)閉各層。移植后1～2 d，觀察大鼠狀態(tài)良好后，腹腔注射APA微囊。

術(shù)后每天觀察大鼠活動(dòng)、精神狀態(tài)，連續(xù)3 d給予皮下注射頭孢他啶。術(shù)后每日隨機(jī)測(cè)血糖值，3 d后改為隔日檢測(cè)。非禁食血糖持續(xù)≤16.6 mmol/L，可作為胰島功能存活判定標(biāo)準(zhǔn)。術(shù)后4周收集24 h內(nèi)的尿液，行24 h尿蛋白定量。之后處死大鼠，觀察微囊在腹腔內(nèi)的狀態(tài)，并且收集各組腎臟標(biāo)本和腎動(dòng)脈。

1.6腎動(dòng)脈HE染色 用肝素生理鹽水（濃度為0.1 mg/mL）沖洗腎動(dòng)脈血管腔，4%多聚甲醛固定后石蠟包埋、切片，行HE染色。染色結(jié)果分析采用真彩色病理圖像分析系統(tǒng)，觀察腎動(dòng)脈的病理變化情況。

1.7腎小球硬化指數(shù)計(jì)算 腎臟切片行常規(guī)過(guò)碘酸雪夫（periodic acid-Schiff，PAS）染色后在400倍光鏡下拍照，通過(guò)Image-Pro Plus 6.0圖像分析軟件測(cè)定腎小球面積，并對(duì)腎小球硬化的程度進(jìn)行半定量評(píng)分（0～4分）：0分為陰性結(jié)果，即正常組織；0.5～1分為早期病理改變，0.5分為腎小球硬化病變占總面積的10%以下，1分表示硬化面積占10%～25%；2分表示硬化面積占26%～50%；3分表示硬化面積占51%～75%；4分表示硬化面積為76%～100%。每組腎小球硬化指數(shù)計(jì)算方法為雙盲評(píng)估法，每組選取10張切片，每張切片在400倍光鏡下隨機(jī)選取20個(gè)腎小球評(píng)分后取平均值。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。多組樣本均數(shù)比較采用方差齊性檢驗(yàn)，組間比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA）。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1微囊化胰島活性和糖刺激反應(yīng)評(píng)價(jià) 微囊化胰島體外靜止葡萄糖刺激胰島素分泌實(shí)驗(yàn)顯示：在低糖刺激和高糖刺激下，胰島素釋放量分別為（0.25± 0.032）ng/mL和（0.60±0.063）ng/mL，2組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。刺激指數(shù)＞2，提示微囊化胰島對(duì)糖刺激有良好反應(yīng)。

2.2模型評(píng)價(jià) 大鼠糖尿病造模成功3 d后出現(xiàn)多飲、多食、多尿等癥狀，體質(zhì)量上升不明顯。腎動(dòng)脈搭橋術(shù)后2～3 d，觀察大鼠一般情況良好，開腹確認(rèn)移植血管無(wú)血栓形成，可行微囊腹腔移植。見圖1。

圖1　腎動(dòng)脈血管搭橋聯(lián)合微囊化胰島模型

2.3各組大鼠血糖、24 h尿蛋白變化和腹腔內(nèi)APA微囊的觀察 各組大鼠血糖和尿蛋白變化見圖2。微囊組和聯(lián)合組血糖在微囊化的胰島移植后，血糖在1周內(nèi)均出現(xiàn)明顯下降，同DN組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。但隨著時(shí)間延長(zhǎng)，特別是至第4周，血糖均明顯上升，提示APA微囊胰島分泌功能隨著時(shí)間延長(zhǎng)而下降。移植4周后，檢測(cè)各組24 h尿蛋白。微囊組和聯(lián)合組尿蛋白總量顯著低于DN組（P＜0.01）；微囊組白蛋白（27.39±3.88）mg/24 h和聯(lián)合組（25.86±2.83）mg/24 h比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

至移植4周時(shí)，打開腹腔觀察體內(nèi)微囊情況，發(fā)現(xiàn)APA微囊粘連于腸管表面，部分懸浮于腹水中，可見到纖維結(jié)締組織包裹及部分微囊有破裂，微囊周圍未見明顯新生血管。

圖2　各組大鼠血糖和尿蛋白變化情況

2.4聯(lián)合移植改善腎小球硬化 DN組腎小球毛細(xì)血管袢和局部基底膜增厚，系膜基質(zhì)增生，腎小球系膜溶解，并出現(xiàn)結(jié)節(jié)性腎小球硬化；而微囊組和聯(lián)合組腎小球毛細(xì)血管袢薄而透明，基底膜無(wú)明顯增厚，系膜基質(zhì)無(wú)明顯增生，腎小球硬化得到明顯改善。通過(guò)對(duì)3組大鼠腎小球硬化指數(shù)的計(jì)算和分析比較，聯(lián)合組大鼠的硬化指數(shù)（1.37±0.91）明顯低于DN組（2.25±1.12），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；但是聯(lián)合組同微囊組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.01）。聯(lián)合組和微囊組對(duì)DN大鼠腎小球硬化的改善作用均十分明顯。見圖3。

2.5各組腎動(dòng)脈內(nèi)膜無(wú)明顯增厚 各組腎動(dòng)脈內(nèi)膜為單層內(nèi)皮細(xì)胞，無(wú)明顯增厚，提示在DN早期腎動(dòng)脈內(nèi)膜無(wú)明顯改變。見圖4。

3　討論

圖3　各組大鼠腎臟組織PAS染色（×400）

圖4　各組大鼠腎動(dòng)脈HE染色（×400）

糖尿病對(duì)腎臟的損傷最主要的表現(xiàn)為DN，臨床典型表現(xiàn)為代謝相關(guān)的腎小球硬化癥。臨床和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均表明DN的發(fā)生率與血糖的控制密切相關(guān)，血糖過(guò)高導(dǎo)致的代謝改變是影響DN發(fā)生和進(jìn)展的關(guān)鍵，因此治療DN的關(guān)鍵是控制血糖[1，6]。近年來(lái)由于胰島細(xì)胞分離和純化技術(shù)的進(jìn)步，其短期內(nèi)恢復(fù)受者血糖的效果已經(jīng)非常理想。而且大量臨床實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[7]，通過(guò)胰島細(xì)胞移植可以逆轉(zhuǎn)DN，恢復(fù)腎臟正常的濾過(guò)功能，但對(duì)于其逆轉(zhuǎn)腎病機(jī)制，未見研究報(bào)道。其次，糖尿病損傷還可累及腎動(dòng)脈，以腎動(dòng)脈開口處和近端病變?yōu)橹?，光鏡下表現(xiàn)為腎動(dòng)脈粥樣硬化，內(nèi)膜增生，管腔變細(xì)；電鏡下動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞局部損傷嚴(yán)重，內(nèi)皮細(xì)胞與內(nèi)彈力板連接處空隙增加[8]。臨床研究發(fā)現(xiàn)這類腎動(dòng)脈硬化會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的高血壓以及加速病變使腎臟失去功能，而且這種腎動(dòng)脈硬化發(fā)生后很難發(fā)生逆轉(zhuǎn)，即使血糖控制良好也用處不大[9]。最近研究[10-12]發(fā)現(xiàn)通過(guò)腎臟血管重建可以改善臟器血流。因此一種聯(lián)合治療的動(dòng)物模型將更有利于DN治療機(jī)制的研究。

大鼠腎動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈搭橋總結(jié)如下：①由于左腎動(dòng)脈距離腹主動(dòng)脈更近，因此手術(shù)首先選擇以左腎動(dòng)脈為搭橋?qū)ο?；②腎靜脈位于腎動(dòng)脈前方，靜脈壁薄，分離時(shí)注意勿損傷血管，若腎靜脈出血，則建議先壓迫止血，改選對(duì)側(cè)腎動(dòng)脈做搭橋；③腎動(dòng)脈端側(cè)吻合用11-0血管縫線，腹主動(dòng)脈端側(cè)吻合選用9-0血管縫線；④腎動(dòng)脈阻斷不要超過(guò)30 min，腎周冰塊降溫有利于保護(hù)腎臟。

本研究首次采用微囊化胰島聯(lián)合腎動(dòng)脈旁路搭橋技術(shù)治療DN大鼠。通過(guò)微囊化技術(shù)包裹胰島后，可達(dá)到免疫隔離并延長(zhǎng)移植物生存期的目的。同時(shí)采用腎動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈旁路搭橋，恢復(fù)腎臟的血供。該模型制作的難點(diǎn)在于腎動(dòng)脈和搭橋血管之間端側(cè)顯微吻合。實(shí)驗(yàn)研究中我們采用帶部分髂動(dòng)脈的腹主動(dòng)脈作為搭橋用的血管。腎動(dòng)脈血管縫合采用間斷縫合，整個(gè)血管吻合手術(shù)時(shí)間需控制在30 min內(nèi)，同時(shí)開放兩側(cè)吻合口，可防止吻合口血栓形成，開放血流后需觀察腎臟復(fù)蘇充血情況。

在研究中我們發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合組和微囊組可以緩解糖尿病大鼠持續(xù)高血糖狀態(tài)，從而明顯減少蛋白尿量，較DN組顯著改善腎小球硬化。但是在實(shí)驗(yàn)后期，微囊化胰島分泌功能均明顯下降，這也與同我們以往的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。微囊纖維化、缺氧和局部炎癥反應(yīng)是導(dǎo)致微囊內(nèi)胰島不能長(zhǎng)期存活的主要原因[13]。因此，目前采用微囊化胰島移植不能觀察胰島移植對(duì)DN的長(zhǎng)期作用。其次，研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合移植對(duì)于蛋白尿的改善并不優(yōu)于單純微囊移植。通過(guò)對(duì)腎動(dòng)脈的觀察發(fā)現(xiàn)，這各組血管內(nèi)膜增厚均不明顯。我們推測(cè)，早期DN大鼠腎動(dòng)脈血管內(nèi)膜增厚不明顯，腎動(dòng)脈重建不能改善腎臟血流。因此，選用中晚期糖尿病大鼠可能更有利于顯示腎動(dòng)脈重建對(duì)腎臟功能的改善作用。

我們的研究發(fā)現(xiàn)，微囊化胰島移植聯(lián)合腎動(dòng)脈搭橋重建大鼠的模型可以建立，且短期內(nèi)可以改善早期DN腎臟病變，減少蛋白尿的產(chǎn)生且明顯緩解DN臨床癥狀。近幾年來(lái)，胰島移植逐漸成為臨床治療糖尿病及其并發(fā)癥的熱門方法之一，其在臨床治療中展現(xiàn)出了良好的療效。因此，本實(shí)驗(yàn)中所采用的胰島微囊化移植及腎動(dòng)脈搭橋可以為中晚期DN治療提供新的研究方向。

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（本文編輯：吳昔昔）

·論著·

Transplantation of microencapsulated islets combined with renal arterial reconstruction to alleviate the early stage renal pathology in diabetic nephropathy rats

XU Ziqiang1,HE Yunqiang2,FU Hongxing3,XU Yanyan4,CAI Yong1,XIA Peng1.1.Transplantation Center,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou,325015; 2.Laboratory of Surgery,the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Wenzhou,325015; 3.School of Pharmacy,Wenzhou Medical University,Wenzhou,325035; 4.Department of Pharmacy,the Central Hospital of Lishui,Lishui,323000

Abstract:Objective:To establish rat’s model of transplantation of microencapsulated islets combined with renal arterial reconstruction and observe the curative effect of this model on the renal pathology in the early stage for the diabetic nephropathy in rats.Methods:Rat model of diabetes established by injection of a single dose of streptotocin were randomized into diabetic nephropathy (DN) group,microencapsulated islets group and combination group.After 4 weeks,24 h proteinuria and random blood glucose level of all rats were examined,and pathological changes of the kidney and renal artery were observed under optical microscope.Results:Compared with DN group,blood glucose level and 24 h proteinuria in combination group was significantly lower.Microencapsulated islets group and combination group significantly alleviated glomerulosclerosis compared to DN group.However,there was no significant difference in the glomerulosclerosis between microencapsulated islets group and combination group.In addition,the intimal thickness of renal artery between microencapsulated islets group and combination group was not obvious.Conclusion:Microencapsulated islets combined with renal artery reconstruction can improve early stage renal pathology in DN rats.

Key words:transplantation,Langerhans of islets; diabetic nephropathy; glomerulosclerosis; rats

通信作者：夏鵬，主任醫(yī)師，Email：372019615@qq.com。

作者簡(jiǎn)介：徐自強(qiáng)（1979-），男，浙江溫州人，主治醫(yī)師，碩士。

基金項(xiàng)目：浙江省科技廳實(shí)驗(yàn)動(dòng)物平臺(tái)項(xiàng)目（2013C37006）；浙江省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（LQ12H30001，LY16H050007）；浙江省衛(wèi)生廳科研基金資助項(xiàng)目（2012RCB041）。

收稿日期：2015-07-09

[中圖分類號(hào)]R322.57；R587.2

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

DOI:10.3969/j.issn.2095-9400.2016.03.002