王秋波 劉君茹 聶 興

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多種抗體檢測在自身免疫性甲狀腺疾病中的臨床應用

王秋波 劉君茹 聶 興

【摘要】目的 探討多種抗體檢測在自身免疫性甲狀腺疾病（AITD）中的臨床應用。方法 選取2013年7月至2015年7月遼寧錦州市中心醫(yī)院收治的AITD患者123例，根據疾病類型分為彌漫性毒性甲狀腺疾病組65例（A組）和橋本甲狀腺炎組58例（B組），同時選取同期單純性甲狀腺腫患者40例為C組，自身免疫性疾病患者42例為D組，體檢的健康者40例為對照組，比較各組患者的甲狀腺過氧化酶抗體（TPOAb）、促甲狀腺激素受體抗體（TRAb）、甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）、抗核抗體（ANA）、抗線粒體抗體（AMA）的水平。結果 A組、B組患者的TPOAb、TRAb、TGAb陽性率及水平明顯高于C組、D組、對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；A組、B組、C組、D組患者ANA陽性率及AMA陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），各組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論 通過對TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平測定，可以對AITD免疫紊亂進行觀察，TPOAb、TRAb、TGAb水平檢測可以作為診斷AITD的重要依據。

【關鍵詞】自身免疫性甲狀腺疾病；抗體檢測；臨床應用

遼寧錦州市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧錦州 121000

彌漫性毒性甲狀腺疾病（GD）、橋本甲狀腺炎（HD）是較為常見的一類在環(huán)境因素與遺傳因素共同作用下發(fā)生的自身免疫性疾病，屬于器官特異性自身免疫性甲狀腺疾?。ˋITD），本病的共同點是患者血清中出現了很多針對甲狀腺組織的自身抗體[1]。為了進一步了解這些抗體對甲狀腺疾病的診療價值，本研究就AITD患者的相關抗體進行檢測，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年7月至2015年7月遼寧錦州市中心醫(yī)院收治的AITD患者123例，根據疾病類型分為兩組：彌漫性毒性甲狀腺疾?。℅D）組65例（A組），其中女30例，男35例，年齡28～56歲，平均（37±10）歲；橋本甲狀腺炎（HD）組58例（B組），其中女25例，男33例，年齡27～56歲，平均（37±10）歲。選取同期單純性甲狀腺腫患者40例為C組，其中女19例，男21例，年齡26～57歲，平均（36±10）歲；自身免疫性疾病患者42例為D組，其中女18例，男24例，年齡27～58歲，平均（38±11）歲；健康體檢者40例為對照組，其中女20例，男20例，年齡29～59歲，平均（39±11）歲。各組受試者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法 各組受試者均抽取空腹靜脈血4～5 ml，采用羅氏E601電化學發(fā)光儀及配套試劑，采用電化學發(fā)光法測定甲狀腺過氧化酶抗體（TPOAb）、促甲狀腺激素受體抗體（TRAb）、甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）水平，操作步驟：運用電化學發(fā)光儀觀察抗體標志物，以此明確其性質。采用歐蒙進口試劑，用免疫熒光法對受試者抗核抗體（ANA）及抗線粒體抗體（AMA）水平進行測定，操作步驟：①準備：檢查加樣板，恢復生物載片的室溫狀態(tài)，并予以標記；②稀釋：稀釋血清，并設陰性對照和陽性對照；③加樣：在泡沫塑料板上放置加樣板，添加25 μl稀釋后的血清，防止出現氣泡，然后開始溫育；④溫育：在加樣板的凹槽上蓋生物薄片，開始反應后溫育30 min；⑤沖洗：沖洗生物薄片，然后浸入PBS緩沖液中至少1 min；⑥加樣：滴加20 μl熒光素標記的抗人球蛋白，加完后溫育，然后沖洗1 min；⑦封片：將蓋片置于泡沫塑料板的凹槽內，滴加磷酸緩沖鹽溶液（PBS緩沖液），每個反應區(qū)10 μl，然后用紙擦干四周與背面，將其置于蓋玻片上，繼續(xù)制作下1個載片；⑧在熒光顯微鏡下進行觀察。

1.3 觀察指標 觀察并記錄各組受試者的TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進行數據處理，TPOAb、TRAb、TGAb水平以±s表示，組間比較采用t檢驗，各抗體陽性率以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 TPOAb、TRAb、TGAb陽性率及水平比較 A組、B組患者的TPOAb、TRAb、TGAb陽性率及水平明顯高于C組、D組、對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

表1　各組TPOAb、TRAb、TGAb陽性率及水平比較(?±s)

2.2 ANA及AMA陽性率比較 A組、B組、C組、D組患者的ANA陽性率及AMA陽性率明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。A組、B組、C組、D組間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表2　各組ANA陽性率及AMA陽性率比較(％)

3 討論

甲狀腺功能亢進癥患者中約85％為GD患者，多集中于成年女性，其發(fā)病率約為女性群體的1.9％，男女比例為1:6～1:4，多見于20～40歲女性。GD是一種器官特異性自身免疫性疾病，在遺傳因素、環(huán)境因素的相互作用下，機體免疫系統(tǒng)對自身發(fā)生免疫應答的疾病狀態(tài)。發(fā)生GD時，患者體內可查出TRAb、TGAb等多種自身抗體，其中TRAb的作用最重要[2]。TRAb主要由甲狀腺內淋巴細胞產生，作用于促甲狀腺激素受體上，在環(huán)磷腺苷的介導下，增加T3、T4的合成和分泌。因此，隨著TRAb活性的增強，T3、T4濃度也越來越高，致使Grave病患者系統(tǒng)興奮性增強，表現出代謝亢進。

HD與GD一樣，均為與遺傳有關的一種AITD，兩者發(fā)病機制大致相同，其臨床表現與GD基本一致，很難鑒別。血清TPOAb及TRAb對HD的診斷價值非常高，凡是患者具有典型的臨床癥狀，只要血清中TPOAb或TRAb顯示為陽性，即可以確診[3]。

AITD作為一種典型的器官特異性自身免疫性疾病，可以在患者血清中測定出多種自身抗體，但AMA、ANA等部分抗體的陽性率較低，臨床研究價值不高[4]。本研究結果顯示，AITD患者血清TPOAb、TRAb、TGAb陽性率及水平明顯高于單純性甲狀腺腫患者、自身免疫性疾病患者與健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義；ANA陽性率及AMA陽性率明顯高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義；而與其他疾病相比，差異無統(tǒng)計學意義。在AITD的發(fā)生、發(fā)展、轉歸、診斷等方面，上述抗體均發(fā)揮了一定的作用，值得進行深入研究[5]。

本研究顯示，在AITD患者血清中，TPOAb陽性率為87.7％～96.6％，與既往研究[6]結果基本一致。在AITD患者中，TPOAb是細胞毒性作用的主要抗體，能夠借助補體依賴的細胞毒性作用損傷甲狀腺細胞。此外，在甲狀腺素合成過程中，甲狀腺過氧化酶發(fā)揮著十分重要的作用，而甲狀腺過氧化酶與TPOAb結合之后，就會產生抑制效果，導致甲狀腺素合成逐漸下降，在負反饋的作用下，使機體促甲狀腺激素分泌不斷增多，因此兩者的變化是同步的[7]。本研究發(fā)現，TPOAb和TGAb有密切的聯(lián)系，兩者變化十分相似，在臨床診斷中，兩者聯(lián)用的價值非常高。

綜上所述，通過對TPOAb、TRAb、TGAb、ANA、AMA水平測定，可以對AITD免疫紊亂進行觀察，TPOAb、TRAb、TGAb水平檢測可以作為診斷AITD的重要依據。

參考文獻

[1] 馬慧英.自身免疫性甲狀腺疾病多種抗體檢測的臨床探討[J].軍醫(yī)進修學院學報,2011,32(9):937-938,940.

[2] 胡華杰.血清抗甲狀腺過氧化物酶抗體檢測在自身免疫性甲狀腺疾病診斷中的意義[J].現代實用醫(yī)學,2010,22(5):527-528.

[3] 劉學軍.血清甲狀腺過氧化物酶抗體檢測在孕婦自身免疫性甲狀腺功能紊亂中的價值[J].現代中西醫(yī)結合雜志,2014,23(19): 2148-2150.

[4] 左文標,杜安業(yè),曹玉芝,等.甲狀腺抗體檢測在GD病與橋本甲狀腺炎診斷中的意義[J].中國基層醫(yī)藥,2014,21(21):3301-3302.

[5] 劉超,陳立立,董吉祥,等.甲狀腺過氧化物酶抗體檢測的臨床意義[J].中華內分泌代謝雜志,2010,26(2):171-174.

[6] 黃紅,唐靜.自身免疫性甲狀腺疾病診斷中血清促甲狀腺受體抗體檢測的意義[J].臨床醫(yī)學,2012,32(6):14-15.

[7] 黃慧,王婷玉.抗甲狀腺球蛋白抗體及抗甲狀腺過氧化物酶抗體檢測自身免疫性甲狀腺疾病的臨床意義[J].中國保健營養(yǎng)(下旬刊),2013,23(9):4858-4859.

【中圖分類號】R581

【文獻標志碼】A 【DOI】10.12010/j.issn.1673-5846.2016.04.091