摘要：目的 比較結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）、結(jié)核菌素純蛋白衍生物（PPD）試驗(yàn)及血結(jié)核抗體（TB-ab）檢測(cè)在活動(dòng)性結(jié)核病診斷中的優(yōu)越性，并總結(jié)聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值。方法 前瞻性研究2015年1月～2016年10月本院收治疑似活動(dòng)性肺結(jié)核的患者56例，確診活動(dòng)性肺結(jié)核32例，排除24例，所有患者均行血T-SPOT.TB、PPD試驗(yàn)及血TB-ab檢測(cè)，比較三種檢驗(yàn)方法的主要診斷實(shí)驗(yàn)指標(biāo)。結(jié)果 血T-SPOT.TB、PPD試驗(yàn)、血TB-ab檢測(cè)預(yù)測(cè)活動(dòng)性肺結(jié)核靈敏度分別為87.5%、37.5%、43.8%，血T-SPOT.TB預(yù)測(cè)靈敏度最高。特異性分別為83.3%、70.6%、71.6%，血T-SPOT.TB預(yù)測(cè)特異性最高。結(jié)論 血T-SPOT.TB用于活動(dòng)性肺結(jié)核的臨床診斷具有很高的診斷價(jià)值，三者聯(lián)合檢測(cè)明顯提高活動(dòng)性肺結(jié)核的診斷準(zhǔn)確性，有必要聯(lián)合開展。

關(guān)鍵詞：結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)；活動(dòng)性結(jié)核；結(jié)核菌素試驗(yàn)；結(jié)核抗體檢測(cè) 聯(lián)合檢測(cè)

結(jié)核病是全球嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題之一，目前已成為全球所有傳染性疾病中成年人的首要死因。但由于結(jié)核病病情隱匿或表現(xiàn)不典型，極容易誤診漏診，大量肺結(jié)核患者未能被及時(shí)發(fā)現(xiàn)而暴露于社區(qū)，成為隱性傳染源。傳統(tǒng)檢查手段敏感性和特異性均較差，培養(yǎng)陽性率低且耗時(shí)較長，影響治療。因此，尋求快速、準(zhǔn)確診斷結(jié)核病的檢測(cè)方法已成為臨床的迫切需求。近年來，結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB）正被用于診斷結(jié)核感染，本研究旨在探討該技術(shù)方法及其聯(lián)合結(jié)核菌素純蛋白衍生物（PPD）試驗(yàn)、血結(jié)核抗體（TB-ab）檢測(cè)在基礎(chǔ)醫(yī)院結(jié)核病診斷中價(jià)值。

1資料與方法

1.1一般資料 選擇2015年1月～2016年10月我院呼吸內(nèi)科及感染科收治的56例疑似活動(dòng)性肺結(jié)核的患者為研究對(duì)象，其中男32例，女24例，年齡21～82歲，平均（31±6）歲。所有患者入院后即給予痰結(jié)核菌檢測(cè)3次或電子氣管鏡檢查毛刷涂片找結(jié)核桿菌或電子氣管鏡下組織活檢、胸部CT檢查，同時(shí)予以全血T-SPOT.TB試驗(yàn)檢測(cè)、結(jié)核菌素純蛋白衍生物（PPD）試驗(yàn)及血結(jié)核抗體（TB-ab）檢測(cè)。其檢測(cè)程序由專門經(jīng)過培訓(xùn)的檢驗(yàn)師負(fù)責(zé)完成并控制質(zhì)量。最終根據(jù)臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果及隨訪情況明確診斷。

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1實(shí)驗(yàn)室診斷 實(shí)驗(yàn)室痰找抗酸桿菌陽性或組織病理學(xué)可見典型改變（如干酪樣壞死）。

1.2.2臨床診斷 確診患者肺結(jié)核的診斷參照2001年中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)核病分會(huì)制訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]：均為實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌學(xué)或組織學(xué)確診患者及臨床診斷肺結(jié)核患者，有發(fā)熱、咳嗽、胸痛、咯血及中毒癥狀等臨床表現(xiàn)，有肺結(jié)核影像學(xué)表現(xiàn)，痰涂片抗酸染色、MTB培養(yǎng)陽性或組織病理學(xué)檢查陽性；或痰培養(yǎng)陰性，但臨床表現(xiàn)和影像學(xué)表現(xiàn)支持肺結(jié)核診斷，且抗結(jié)核治療有效。

1.3 T-SPOT.TB檢測(cè) 外周血T-SPOT.TB試驗(yàn)使用英國牛津原裝進(jìn)口的試劑。抽成人全血量6～10 ml，放入肝素抗凝管內(nèi)，操作步驟完全按照試劑盒提供的說明書進(jìn)行，結(jié)果判斷：①陰性對(duì)照孔點(diǎn)數(shù)為0～5，有反應(yīng)性樣本應(yīng)為抗原A或抗原B斑點(diǎn)數(shù)-陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)≥6，判斷為陽性；②陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)≥6，有反應(yīng)性樣本應(yīng)為（抗原A或抗原B斑點(diǎn)數(shù)）≥2倍（陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)），判斷為陽性。

1.4 PPD試驗(yàn) PPD 檢測(cè)法：在患者左側(cè)前臂曲側(cè)中上1/3處，皮內(nèi)注0.1 ml（5IU）PPD，局部形成皮丘，48～72 h后測(cè)量皮膚硬結(jié)平均直徑。平均直徑=（橫徑+縱徑）/2。硬結(jié)平均直徑<5mm為陰性（-）；5～9 mm為弱陽性（+）；10～19 mm為陽性（++）；>20 mm或出現(xiàn)破潰、水泡、雙圈等為強(qiáng)陽性（+++）。

1.5血TB-ab檢測(cè) 運(yùn)用免疫金標(biāo)記技術(shù)，應(yīng)用膠體金作為示蹤標(biāo)志物檢測(cè)人血清中結(jié)核桿菌IgG抗體。

2結(jié)果

2.1 56例患者中，非結(jié)核病24例，痰檢陽性或病理明確診斷活動(dòng)性肺結(jié)核病32例，其中男20例、女12例，年齡21～78歲，平均（30±4）歲。22例為單純活動(dòng)性肺結(jié)核，6例合并結(jié)核性胸膜炎，4例合并支氣管內(nèi)膜結(jié)核。血T-SPOT.TB陽性28例，PPD試驗(yàn)強(qiáng)陽性12例，血結(jié)核抗體陽性14例。32例活動(dòng)性肺結(jié)核中上述三項(xiàng)檢測(cè)同時(shí)陽性12例。

2.2 3種方法檢測(cè)活動(dòng)性肺結(jié)核的靈敏度分析 在32例確診活動(dòng)性肺結(jié)核患者中，血T-SPOT.TB、PPD試驗(yàn)、血TB-ab檢測(cè)預(yù)測(cè)活動(dòng)性肺結(jié)核靈敏度分別為87.5%、37.5%、43.8%，血T-SPOT.TB預(yù)測(cè)靈敏度最高。

2.3 3種方法檢測(cè)活動(dòng)性肺結(jié)核的特異性分析 在32例確診活動(dòng)性肺結(jié)核患者中，血T-SPOT.TB、PPD試驗(yàn)、血結(jié)核抗體檢測(cè)預(yù)測(cè)活動(dòng)性肺結(jié)核的特異性分別為83.3%、70.6%、71.6%，血T-SPOT.TB預(yù)測(cè)特異性最高。

2.4 3種方法檢測(cè)同時(shí)陽性診斷活動(dòng)性肺結(jié)核的準(zhǔn)確性明顯升高。

3討論

目前診斷結(jié)核的方法較多，如PPD試驗(yàn)、血TB-ab及血T-SPOT.TB等均可以對(duì)結(jié)核感染疾病進(jìn)行檢測(cè)，但每種檢測(cè)方法的靈敏度和特異度均有差異。PPD試驗(yàn)及血TB-Ab檢測(cè)是傳統(tǒng)結(jié)核病輔助診斷試驗(yàn)，PPD試驗(yàn)是多種抗原混合物，卡介苗、環(huán)境中分枝桿菌及致病性結(jié)核分枝桿菌所共有；而血TB-Ab檢測(cè)是運(yùn)用免疫金標(biāo)記技術(shù)，應(yīng)用膠體金作為示蹤標(biāo)志物檢測(cè)人血清中結(jié)核桿菌IgG抗體，故假陽性高，靈敏度及特異性低。然而血T-SPOT. TB 是利用結(jié)核桿菌感染者外周血單核細(xì)胞中存在結(jié)核特異的活化T 淋巴細(xì)胞，這些淋巴細(xì)胞在受到結(jié)核桿菌特異抗原刺激后并分泌γ 干擾素，通過對(duì)斑點(diǎn)進(jìn)行計(jì)數(shù)可以推測(cè)體內(nèi)是否存在對(duì)結(jié)核桿菌反應(yīng)的效應(yīng)T 細(xì)胞，從而對(duì)結(jié)核桿菌的感染進(jìn)行輔助診斷。其檢測(cè)過程中不存在與卡介苗及周圍環(huán)境發(fā)生交叉感染的可能，因此其診斷結(jié)核疾病的特異性比較高，并具有很高的敏感度，提示血T-SPOT.TB用于活動(dòng)性肺結(jié)核的臨床診斷具有很高的診斷價(jià)值。同時(shí)，本研究顯示，血T-SPOT.TB、PPD試驗(yàn)、TB-Ab聯(lián)合檢測(cè)明顯提高活動(dòng)性肺結(jié)核的診斷準(zhǔn)確性，有必要聯(lián)合開展。

綜上所述，在基層醫(yī)院開展血T-SPOT.TB檢測(cè)，尤其是聯(lián)合PPD試驗(yàn)、TB-Ab檢測(cè)用于疑似結(jié)核病的快速診斷具有重要臨床價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

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編輯/申磊