方　偉

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100015)

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·經(jīng)驗(yàn)交流·

抗凝劑對(duì)C反應(yīng)蛋白檢測(cè)結(jié)果的影響研究

方偉

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京地壇醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100015)

摘要:目的分析抗凝劑種類對(duì)C反應(yīng)蛋白(CRP)檢測(cè)結(jié)果的影響。方法隨機(jī)選取門診和住院患者120例，同時(shí)采集患者肝素和乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝標(biāo)本，在相同條件下，采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀進(jìn)行兩種全血標(biāo)本CRP濃度檢測(cè)，比較檢測(cè)結(jié)果間的差異。結(jié)果兩種抗凝標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性，但肝素抗凝標(biāo)本對(duì)CRP低、中、高值標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果均低于EDTA-K2抗凝標(biāo)本(P<0.05)。結(jié)論肝素抗凝標(biāo)本不適用于邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀CRP檢測(cè)。

關(guān)鍵詞:乙二胺四乙酸鹽；肝素；C反應(yīng)蛋白

C反應(yīng)蛋白(CRP)屬于急性時(shí)相反應(yīng)蛋白之一，對(duì)微生物具有直接及輔助清除作用，是用于細(xì)菌感染早期診斷和鑒別診斷的主要指標(biāo)[1]。在臨床檢驗(yàn)中抗凝劑的使用非常普遍，且不同檢測(cè)系統(tǒng)及項(xiàng)目都有與之相應(yīng)的抗凝劑，而不同抗凝劑對(duì)檢測(cè)項(xiàng)目的影響不同[2]。CRP檢測(cè)標(biāo)本多以肝素作為抗凝劑，血液學(xué)檢測(cè)標(biāo)本則多以乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)作為抗凝劑。在日常工作中，經(jīng)常出現(xiàn)1份標(biāo)本加做項(xiàng)目和抗凝劑使用混淆的情況。本研究以肝素和EDTA-K2抗凝標(biāo)本分別進(jìn)行CRP檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析，旨在探討兩種抗凝劑抗凝標(biāo)本對(duì)CRP檢測(cè)結(jié)果的影響，評(píng)價(jià)不同抗凝標(biāo)本能否通用。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源隨機(jī)選取2015年5～6月門診和住院患者120例，男58例，女62例，均采集晨起空腹靜脈血標(biāo)本，分別采用肝素及EDTA-K2抗凝。

1.2方法標(biāo)本采集后2 h內(nèi)，采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀及配套試劑對(duì)采集的肝素及EDTA-K2抗凝全血標(biāo)本進(jìn)行CRP檢測(cè)，嚴(yán)格按儀器、試劑盒說(shuō)明書操作。參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)EP9-A2文件的要求，在室內(nèi)質(zhì)控在控、儀器正常運(yùn)轉(zhuǎn)和試劑在效期內(nèi)的條件下進(jìn)行檢測(cè)[3]。每份標(biāo)本平行檢測(cè)3次，計(jì)算均值。本研究采用的邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀參加衛(wèi)計(jì)委臨床檢驗(yàn)中心CRP檢測(cè)室間質(zhì)評(píng)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可以接受。

2結(jié)果

120例標(biāo)本中，檢出CRP異常值標(biāo)本78例，正常值標(biāo)本42例。按CRP濃度分為低、中、高值標(biāo)本。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示，在CRP各濃度范圍內(nèi)，與EDTA-K2抗凝標(biāo)本相比，肝素抗凝標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果降低，且比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。以肝素抗凝標(biāo)本結(jié)果為Y軸，以EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果為X軸，繪制回歸直線，并計(jì)算回歸方程。直線回歸方程及相關(guān)性，見(jiàn)圖1～3。

表1　　不同抗凝標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果比較

圖1　　　低值標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性(Y=0.926 8X-

圖2　　　中值標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性(Y=0.999 8X-

圖3　　　高值標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性(Y=0.990 5X-

3討論

對(duì)于CRP低值標(biāo)本而言，肝素與EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果偏倚較大，隨著CRP濃度增大，偏倚逐漸降低[4-5]。這是因?yàn)榈蜐舛葧r(shí)，檢測(cè)結(jié)果較小，很小的差異即可導(dǎo)致較大的偏倚，隨著濃度增大，數(shù)值增大，差異所占比例相對(duì)降低，偏倚降低。本研究結(jié)果顯示，在其他條件相同的情況下，同一患者肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果低于EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果，呈負(fù)偏倚傾向，表明采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀進(jìn)行肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測(cè)可能存在系統(tǒng)誤差。臨床通常以CRP<8 mg/L作為正常參考值。在低濃度范圍，肝素抗凝全血標(biāo)本易出現(xiàn)CRP假陰性結(jié)果[6-7]。雖然兩種抗凝標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性良好，但為了保證結(jié)果可靠性，筆者不建議在采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀進(jìn)行肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測(cè)。

邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀采用膠乳試劑免疫比濁法的原理檢測(cè)CRP，通過(guò)紅細(xì)胞壓積、白細(xì)胞壓積和血小板壓積的實(shí)測(cè)值校正CRP檢測(cè)結(jié)果[計(jì)算公式為：CRP=CRP定標(biāo)曲線計(jì)算值/(1-BCT%)，BCT為白細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞壓積、血小板壓積之和]，以確保全血與血清標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果一致，提高了結(jié)果準(zhǔn)確性，優(yōu)于床旁檢驗(yàn)(POCT)分析儀。

進(jìn)行血常規(guī)檢測(cè)時(shí)，不同抗凝劑對(duì)白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果幾乎無(wú)影響，對(duì)紅細(xì)胞壓積檢測(cè)結(jié)果也影響較小[8-9]。目前血常規(guī)檢測(cè)廣泛使用的抗凝劑是國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)會(huì)(ICSH)推薦的EDTA-K2。EDTA-K2可有效結(jié)合血液中的鈣離子，通過(guò)膜離子通道進(jìn)入血小板內(nèi)[10-11]。ETDA-K2對(duì)鈣離子的螯合作用強(qiáng)于枸櫞酸鈉，能更好地防止血小板受各種因素影響而發(fā)生的凝集，對(duì)血小板計(jì)數(shù)影響較小，有較好的穩(wěn)定性[12-13]。此外，EDTA-K2血細(xì)胞有很好的保護(hù)作用[14]。因此，采用邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀檢測(cè)EDTA-K2抗凝全血標(biāo)本CRP水平，結(jié)果更加準(zhǔn)確。肝素主要通過(guò)抑制凝血活酶與凝血酶的形成[15]，同時(shí)激活纖溶酶而發(fā)揮抗凝作用。肝素可引起血小板聚集及腫脹，肝素過(guò)量可破壞血小板，對(duì)血小板檢測(cè)結(jié)果影響較大[16-17]。因此，采用校正公式進(jìn)行計(jì)算時(shí)，肝素抗凝全血標(biāo)本CRP檢測(cè)結(jié)果低于EDTA-K2抗凝標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果，出現(xiàn)系統(tǒng)誤差和假陰性結(jié)果。

本研究證實(shí)，邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀對(duì)不同抗凝劑抗凝標(biāo)本的CRP檢測(cè)結(jié)果有所差異。因此，在開展新項(xiàng)目、使用新儀器時(shí)，應(yīng)注意抗凝劑的選擇，避免因儀器和方法學(xué)的改變而用錯(cuò)抗凝劑。護(hù)士在采集外周血標(biāo)本時(shí)，應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目使用正確的抗凝管，做好分析前質(zhì)量控制工作。在具體工作中，更應(yīng)嚴(yán)格根據(jù)檢測(cè)系統(tǒng)的要求使用相應(yīng)的抗凝標(biāo)本，不能交叉使用或者一管多用，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，EDTA-K2與肝素的抗凝機(jī)制不同，對(duì)血細(xì)胞的影響不同，導(dǎo)致邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀對(duì)不同抗凝劑抗凝標(biāo)本的CRP檢測(cè)結(jié)果存在差異。采用肝素抗凝全血標(biāo)本對(duì)邁瑞B(yǎng)C-5390分析儀CRP檢測(cè)結(jié)果影響較大。不同的儀器、方法學(xué)、檢測(cè)項(xiàng)目應(yīng)根據(jù)各自的要求使用相應(yīng)的抗凝劑，不能隨意更換抗凝劑種類，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

參考文獻(xiàn)

[1]黃苑．C-反應(yīng)蛋白和血常規(guī)聯(lián)合檢測(cè)在兒科疾病中的應(yīng)用價(jià)值[J]．大家健康，2013，7(6)：52-53．

[2]于建梅．臨床中不合格的血液標(biāo)本原因分析及預(yù)防措施[J]．當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2010，16(3)：84．

[3]Clinic and Laboratory Standards Institute．EP9-A2 Method comparison and bias estimation using patient samples；approved guideline，second edition[S]．Wayne，PA，USA：CLSI，2002．

[4]杜婷，藏小晴.i-CHROMA分析儀測(cè)定CRP及hs-CRP兩種抗凝劑應(yīng)用比較[J]．中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng),2013,23(5):25-28.

[5]楊晶，何俊民.C-反應(yīng)蛋白質(zhì)控品的制備及應(yīng)關(guān)注的問(wèn)題[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2007,22(6):711-714.

[6]張廣梅.低分子肝素降低糖尿病腎病患者的尿清蛋白及C-反應(yīng)蛋白[J]．牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,34(4):39-41.

[7]戴有功.依達(dá)拉奉聯(lián)合低分子量肝素鈣治療急性腦梗死的療效觀察及對(duì)血清C反應(yīng)蛋白的影響[J]．中國(guó)醫(yī)師進(jìn)修雜志,2012,35(9):67-69.

[8]方蓉，黃宇烽，鄭均，等．抗凝劑濃度不同血液的血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀分析結(jié)果[J]．臨床檢驗(yàn)雜志，2001，19(2)：105-106．

[9]許德英，常永超，張淑珍，等．4種抗凝劑對(duì)血液分析儀計(jì)數(shù)結(jié)果的影響[J]．洛陽(yáng)醫(yī)專學(xué)報(bào)，2001，19(2)：156-157．

[10]范亞敏，張立紅，李鳳俠，等.應(yīng)用乙二胺四乙酸二鉀抗凝劑引起血小板假性減少14例分析[J]．河北醫(yī)學(xué),2011,17(9):1242-1244.

[11]王東江.低分子肝素治療急性冠狀動(dòng)脈綜合征的臨床效果及對(duì)C反應(yīng)蛋白的影響[J]．白求恩醫(yī)學(xué)雜志,2015(1):82-83.

[12]孫楊．抗凝劑EDTA致PLT假性減少[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2008，5(8)：504．

[13]馬雙雙，王紅艷，楊?。Ｒ?guī)檢驗(yàn)的質(zhì)量控制與注意事項(xiàng)[J]．重慶醫(yī)學(xué)，2009，35(18)：1694-1695．

[14]彭賢貴，王平，劉思恒．做好骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制要素分析及改進(jìn)[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，2(4)：309-310．

[15]張盼盼，韓曉慶，王紅陽(yáng)，等.普通肝素對(duì)感染性休克患者血清降鈣素原及高敏C反應(yīng)蛋白的影響[J]．中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2015,25(29):88-90.

[16]馬雨?yáng)|．血細(xì)胞分析儀測(cè)定血小板時(shí)抗凝劑等影響因素分析[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7(11)：189-191．

[17]李大鵬，呂丹，李震，等．不同血液保存抗凝劑對(duì)采集紅細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]．醫(yī)學(xué)信息，2014，14(2)：60-61．

(收稿日期：2015-12-13)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.052

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

文章編號(hào)：1673-4130(2016)06-0829-03