摘要：目的 建立HPLC法測定止瀉靈顆粒中甘油三油酸酯的含量的方法。方法 采用Agilent Extend C18色譜柱，以乙腈-二氯甲烷（60：40）為流動相，流速為0.8 ml·min-1，采用蒸發(fā)光檢測器，漂移管溫度為70℃，氮氣流速為1.2 L·min-1。結(jié)果 甘油三油酸酯的線性范圍為0.281～3.502 μg，r=0.9986，平均回收率為100.81%，RSD為1.3%。結(jié)論 所建立的方法簡便、定量準(zhǔn)確，可用于止瀉靈顆粒的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：薏苡仁；甘油三油酸酯；HPLC

止瀉靈顆粒收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》中藥成方制劑中的第十七冊，是由黨參、白術(shù)（炒）、陳皮、薏苡仁等十味藥材組成的復(fù)方制劑，具有補脾益氣，滲濕止瀉的功效，用于脾胃虛弱所致的大便溏泄，飲食減少，食后腹脹，倦怠懶言，以及慢性腸炎見上述證候者等癥的治療，其中薏苡仁的主要有效成份為甘油三油酸酯。在于其他藥物進(jìn)行使用時有可能會出現(xiàn)藥物相互作用。目前止瀉靈顆粒的質(zhì)量控制多數(shù)采用鑒別、檢查等測定方式進(jìn)行檢測，無含量測定的方法，是為了更好地控制止瀉靈顆粒的內(nèi)在質(zhì)量，確?；颊叩呐R床用藥安全。本文采用高效液相色譜法測定該制劑中的甘油三油酸酯含量，現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

Waters e2695高效液相色譜儀（美國）；Waters 2424蒸發(fā)光散射檢測器（美國）；甘油三油酸酯對照品（批品：111692-201509，中國藥品生物制品檢定所）乙腈、二氯甲烷均為色譜純，其他試劑均為分析純，水為純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件 色譜柱：Agilent Extend C18；（4.6mm×250mm，5μm）；流動相：乙腈-二氯甲烷（60：40）為流動相；檢驗波長：264 nm；流速：0.8 ml·min-1；柱溫：25℃；ELSD參數(shù)：漂移管溫度為70℃，氮氣流速為1.2 L·min-1。理論板數(shù)按甘油三油酸酯峰[2]計算，應(yīng)不低于3000。

2.2對照品溶液的制備 取甘油三油酸酯對照品適量，精密稱定14.03mg，加流動相制成每1ml含甘油三油酸酯0.1403mg，作為對照品儲備液（0.1403 mg·ml-1）。

2.3供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本品，混勻，取適量，研細(xì)，取約0.6 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入流動相50 ml，密塞，稱定重量，浸泡2 h，超聲處理（功率300W，頻率50 kHz）30 min，放冷，再進(jìn)行稱重，用流動相補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4陰性樣品溶液 按相應(yīng)的比例及工藝制備缺薏苡仁的樣品，按\"2.3\"項下方法配制陰性溶液，分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性供試品溶液10 μl，按照上述色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，見圖1，表明在本實驗條件下，處方中其它成分與甘油三油酸酯分離度良好，陰性供試品溶液在與對照品峰相應(yīng)處未出現(xiàn)色譜峰。

2.5線性關(guān)系考察 在上述色譜條件下，精密吸取對照品儲備液2、4、6、8、10、15、20、25μl，注入液相色譜儀，測定峰的面積，以進(jìn)樣量（μg）的對數(shù)（X）為橫坐標(biāo)，以峰面積的對數(shù)（Y）為縱坐標(biāo)，作為曲線標(biāo)準(zhǔn)，并采用最小二乘法來進(jìn)行計算，最后得出回歸方程：Y=1.2719X+3.7359 r=0.9986結(jié)果表明甘油三油酸酯在0.281～3.502μg的范圍內(nèi)呈線性關(guān)系較良好。

2.6精密度試驗 精密吸取對照品溶液（0.1403 mg·ml-1） 10μl，連續(xù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積，其峰面積RSD=0.87%（n=5）。

2.7穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液（批號：20141008），每隔2 h，進(jìn)樣1次，進(jìn)樣量10 μl，重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄峰面積，結(jié)果5次進(jìn)樣甘油三油酸酯峰面積RSD=1.21%（n=5）。表明供試品溶液在8 h穩(wěn)定。

2.8重復(fù)性試驗 取批號為20141008的樣品，按\"2.3\"項的方法進(jìn)行制備供試品溶液，共5份，測定溶液的含量，為每袋0.38 mg，RSD=0.97%（n=5）。

2.9加樣回收率試驗 精密稱取已知含量的同一批號（批號：141008，含量0.03228 mg·g-1）的樣品0.3 g，分別精密加入甘油三油酸酯對照品溶液（0.01631 mg·ml-1）10 ml，按供試品溶液的制備方法制備及上述色譜條件測定，計算溶液的回收率，結(jié)果顯示，該溶液的回收率平均值為100.81%，RSD=1.3%（n=6）。

2.10樣品含量測定 精密吸取甘油三油酸酯對照品溶液與供試品溶液（批號：141008、140611、140307）10 μl，按上述色譜條件測定，記錄峰面積，以外標(biāo)法計算樣品中甘油三油酸酯含量分別為每袋0.39、0.41、0.44 mg（n=3）。

3 討論

取樣品進(jìn)行了回流、索氏提取、超聲處理等提取方法進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示超聲處理提取方法既方便又提取效率高。

參考文獻(xiàn)：

[1]王隸書，程東，于秀明.抗病毒滴丸中連翹苷的HPLC測定[J].中國藥師，2005，8（3）：216-217.

編輯/金昊天