王秋波 劉君茹 聶 興

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多種抗體檢測(cè)在自身免疫性甲狀腺疾病中的臨床應(yīng)用

王秋波 劉君茹 聶 興

【摘要】目的 探討多種抗體檢測(cè)在自身免疫性甲狀腺疾病（AITD）中的臨床應(yīng)用。方法 選取2013年7月至2015年7月遼寧錦州市中心醫(yī)院收治的AITD患者123例，根據(jù)疾病類型分為彌漫性毒性甲狀腺疾病組65例（A組）和橋本甲狀腺炎組58例（B組），同時(shí)選取同期單純性甲狀腺腫患者40例為C組，自身免疫性疾病患者42例為D組，體檢的健康者40例為對(duì)照組，比較各組患者的甲狀腺過氧化酶抗體（TPOAb）、促甲狀腺激素受體抗體（TRAb）、甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）、抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）的水平。結(jié)果 A組、B組患者的TPOAb、TRAb、TGAb陽(yáng)性率及水平明顯高于C組、D組、對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；A組、B組、C組、D組患者ANA陽(yáng)性率及AMA陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 通過對(duì)TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平測(cè)定，可以對(duì)AITD免疫紊亂進(jìn)行觀察，TPOAb、TRAb、TGAb水平檢測(cè)可以作為診斷AITD的重要依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】自身免疫性甲狀腺疾?。豢贵w檢測(cè)；臨床應(yīng)用

遼寧錦州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧錦州 121000

彌漫性毒性甲狀腺疾?。℅D）、橋本甲狀腺炎（HD）是較為常見的一類在環(huán)境因素與遺傳因素共同作用下發(fā)生的自身免疫性疾病，屬于器官特異性自身免疫性甲狀腺疾?。ˋITD），本病的共同點(diǎn)是患者血清中出現(xiàn)了很多針對(duì)甲狀腺組織的自身抗體[1]。為了進(jìn)一步了解這些抗體對(duì)甲狀腺疾病的診療價(jià)值，本研究就AITD患者的相關(guān)抗體進(jìn)行檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年7月至2015年7月遼寧錦州市中心醫(yī)院收治的AITD患者123例，根據(jù)疾病類型分為兩組：彌漫性毒性甲狀腺疾?。℅D）組65例（A組），其中女30例，男35例，年齡28～56歲，平均（37±10）歲；橋本甲狀腺炎（HD）組58例（B組），其中女25例，男33例，年齡27～56歲，平均（37±10）歲。選取同期單純性甲狀腺腫患者40例為C組，其中女19例，男21例，年齡26～57歲，平均（36±10）歲；自身免疫性疾病患者42例為D組，其中女18例，男24例，年齡27～58歲，平均（38±11）歲；健康體檢者40例為對(duì)照組，其中女20例，男20例，年齡29～59歲，平均（39±11）歲。各組受試者性別、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法 各組受試者均抽取空腹靜脈血4～5 ml，采用羅氏E601電化學(xué)發(fā)光儀及配套試劑，采用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定甲狀腺過氧化酶抗體（TPOAb）、促甲狀腺激素受體抗體（TRAb）、甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）水平，操作步驟：運(yùn)用電化學(xué)發(fā)光儀觀察抗體標(biāo)志物，以此明確其性質(zhì)。采用歐蒙進(jìn)口試劑，用免疫熒光法對(duì)受試者抗核抗體（ANA）及抗線粒體抗體（AMA）水平進(jìn)行測(cè)定，操作步驟：①準(zhǔn)備：檢查加樣板，恢復(fù)生物載片的室溫狀態(tài)，并予以標(biāo)記；②稀釋：稀釋血清，并設(shè)陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照；③加樣：在泡沫塑料板上放置加樣板，添加25 μl稀釋后的血清，防止出現(xiàn)氣泡，然后開始溫育；④溫育：在加樣板的凹槽上蓋生物薄片，開始反應(yīng)后溫育30 min；⑤沖洗：沖洗生物薄片，然后浸入PBS緩沖液中至少1 min；⑥加樣：滴加20 μl熒光素標(biāo)記的抗人球蛋白，加完后溫育，然后沖洗1 min；⑦封片：將蓋片置于泡沫塑料板的凹槽內(nèi)，滴加磷酸緩沖鹽溶液（PBS緩沖液），每個(gè)反應(yīng)區(qū)10 μl，然后用紙擦干四周與背面，將其置于蓋玻片上，繼續(xù)制作下1個(gè)載片；⑧在熒光顯微鏡下進(jìn)行觀察。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察并記錄各組受試者的TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，TPOAb、TRAb、TGAb水平以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，各抗體陽(yáng)性率以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TPOAb、TRAb、TGAb陽(yáng)性率及水平比較 A組、B組患者的TPOAb、TRAb、TGAb陽(yáng)性率及水平明顯高于C組、D組、對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1　各組TPOAb、TRAb、TGAb陽(yáng)性率及水平比較(?±s)

2.2 ANA及AMA陽(yáng)性率比較 A組、B組、C組、D組患者的ANA陽(yáng)性率及AMA陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。A組、B組、C組、D組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2　各組ANA陽(yáng)性率及AMA陽(yáng)性率比較(％)

3 討論

甲狀腺功能亢進(jìn)癥患者中約85％為GD患者，多集中于成年女性，其發(fā)病率約為女性群體的1.9％，男女比例為1:6～1:4，多見于20～40歲女性。GD是一種器官特異性自身免疫性疾病，在遺傳因素、環(huán)境因素的相互作用下，機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身發(fā)生免疫應(yīng)答的疾病狀態(tài)。發(fā)生GD時(shí)，患者體內(nèi)可查出TRAb、TGAb等多種自身抗體，其中TRAb的作用最重要[2]。TRAb主要由甲狀腺內(nèi)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，作用于促甲狀腺激素受體上，在環(huán)磷腺苷的介導(dǎo)下，增加T3、T4的合成和分泌。因此，隨著TRAb活性的增強(qiáng)，T3、T4濃度也越來(lái)越高，致使Grave病患者系統(tǒng)興奮性增強(qiáng)，表現(xiàn)出代謝亢進(jìn)。

HD與GD一樣，均為與遺傳有關(guān)的一種AITD，兩者發(fā)病機(jī)制大致相同，其臨床表現(xiàn)與GD基本一致，很難鑒別。血清TPOAb及TRAb對(duì)HD的診斷價(jià)值非常高，凡是患者具有典型的臨床癥狀，只要血清中TPOAb或TRAb顯示為陽(yáng)性，即可以確診[3]。

AITD作為一種典型的器官特異性自身免疫性疾病，可以在患者血清中測(cè)定出多種自身抗體，但AMA、ANA等部分抗體的陽(yáng)性率較低，臨床研究?jī)r(jià)值不高[4]。本研究結(jié)果顯示，AITD患者血清TPOAb、TRAb、TGAb陽(yáng)性率及水平明顯高于單純性甲狀腺腫患者、自身免疫性疾病患者與健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；ANA陽(yáng)性率及AMA陽(yáng)性率明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而與其他疾病相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在AITD的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸、診斷等方面，上述抗體均發(fā)揮了一定的作用，值得進(jìn)行深入研究[5]。

本研究顯示，在AITD患者血清中，TPOAb陽(yáng)性率為87.7％～96.6％，與既往研究[6]結(jié)果基本一致。在AITD患者中，TPOAb是細(xì)胞毒性作用的主要抗體，能夠借助補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性作用損傷甲狀腺細(xì)胞。此外，在甲狀腺素合成過程中，甲狀腺過氧化酶發(fā)揮著十分重要的作用，而甲狀腺過氧化酶與TPOAb結(jié)合之后，就會(huì)產(chǎn)生抑制效果，導(dǎo)致甲狀腺素合成逐漸下降，在負(fù)反饋的作用下，使機(jī)體促甲狀腺激素分泌不斷增多，因此兩者的變化是同步的[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，TPOAb和TGAb有密切的聯(lián)系，兩者變化十分相似，在臨床診斷中，兩者聯(lián)用的價(jià)值非常高。

綜上所述，通過對(duì)TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平測(cè)定，可以對(duì)AITD免疫紊亂進(jìn)行觀察，TPOAb、TRAb、TGAb水平檢測(cè)可以作為診斷AITD的重要依據(jù)。

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【中圖分類號(hào)】R581

【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.04.091