摘要:目的 分析HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標(biāo)本的病原微生物,為患者提供最佳的治療方案。方法 選擇2012年1月~2016年6月我中心HIV感染合并慢性腹瀉患者65例的糞便作為標(biāo)本,進(jìn)行病原微生物檢測分析。結(jié)果 65例標(biāo)本中存在51份病原微生物的感染,真菌的檢出率47.06%,比例最大。其次是隱孢子檢出率21.57%,之后是分歧桿菌17.65%,空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌的檢出率分別是5.88%、7.84%。結(jié)論 在對HIV感染合并慢性腹瀉患者的糞便標(biāo)本進(jìn)行病原微生物檢測發(fā)現(xiàn)主要以真菌、隱孢子、分歧桿菌、空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌為主,為患者積極尋找致病菌,為患者提出及早的預(yù)防以及治療方案。
關(guān)鍵詞:HIV感染合并慢性腹瀉患者;糞便標(biāo)本;病原微生物檢測
HIV即人類免疫缺陷病毒,會(huì)造成人類免疫系統(tǒng)缺陷的一種病毒。HIV破壞人體正常的免疫能力,導(dǎo)致患者最終因免疫系統(tǒng)癱瘓死亡[1]。在HIV并發(fā)性感染過程中消化道屬于一個(gè)比較常見的受累部位[2]。
1 資料與方法
1.1一般資料 選擇2012年1月~2016年6月我中心HIV感染合并慢性腹瀉患者65例,納入標(biāo)準(zhǔn):①符合流行病學(xué)史、存在艾滋病臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽 性[3];②超過3次/d的慢性腹瀉、慢性腹瀉時(shí)間超過1個(gè)月[4]。65例患者中男性40例,女性25例,年齡23~68歲,平均年齡(41.3±2.37)歲。
1.2方法
1.2.1常規(guī)培養(yǎng) 將65份新鮮糞便接種到弱選擇性培養(yǎng)基中國藍(lán)瓊脂平板、強(qiáng)選擇性的培養(yǎng)基SS瓊脂平板以及含有氯霉素的沙保羅瓊脂板平板,將接種好的平板放置在溫度為35℃的培養(yǎng)箱中24 h,檢測沙門菌、真菌、志賀菌以及腸侵襲性大腸埃希菌。
1.2.2涂片檢測 對65份糞便標(biāo)本進(jìn)行涂片,檢測原蟲。使用格蘭染色檢測真菌孢子和菌絲。使用抗酸染色檢測分歧桿菌,使用5%石炭酸復(fù)紅加溫染色,再加用美藍(lán)復(fù)染可檢測分歧桿菌。為了能夠提高檢出率可以使用甲醛-乙酸乙酯沉淀法對標(biāo)本進(jìn)行集卵,再使用改良過后的抗酸染色發(fā)對標(biāo)本進(jìn)行染色檢測隱袍子蟲卵囊,呈現(xiàn)出桃紅色或者紅色。
1.2.3微需氧培養(yǎng)檢測法 將標(biāo)本在3 h內(nèi)接種于SKIRROW培養(yǎng)基,完成接種后放入微需氧的產(chǎn)氣帶中,完成封閉之后將其放入溫度為42℃的孵箱中培養(yǎng)48 h。呈陽性可以在培養(yǎng)基中看到無色半透明的毛玻璃樣小菌落,每一個(gè)單一菌落中心凸起,周邊呈不規(guī)則狀,無溶血現(xiàn)象發(fā)生。
1.2.4金標(biāo)法 使用某品牌檢測卡將糞便標(biāo)本采集后的3h進(jìn)行檢測。
2 結(jié)果
2.1分析標(biāo)本中各種病原微生物的檢出率 65例標(biāo)本中,其中51份檢測出病原微生物的感染,陽性率是78.46%。其中真菌的檢出最多,占47.06%。使用改良后的抗酸染色法對標(biāo)本進(jìn)行染色,其中11例標(biāo)本中檢測出隱孢子蟲卵囊,占21.57%。分歧桿菌是HIV感染者在中晚期才會(huì)出現(xiàn)的主要病原菌,在本次檢測中,分歧桿菌占17.65%??漳c彎曲菌的檢出率為5.88%,難辨梭狀芽胞桿菌的檢出率為7.84%,本次研究中使用金標(biāo)法在20 min內(nèi)就可以得到結(jié)果,見表1。
3 討論
在此次的病原微生物檢測中,真菌的檢出率最多,其主要來源食道以及胃腸道的真菌感染。隱孢子蟲能夠寄生于人體或者動(dòng)物的消化道上皮細(xì)胞,在感染之后人體會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、腹痛、嘔吐等[5]。加上患者罹患艾滋病在感染之后發(fā)生致死性腹瀉的可能性大大增加。在此次研究中,隱孢子的檢出率僅次于真菌,這也成為了導(dǎo)致艾滋病患者合并存在慢性腹瀉的主要原因。一般隱孢子是通過水源污染引發(fā),如果某地區(qū)出現(xiàn)自來水氯化處理未達(dá)標(biāo)的情況其未達(dá)到殺死隱孢子包囊的情況,人體感染隱孢子的機(jī)率會(huì)增加。隱孢子的主要傳播途徑是卵囊經(jīng)糞口、手口途徑為主,艾滋病感染者疾病進(jìn)入到中晚期,檢測的CD4細(xì)胞水平會(huì)出現(xiàn)明顯的降低,這種狀態(tài)下人體感染結(jié)核分歧桿菌以及其他桿菌的可能性大大提升[6]。
在對艾滋病合并慢性腹瀉患者的分辨標(biāo)本檢測病原微生物的過程中,應(yīng)該加強(qiáng)對人體CD4細(xì)胞水平的檢測,當(dāng)CD4細(xì)胞水平出現(xiàn)異常的情況時(shí)就需要重點(diǎn)加強(qiáng)分歧桿菌的檢測。空腸彎曲菌屬于人畜共患病病原菌,這種食物源性病原菌目前已經(jīng)被認(rèn)為是全世界人類細(xì)菌性扶著的主要原因,其致病的因素包粘附、產(chǎn)生毒素和分子模擬機(jī)制等方面??漳c彎曲菌通過產(chǎn)生細(xì)胞緊張性腸毒素、細(xì)胞毒素和細(xì)胞致死性膨脹毒素致病??漳c彎曲菌中的內(nèi)毒素能夠侵襲小腸和大腸粘膜從而引發(fā)急性腸炎,也會(huì)引起腹瀉的爆發(fā)流行,導(dǎo)致人體腹瀉、腹痛,有時(shí)還會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、嘔吐以及脫水。難辨梭狀芽胞桿菌可以引發(fā)人體出現(xiàn)嚴(yán)重腹瀉、劇烈腹痛、結(jié)腸穿孔等,部分患者每天便量在4000~5000 ml,體液的大量丟失容易引發(fā)人體脫水以及電解質(zhì)紊亂,加上細(xì)菌毒素和壞死組織毒素的吸收出現(xiàn)代謝性中毒,引發(fā)人體出現(xiàn)高燒、心動(dòng)過速等。
本次研究結(jié)果顯示,65例標(biāo)本中存在51份病原微生物的感染,真菌的檢出率47.06%,比例最大。其次是隱孢子檢出率21.57%,之后是分歧桿菌17.65%,空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌的檢出率分別是5.88%、7.84%。
綜上所述,在對HIV感染合并慢性腹瀉患者的糞便標(biāo)本進(jìn)行病原微生物檢測發(fā)現(xiàn)主要以真菌、隱孢子、分歧桿菌、空腸彎曲菌、難辨梭狀芽胞桿菌為主,為患者積極尋找致病菌,為患者提出及早的預(yù)防以及治療方案。
參考文獻(xiàn):
[1]王慧珠,華文浩,李敏,等.253例HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標(biāo)本的病原微生物檢測分析[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志(電子版),2012,11(02):135-138.
[2]李敏,劉穎,焦炳欣,等.艾滋病慢性腹瀉患者隱孢子蟲及病原菌感染調(diào)查[J].中國公共衛(wèi)生,2012,19(08):1099-1101.
[3]蘇映瓊.HIV感染合并慢性腹瀉患者糞便標(biāo)本的病原微生物檢測分析[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè),2014,17(06):24-25.
[4]郭杰,何艷群,焦炳欣,等.HIV/AIDS慢性腹瀉患者149例隱孢子蟲感染分析[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,2011,23(11):868-870.
[5]蘇加云.腹瀉患者糞便病原微生物培養(yǎng)方法的探討[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,19(08):924-925+927.
[6]黃新蓉,劉劼,葉長蕓.應(yīng)用16S rDNA克隆文庫篩查腹瀉病暴發(fā)病原體及特異毒力基因驗(yàn)證[J].中國人獸共患病學(xué)報(bào),2010,29(10):900-903. 編輯/羅茗柯