宋明哲，葉麗君，3，尹彪，3，趙明，蔡靖，曾勇，3，鄔紹文

(1. 深圳中山泌尿外科醫(yī)院，深圳　518045；2. 深圳中山泌尿外科醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，深圳　518045；3. 深圳中山生殖與遺傳研究所，深圳　518045；4. 深圳中山泌尿外科醫(yī)院檢驗(yàn)科，深圳　518045)

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精漿和血清生殖激素與精液質(zhì)量的關(guān)系

宋明哲1，2，葉麗君1，2，3，尹彪1，2，3，趙明1，2，蔡靖1，4，曾勇1，2，3，鄔紹文1*

(1. 深圳中山泌尿外科醫(yī)院，深圳518045；2. 深圳中山泌尿外科醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，深圳518045；3. 深圳中山生殖與遺傳研究所，深圳518045；4. 深圳中山泌尿外科醫(yī)院檢驗(yàn)科，深圳518045)

【摘要】目的為了評(píng)估精液質(zhì)量不同的男性精漿和血清生殖激素的濃度與精子濃度及活動(dòng)力的關(guān)系，探索精漿與血清生殖激素的關(guān)系。方法對(duì)301 名男性進(jìn)行精液檢查，按照精液的質(zhì)量參數(shù)將受試對(duì)象分成4組：精液正常組(n=176)，弱精子癥組(n=66)，少精子癥組(n=40)和非梗阻性無(wú)精子癥組(n=19)。采用電化學(xué)發(fā)光免疫法測(cè)定各組受試對(duì)象血清卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、泌乳素(PRL)、孕酮(P)、睪酮(T)和雌二醇(E2)六項(xiàng)生殖激素和精漿PRL、T、P和E2 四項(xiàng)生殖激素的濃度，比較組間差異并進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果精液正常組和弱精子癥組血清FSH和E2的濃度顯著低于少精子癥組和非梗阻性無(wú)精子癥組(P<0.05)，精液正常組血清LH和P的濃度顯著低于弱精子癥、少精子癥和非梗阻性無(wú)精子癥的人群(P<0.05)；而精液正常、弱精子癥和少精子癥三組精漿PRL的濃度則高于非梗阻性無(wú)精子癥組(P<0.05)。除了非梗阻性無(wú)精子癥組，受試者血清FSH的濃度與其精子濃度呈負(fù)相關(guān)(r分別為-0.350、-0.273和-0.448，P<0.05)。精液正常組精漿PRL的濃度和精子的濃度之間呈正相關(guān)(r=0.269，P<0.05)；在少精子癥組中，亦有相同趨勢(shì)的相關(guān)性(r=0.432，P<0.05)。結(jié)論精漿PRL及血清FSH的濃度能夠反映精子濃度或活動(dòng)力，在男性不育的病因分析中具有一定的指導(dǎo)價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】男性不育；生殖激素；精漿；內(nèi)分泌

(JReprodMed2016，25(4)：341-346)

目前約有15%的育齡夫婦受到不孕不育的困擾，而男性因素所導(dǎo)致的不育占50%[1]，其中內(nèi)分泌因素是導(dǎo)致男性不育的重要原因之一。下丘腦-垂體-睪丸軸對(duì)男性生殖功能起關(guān)鍵性作用，該軸系由垂體分泌的FSH、LH和PRL以及在睪丸合成代謝的孕酮(P)、T和E2影響精子的發(fā)生、精子的濃度和活動(dòng)力[2]。雖然已有不同人群血清或精漿部分生殖激素水平的報(bào)道[3-7]，然而關(guān)于血清和精漿生殖激素與精液質(zhì)量參數(shù)關(guān)系分析的報(bào)道尚少，同時(shí)缺少闡明血清和精漿性激素生殖激素之間關(guān)系的研究。本文通過(guò)對(duì)301 例男性的精液質(zhì)量分析及血清和精漿生殖激素濃度的測(cè)定，分析比較血清和精漿生殖激素濃度與精子濃度和活動(dòng)力的關(guān)系，探究血清和精漿生殖激素與男性不育的關(guān)系。

材料與方法

一、研究對(duì)象

以2014年12月至 2015年3月來(lái)我院進(jìn)行精液檢查的男性為研究對(duì)象，年齡為17～64 歲，平均年齡(34.76±6.74) 歲，均進(jìn)行精液、血清生殖激素和精漿生殖激素檢查。根據(jù)精液參數(shù)和Nery等的研究[8]將受試對(duì)象分為4 組：精液正常組，精子濃度≥15×106/ml，總精子數(shù)≥39×106，前向運(yùn)動(dòng)精子≥32%；弱精子癥組，總精子數(shù)≥39×106，前向運(yùn)動(dòng)精子<32%；少精子癥組，總精子數(shù)<39×106，忽略精子活動(dòng)力；非梗阻性無(wú)精子癥組，兩次精液檢查，離心均未見(jiàn)精子，再結(jié)合血清生殖激素和精漿生化(鋅、果糖和肉毒堿濃度測(cè)定)和精液脫落細(xì)胞檢查，診斷為非梗阻性無(wú)精子癥。

二、精液檢查

參照WHO第5版手冊(cè)的標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行精液的采集及處理[9]。禁欲2～7 d，手淫法取精，射入一干凈廣口塑料容器中。采用Makler計(jì)數(shù)池(Sefi-Makler，以色列)載樣于SCA計(jì)算機(jī)輔助精液分析操作系統(tǒng)(Microptic，西班牙)，同時(shí)進(jìn)行精子數(shù)目、濃度及活動(dòng)力分析。

三、血清和精漿生殖激素檢查

液化后的精液經(jīng)13 000 rpm離心10 min，吸取上層精漿留作生殖激素測(cè)定。在羅氏電化學(xué)發(fā)光儀Cobase411上采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測(cè)方法對(duì)血清卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、泌乳素(PRL)、孕酮(P)、睪酮(T)和雌二醇(E2)六項(xiàng)生殖激素和精漿PRL、T、P和E2四項(xiàng)生殖激素的濃度進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒由美國(guó)Abbott公司提供。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié)果

一、各組的血清和精漿生殖激素水平比較

精液正常組和弱精子癥組的血清FSH和E2濃度顯著低于少精子癥組和非梗阻性無(wú)精子癥組(P<0.05)，精液正常組血清LH和P的濃度顯著低于其他3組(P<0.05)；而血清中PRL和T的濃度在4 組間相比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。非梗阻性無(wú)精子癥組的精漿PRL濃度顯著低于其他3 組(P<0.05)，而精漿P、T和E2濃度在各分組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2)。

二、血清生殖激素和精液質(zhì)量參數(shù)的關(guān)系

除了非梗阻性無(wú)精子癥組，其它3組血清FSH的濃度與精子濃度呈負(fù)相關(guān)；且血清FSH的濃度與前向運(yùn)動(dòng)精子百分比在精液正常組中呈負(fù)相關(guān)，而在少精子癥組則呈正相關(guān)。在精液正常和少精子癥組中，血清LH的濃度與精子濃度呈負(fù)相關(guān)。此外血清T和E2的濃度與個(gè)別分組的精子濃度和活動(dòng)力具有相關(guān)性，其中T在少精子癥組與前向運(yùn)動(dòng)精子百分比呈負(fù)相關(guān)，而E2則在弱精子癥組與精子濃度呈負(fù)相關(guān)。至于血清P和PRL的濃度均與精子濃度和活動(dòng)力無(wú)顯著的相關(guān)性(表3)。

三、精漿生殖激素和精液質(zhì)量參數(shù)的關(guān)系

精液正常組和少精子癥組的精漿PRL濃度與精子濃度呈正相關(guān)，而在弱精子癥組無(wú)相關(guān)性。對(duì)于所有分組，精漿中P、T和E2的濃度和精子濃度均無(wú)相關(guān)性，而且精漿PRL、P、T和E2四種生殖激素的濃度均與前向運(yùn)動(dòng)精子百分比無(wú)相關(guān)性(表4)。

四、精漿各項(xiàng)生殖激素之間以及精漿和血清生殖激素之間的關(guān)系

所有分組精漿的P、T和E2三者間的濃度均存在中度到高度的正相關(guān)，而精漿PRL和其它三項(xiàng)生殖激素濃度則未觀察到相關(guān)性(表5)。精漿和血清個(gè)別生殖激素間在不同分組中存在相關(guān)性，其中在精液正常和弱精子癥組，精漿和血清中P的濃度呈正相關(guān)；在弱精子癥組，精漿和血清PRL的濃度呈正相關(guān)，而精漿E2和血清P的濃度呈正相關(guān)；在少精子癥組中，精漿E2和血清LH的濃度呈正相關(guān)；在非梗阻性無(wú)精子癥組，精漿T和血清FSH濃度呈正相關(guān)。而對(duì)于所有分組，血清和精漿的P和T間沒(méi)有相關(guān)性(表6)。

表1　各組的血清生殖激素濃度(x-±s)

注：分別與少精子癥和非梗阻性無(wú)精子癥組比較，*P<0.05；分別與其他3組相比較，**P<0.05

表2　各組的精漿生殖激素濃度　(x-±s)

注：分別與其他3組相比較，*P<0.05

表3　血清生殖激素與精子濃度(ρ)及前向運(yùn)動(dòng)精子百分比(PR)的Spearman秩相關(guān)系數(shù)(r)

注：|r|<0.3，極弱相關(guān)；0.3<|r|<0.5，低度相關(guān)；0.5<|r|<0.8，中度相關(guān)；|r|>0.8，高度相關(guān)。*P<0.05；**P<0.01

表4　精漿生殖激素與精子濃度(ρ)及前向運(yùn)動(dòng)精子百分比(PR)的Spearman秩相關(guān)系數(shù)(r)

注：|r|<0.3，極弱相關(guān)；0.3<|r|<0.5，低度相關(guān)；0.5<|r|<0.8，中度相關(guān)；|r|>0.8，高度相關(guān)。*P<0.05；**P<0.01

表5　精漿中各生殖激素之間的Spearman秩相關(guān)系數(shù)(r)

注:|r|<0.3，極弱相關(guān)；0.3<|r|<0.5，低度相關(guān)；0.5<|r|<0.8，中度相關(guān)；|r|>0.8，高度相關(guān)。*P<0.05；**P<0.01

討論

由垂體產(chǎn)生的促性腺激素FSH和LH主要在血循環(huán)中發(fā)揮作用。LH作用于睪丸間質(zhì)細(xì)胞，促進(jìn)T的合成。FSH與睪丸支持細(xì)胞的FSH受體結(jié)合，與T共同調(diào)節(jié)精子的發(fā)生[10]。據(jù)表1知，精液正常組和弱精子癥組的血清FSH濃度不存在顯著差異，且其總精子數(shù)均≥39×106，說(shuō)明該兩組人群的精子發(fā)生不存在差異。而少精子癥組和非梗阻性無(wú)精子癥組的血清FSH濃度明顯高于其他兩組，可見(jiàn)這兩組人群可能因睪丸中缺少FSH受體而不利于精子的發(fā)生，進(jìn)而影響精子濃度，同時(shí)表現(xiàn)出血液中FSH濃度偏高。從表3可見(jiàn)，血清FSH濃度與精子濃度間呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明血清FSH濃度升高，精子濃度反而降低。對(duì)于每組受試對(duì)象，當(dāng)血清FSH濃度越高，說(shuō)明其FSH受體越少，對(duì)精子發(fā)生的不利影響越大，導(dǎo)致精子濃度的降低。由表1知，精液正常組和弱精子癥組的血清FSH和E2濃度均顯著低于少精子癥和非梗阻性無(wú)精子癥組，但是根據(jù)表2知精漿E2的水平在各分組間沒(méi)有顯著差異，該結(jié)果無(wú)法完全驗(yàn)證FSH可激活芳香化酶、促進(jìn)E2合成和分泌的說(shuō)法，這可能是因?yàn)榫珴{E2不似血清E2那樣具有調(diào)節(jié)作用。在本研究中血清E2濃度升高提示精子數(shù)目減少，可能是因?yàn)镋2通過(guò)多種途徑調(diào)控或干擾精子的生成所致[11-12]。由表1和表2知，精液正常組的血清LH濃度明顯低于其他三組，而其血清和精漿中T的均值均略低于其他三組；且由精液正常組和少精子癥組血清LH的濃度與精子濃度呈負(fù)相關(guān)可見(jiàn)，雖然LH濃度降低不利于T的合成，但是保持T濃度在一定的范圍內(nèi)有利于保持精子的濃度，避免T濃度過(guò)高而對(duì)下丘腦-垂體-睪丸軸系的負(fù)反饋?zhàn)饔?，降低T的濃度而影響精子發(fā)生，導(dǎo)致精子濃度降低。

表6　精漿和血清生殖激素之間的Spearman秩相關(guān)系數(shù)(r)

注：|r|<0.3，極弱相關(guān)；0.3<|r|<0.5，低度相關(guān)；0.5<|r|<0.8，中度相關(guān)；|r|>0.8，高度相關(guān)。*P<0.05；**P<0.01

PRL是由垂體分泌合成的一種多肽類(lèi)激素，其分泌受下丘腦釋放到門(mén)脈循環(huán)的多巴胺(PRL抑制因子)的影響。下丘腦分泌促性腺激素釋放激素(GnRH)與多巴胺對(duì)同一刺激或抑制作用具有同時(shí)性。當(dāng)PRL的濃度升高，說(shuō)明下丘腦-垂體-睪丸軸循環(huán)中的多巴胺被抑制，但同時(shí)GnRH亦受到抑制，導(dǎo)致垂體FSH和LH的分泌受到抑制，進(jìn)而影響精漿T和E2的合成和分泌[13]。由表1非梗阻性無(wú)精子癥組的精漿PRL濃度明顯低于其他三組可見(jiàn)，PRL濃度低反映GnRH濃度高，促進(jìn)垂體的促性腺激素的分泌，但由于非梗阻性無(wú)精子癥患者睪丸中可能因缺乏促性腺激素的受體而阻礙精子的發(fā)生，該推論可從表1中非梗阻性無(wú)精子癥組的血清FSH濃度顯著高于精液正常組的結(jié)果得到驗(yàn)證。垂體分泌的PRL理論上應(yīng)在血循環(huán)中發(fā)揮作用，但由表3和表4可見(jiàn)，各分組血清PRL的濃度與精液質(zhì)量沒(méi)有相關(guān)性，但是在精液正常組和少精子癥組有顯著正相關(guān)，說(shuō)明PRL在睪丸中也有直接作用，且其在精漿中的測(cè)定比在血清中更具意義。本研究的精漿P、T的濃度在所有分組亦不存在顯著差異，且精漿P和T與精子的濃度和活動(dòng)力間未觀察到顯著相關(guān)性，該結(jié)果與葉濤等[14]和殷?？礫15]所得結(jié)果相符。精漿E2的濃度在所有分組中亦不存在差異，且與精液質(zhì)量沒(méi)有相關(guān)性，該結(jié)果和劉思天等[12]報(bào)道的生育能力正常男性精漿E2影響精子濃度和活動(dòng)力的結(jié)論不符，但是與吳亞平等[11]報(bào)道的生育組和不育組男性的E2水平與精子的活動(dòng)力和濃度沒(méi)有相關(guān)性的結(jié)果一致，產(chǎn)生該結(jié)果差異有待進(jìn)一步深入探討。

對(duì)于所有分組，精漿P、T和E2三項(xiàng)激素水平兩兩之間均存在正相關(guān)，這是因?yàn)槿咴隗w內(nèi)屬同一生物合成途徑所致，其中P通過(guò)孕酮途徑(Δ4)合成T，而T在芳香化酶的作用下合成E2[16]。雖然個(gè)別血清和精漿生殖激素水平分別在精液正常、少精子癥和非梗阻性無(wú)精子癥組中可觀察到一定的相關(guān)性，但未總結(jié)出血清和精漿生殖激素之間的普遍規(guī)律，可能是血睪屏障的通透性、睪丸和附屬性腺的分泌能力、局部精子發(fā)生的微環(huán)境等因素影響精漿生殖激素的濃度所致。根據(jù)表3和表4，血清和精漿生殖激素的濃度能在一定程度上反應(yīng)精子的濃度和運(yùn)動(dòng)情況，但是鑒于精液和血清激素濃度的不相關(guān)性、整體與局部調(diào)控的差異等因素，血清和精漿生殖激素的聯(lián)合測(cè)定對(duì)于診斷男性不育的病因診斷，可能比單獨(dú)血素測(cè)定有更大的意義。

對(duì)于不同精液質(zhì)量的男性，其精漿PRL及血清中FSH的濃度能夠反映精子濃度或活動(dòng)力，但其血清和精漿激素濃度間沒(méi)有顯著相關(guān)性。血清和精漿生殖激素的濃度能在一定程度上反映精液的質(zhì)量，在男性不育的病因診斷中可提供潛在幫助，但血清和精漿生殖激素影響精子發(fā)生和精子濃度、活動(dòng)力的機(jī)理仍需進(jìn)一步深入研究。

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[編輯：郭永]

Relationship between reproductive hormone in serum or seminal plasma and semen quality

SONGMing-zhe1，2，YELi-jun1，2，3，YINBiao1，2，3，ZHAOMing1，2，CAIJing1，4，ZENGYong1，2，3，WUShao-wen1*

1.ShenzhenZhongshanUrologyHospital,Shenzhen518045 2.FertilityCenter,ShenzhenZhongshanUrologyHospital,Shenzhen518045 3.ShenzhenZhonshanInstituteofReproductionandGenetic,Shenzhen518045 4.DepartmentofClinicalLaboratory,ShenzhenZhongshanUrologicalHospital,Shenzhen518045

【Abstract】

Objective： To estimate the relationship between concentration and motility of sperm and reproductive hormone in serum or seminal plasma from men with different semen quality, as well as investigate the correlation between reproductive hormone in serum and in seminal plasma.

Methods： A total of 301 men were divided to four groups after semen examination according to the semen quality: normal group (n=176), asthenozoospermia group (n=66), oligozoospermia group (n=40) and non-obstructive azoospermia group (n=19). Levels of FSH, LH, prolactin (PRL), progesterone (P), testosterone (T) and estradiol (E2) in serum or seminal plasma were detected by electrochemiluminescence immunoassay. The inter-group variances were compared meanwhile the correlations were analyzed.

Results： The levels of FSH and E2in serum from normal and asthenozoospermic group were significantly lower than those from oligozoospermia and non-obstructive azoospermia group (P<0.05), while levels of LH and P in serum of normal group were significantly lower than those in the other three groups (P<0.05). The levels of PRL in seminal plasma of normal, asthenozoospermic and oligozoospermic group were significantly higher than those of non-obstructive azoospermic group (P<0.05). FSH levels in serum were negatively correlated with sperm concentration (r=-0.350, -0.273 and-0.448 respectively,P<0.05) in all groups except in non-obstructive azoospermic group. The levels of PRL in seminal plasma were positively correlated with sperm concentration both in normal (r=0.269,P<0.05) and asthenozoospermic group (r=0.432，P<0.05).

Conclusions： The PRL level in seminal plasma and FSH in serum could reflect sperm concentration and motility, which might offer reference and potential value in diagnosis of male infertility.

Key words：Male infertility；Reproductive hormone；Seminal plasma；Endocrinology

【作者簡(jiǎn)介】宋明哲，男，湖北荊州人，本科，主治醫(yī)師，泌尿外科專(zhuān)業(yè). (*通訊作者,Email：szwushaowen@sina.com)

【基金項(xiàng)目】深圳市科技研發(fā)資金項(xiàng)目(JCYJ20130401092000370)；深圳市基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(JCYJ20140415114532535)

【收稿日期】2015-12-03；【修回日期】2016-01-19

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2016.04.010