王　杰　艾萍萍，2　刁其玉　張乃鋒?（.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，北京0008；2.北京市昌平區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督管理局沙河防疫站，北京02206）

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復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物及血清指標(biāo)的影響

王杰1艾萍萍1，2刁其玉1張乃鋒1?
（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，北京100081；2.北京市昌平區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督管理局沙河防疫站，北京102206）

摘要:本試驗(yàn)旨在研究復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物及血清指標(biāo)的影響。選用120頭初始平均體重為（9.72±2.25）kg的斷奶仔豬，隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭。分別飼喂基礎(chǔ)飼糧（對(duì)照組）、基礎(chǔ)飼糧+0.30%復(fù)合益生菌（A組）、基礎(chǔ)飼糧+0.08%纖維寡糖（B組）、基礎(chǔ)飼糧+0.30%復(fù)合益生菌+0.08%纖維寡糖（C組），試驗(yàn)預(yù)試期4 d，正試期35 d，正試期分為第1階段（1～14 d）和第2階段（15～35 d）2個(gè)階段。結(jié)果表明：1）除試驗(yàn)15～35 d時(shí)C組試驗(yàn)仔豬料重比（F/ G）顯著低于對(duì)照組外（P＜0.05），其余各階段各組試驗(yàn)仔豬平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、料重比均無(wú)顯著差異（P＞0.05）；試驗(yàn)1～14 d時(shí)A、C組試驗(yàn)仔豬腹瀉率（DR）均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。2）試驗(yàn)第14、35天時(shí)各組試驗(yàn)仔豬糞便中芽孢桿菌數(shù)、乳酸菌數(shù)和大腸桿菌數(shù)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。3）各組試驗(yàn)仔豬各項(xiàng)血清指標(biāo)也均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。由此可見(jiàn)，本試驗(yàn)條件下，添加復(fù)合益生菌和纖維寡糖可改善斷奶仔豬斷奶后1～14 d的腹瀉情況，提高斷奶仔豬斷奶后15～35 d的飼料利用效率。

關(guān)鍵詞:復(fù)合益生菌；纖維寡糖；斷奶仔豬；生長(zhǎng)性能；糞便微生物；血清指標(biāo)

斷奶后仔豬由于自身系統(tǒng)發(fā)育不健全，再加上外界環(huán)境因素的變化，容易發(fā)生斷奶應(yīng)激。抗生素對(duì)應(yīng)激造成的仔豬早期斷奶綜合征具有較好的療效，但過(guò)多使用抗生素會(huì)導(dǎo)致腸道中細(xì)菌的耐藥性增強(qiáng)，打破原有的腸道菌群平衡狀態(tài)，最終會(huì)使仔豬產(chǎn)生嚴(yán)重腹瀉甚至死亡。因此，尋求綠色環(huán)保型添加劑是解決抗生素產(chǎn)生負(fù)面影響的有效途徑之一。目前，微生態(tài)制劑已廣泛應(yīng)用于仔豬飼糧中，對(duì)改善仔豬腸道微生態(tài)平衡和減緩早期斷奶應(yīng)激具有實(shí)用意義。益生菌是能夠改善宿主腸道菌群結(jié)構(gòu)并提高宿主健康水平和健康狀態(tài)的活菌制劑及其代謝產(chǎn)物［1］。近年來(lái)有關(guān)飼糧中添加單一或復(fù)合益生菌對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)發(fā)育影響的研究甚多，但研究結(jié)果并非一致。黃金華等［2］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加復(fù)合益生菌制劑能夠顯著提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率和免疫功能。但De Moraes等［3］報(bào)道認(rèn)為，飼糧中添加益生菌對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。董曉麗等［4］研究也發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。造成結(jié)果差異的原因可能與益生菌菌株及其添加量、飼糧組成、仔豬斷奶時(shí)間和飼養(yǎng)環(huán)境條件等因素不同有關(guān)。因此，進(jìn)一步研究由植物乳桿菌、地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌組成的復(fù)合益生菌制劑對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響具有重要意義。纖維寡糖是由2～10個(gè)葡萄糖分子通過(guò)β-1，4糖苷鍵連接而成的寡糖，是纖維素降解過(guò)程的產(chǎn)物［5］。由于纖維寡糖結(jié)構(gòu)中β-1，4糖苷鍵能作為腸道中有益菌（如雙歧桿菌、乳酸桿菌）的碳源，而大腸桿菌和真桿菌對(duì)其不能利用或代謝利用率極低。因此，仔豬飼糧中添加纖維寡糖能夠刺激仔豬大腸內(nèi)雙歧桿菌增殖，提高乳酸質(zhì)量濃度，降低結(jié)腸部位pH，提高仔豬的生長(zhǎng)性能。Otsuka等［6］報(bào)道證實(shí)，飼糧中添加纖維寡糖能夠提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能。目前，有關(guān)益生菌和纖維寡糖對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響的研究主要集中在飼糧中單獨(dú)添加復(fù)合益生菌制劑或纖維寡糖，而有關(guān)兩者組合使用對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響的研究報(bào)道甚少。鑒此，本試驗(yàn)研究飼糧中添加復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、糞便微生物及血清指標(biāo)的影響，為綠色環(huán)保型添加劑在斷奶仔豬養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供理論依據(jù)和實(shí)踐參考。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)所用復(fù)合益生菌制劑，包含植物乳桿菌（≥1×108CFU/ g）、地衣芽孢桿菌（≥1× 107CFU/ g）、枯草芽孢桿菌（≥1×107CFU/ g），由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所提供。上述菌株分離于北京大興區(qū)種豬場(chǎng)附近土壤中，經(jīng)體外試驗(yàn)分析，均能抑制革蘭氏陽(yáng)性和革蘭氏陰性病原菌的生長(zhǎng)，并能抵抗低pH、膽鹽，在模擬人工胃腸道環(huán)境中可生長(zhǎng)，具備益生菌的潛質(zhì)。

本試驗(yàn)所用纖維寡糖（純度為98%），由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所提供，其中纖維二糖、纖維三糖、纖維四糖的含量約占總糖的75%。纖維寡糖是選擇苜蓿干草作為原料，加入β-葡聚糖酶后通過(guò)混酸降解法制備所得。由于動(dòng)物胃腸道內(nèi)沒(méi)有可以降解β-1，4糖苷鍵的消化酶，因而纖維寡糖不被消化吸收而直接進(jìn)入大腸內(nèi)，為雙歧桿菌所利用，具有腸道調(diào)節(jié)作用，可作為飼糧添加劑。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

本試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用（32±4）日齡初始平均體重為（9.72±2.25）kg的“長(zhǎng)×大”雜交斷奶仔豬120頭，隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10頭。4組分別飼喂基礎(chǔ)飼糧（對(duì)照組，CON組）、基礎(chǔ)飼糧+0.30%復(fù)合益生菌（A組）、基礎(chǔ)飼糧+0.08%纖維寡糖（B組）、基礎(chǔ)飼糧+0.30%復(fù)合益生菌+0.08%纖維寡糖（C組）。試驗(yàn)預(yù)試期4 d，正試期35 d，正試期分為第1階段（1～14 d）和第2階段（15～35 d）2個(gè)階段。

1.3試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)仔豬基礎(chǔ)飼糧為豬場(chǎng)實(shí)際配制飼糧，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。所有試驗(yàn)仔豬于同一豬舍內(nèi)，每個(gè)重復(fù)仔豬于同一欄內(nèi)，采用自由采食和自由飲水方式飼養(yǎng)，室溫保持在25℃左右，通風(fēng)良好。每天清糞1次，每周消毒圈舍2～3次。免疫、驅(qū)蟲(chóng)等按照豬場(chǎng)常規(guī)管理進(jìn)行。

表1　基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet（DM basis）　%

1.4測(cè)定指標(biāo)和方法

1.4.1生長(zhǎng)性能

分別于正試試驗(yàn)第1、14、35天早晨以欄為單位空腹稱重，記錄仔豬體重（body weight，BW），用于計(jì)算平均日增重（average daily gain，ADG）；正試期每天以欄為單位記錄飼糧投喂量，并于次日清晨投喂前稱量剩料量，根據(jù)飼糧投喂量和剩料量計(jì)算平均日采食量（average daily feed intake，ADFI）。然后根據(jù)平均日增重和平均日采食量計(jì)算料重比（feed/ gain，F(xiàn)/ G）。計(jì)算方法：

平均日增重＝欄總增重/（欄仔豬數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）；

平均日采食量＝欄總采食量/（欄仔豬數(shù)×試驗(yàn)天數(shù)）；

料重比＝平均日采食量/平均日增重。

1.4.2腹瀉率

每天觀察記錄所有試驗(yàn)仔豬的腹瀉情況。每頭仔豬腹瀉1 d記為1個(gè)腹瀉頭次，試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算各組的腹瀉率（diarrhea rate，DR）。

腹瀉率（%）＝［腹瀉頭次總數(shù)/（試驗(yàn)仔豬總頭數(shù)×試驗(yàn)總天數(shù)）］×100。

1.4.3直腸糞便微生物數(shù)量

采用選擇性培養(yǎng)基平板計(jì)數(shù)法，檢測(cè)直腸糞便中微生物菌群數(shù)量［7］。于正試試驗(yàn)第14、35天早上每欄隨機(jī)選取1頭仔豬，取新鮮糞樣，用低溫保溫盒帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物培養(yǎng)計(jì)數(shù)。提前準(zhǔn)備好營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、MRS平板、麥康凱瓊脂平板，在無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)操作。稱量1.0 g糞便樣品于9 mL滅菌生理鹽水中，配制成1∶10樣品稀釋液（即配制成10-1稀釋液），用渦旋振蕩器振蕩3～5 min。再用微量移液槍準(zhǔn)確吸取該稀釋液1 mL放到盛有9 mL滅菌生理鹽水的試管中，振蕩1～2 min，配制成10-2稀釋液，同法依次進(jìn)行10-3～10-8稀釋。

將10-2～10-4糞樣稀釋液涂布于營(yíng)養(yǎng)肉湯固體培養(yǎng)基中，以計(jì)數(shù)糞樣中芽孢桿菌數(shù)量；10-3～10-5稀釋液涂布于麥康凱培養(yǎng)基中，以計(jì)數(shù)糞樣中大腸桿菌數(shù)量；10-6～10-8稀釋液涂布于MRS固體培養(yǎng)基中，以計(jì)數(shù)糞樣中乳酸菌數(shù)量。大腸桿菌和芽孢桿菌在37℃恒溫箱內(nèi)有氧培養(yǎng)20 h，乳酸菌在37℃有氧培養(yǎng)36 h。每個(gè)稀釋梯度做2個(gè)平行試驗(yàn)，最后取2次計(jì)數(shù)結(jié)果的平均值。糞便微生物數(shù)量用lg（CFU/ g）（即每克糞樣中菌落總數(shù)的對(duì)數(shù)）表示［8］。

1.4.4血清生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)

于正試試驗(yàn)第35天，每欄隨機(jī)選取1頭仔豬于前腔靜脈采血10 mL，3 000 r/ min離心20 min，分離血清，并于-20℃保存，用于測(cè)定血清中總蛋白（total protein，TP）、白蛋白（albumin，ALB）、球蛋白（globulin，GLB）的含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的活性。TP含量測(cè)定方法為雙縮脲法，ALB含量測(cè)定方法為溴甲酚綠法，SOD活性測(cè)定方法為鄰苯三酚自氧化法，GSH-Px活性測(cè)定方法為化學(xué)比色法。測(cè)定儀器均為全自動(dòng)生化分析儀。GLB含量為計(jì)算值，計(jì)算公式：

GLB含量＝TP含量-ALB含量。血清免疫指標(biāo)包括血清免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白A（immunoglobulin A，IgA）和免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）的含量，測(cè)定方法為酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA），測(cè)定儀器為酶標(biāo)儀，試劑盒由北京華英生物技術(shù)研究所提供，具體操作按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

1.5數(shù)據(jù)處理

用Excel軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行初步處理，采用數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件SAS 9.1的單因素方差分析（oneway ANOVA）和Duncan氏法進(jìn)行差異顯著性分析，P＜0.05為差異顯著。

2　結(jié)　果

2.1復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

如表2所示，各組試驗(yàn)仔豬初始平均體重差異不顯著（P＞0.05）。在試驗(yàn)1～14 d，各組試驗(yàn)仔豬的平均日采食量、日增重和料重比均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。在試驗(yàn)15～35 d，C組試驗(yàn)仔豬的料重比顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），平均日采食量、平均日增重比對(duì)照組分別提高11.92%、34.31%。在整個(gè)試驗(yàn)期（1～35 d），各組試驗(yàn)仔豬的平均日采食量、平均日增重和料重比差異均不顯著（P＞0.05）；但C組試驗(yàn)仔豬的平均日采食量、平均日增重比對(duì)照組提高4.38%、13.76%，料重比比對(duì)照組降低9.09%。

表2　復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of dietary compound probiotics and fiber oligosaccharide on growth performance of weaned piglets

2.2復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬糞便微生物的影響

如表3所示，試驗(yàn)第14、35天時(shí)，各組試驗(yàn)仔豬糞便中芽孢桿菌數(shù)、乳酸菌數(shù)和大腸桿菌數(shù)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。試驗(yàn)第14天時(shí)，A、B、C組糞便中芽孢桿菌數(shù)分別比對(duì)照組提高0.19%、 4.59%、13.77%，而大腸桿菌數(shù)分別比對(duì)照組降低12.96%、13.29%、15.78%。試驗(yàn)第35天時(shí)，A、B組糞便中芽孢桿菌數(shù)分別比對(duì)照組提高6.95%、13.68%，A、B、C組糞便中大腸桿菌數(shù)分別比對(duì)照組降低13.05%、14.20%、16.89%。

表3　復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬糞便微生物的影響Table 3 Effects of dietary compound probiotics and fiber oligosaccharides on fecal microflora of weaned piglets　lg（CFU/ g）

2.3復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬腹瀉率的影響

如表4所示，在試驗(yàn)1～14 d，A、C組試驗(yàn)仔豬腹瀉率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），分別比對(duì)照組降低了73.88%、67.28%，B組試驗(yàn)仔豬腹瀉率比對(duì)照組降低40.90%，但差異不顯著（P＞0.05）。在試驗(yàn)15～35 d，A、C組試驗(yàn)仔豬腹瀉率分別比對(duì)照組降低49.62%和44.36%，但差異不顯著（P＞0.05）。整個(gè)試驗(yàn)期（1～35 d），A、B、C組試驗(yàn)仔豬腹瀉率分別比對(duì)照組降低71.88%、13.89%、62.91%，但差異不顯著（P＞0.05）。

表4　復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬腹瀉率的影響Table 4 Effects of dietary compound probiotics and fiber oligosaccharides on diarrhea rate of weaned piglets　%

如圖1所示，對(duì)照組試驗(yàn)仔豬腹瀉率高于各試驗(yàn)組，其中A組腹瀉率最低；斷奶后1～7 d各組試驗(yàn)仔豬腹瀉率均不同程度升高，7～19 d呈平穩(wěn)下降趨勢(shì)，19 d后，仔豬腹瀉鮮有發(fā)生。

圖1　各組仔豬腹瀉率Fig.1 Diarrhea rate of weaned piglets in groups

2.4復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬血清指標(biāo)的影響

如表5所示，各組試驗(yàn)仔豬血清生化指標(biāo)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。A、B、C組試驗(yàn)仔豬血清TP含量分別比對(duì)照組提高1.48%、8.37%、0.17%， ALB含量分別比對(duì)照組提高7. 07%、16. 72%、2.59%，ALB/ GLB分別比對(duì)照組提高11. 26%、16.90%、2.82%；B、C組SOD活性分別比對(duì)照組提高15.93%和2.29%，C組GSH-Px活性比對(duì)照組提高15.36%。

表5　復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary compound probiotics and fiber oligosaccharides on serum biochemical parameters of weaned piglets

如表6所示，各組試驗(yàn)仔豬血清免疫指標(biāo)均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。A、C組試驗(yàn)仔豬血清IgM含量分別比對(duì)照組提高4.00%、9.39%；A、B組的IgG含量分別比對(duì)照組提高0.46%和0.50%。

表6　復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響Table 6 Effects of dietary compound probiotics and fiber oligosaccharides on serum immune parameters of weaned piglets　μg/ mL

3　討　論

3.1復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

斷奶應(yīng)激使仔豬胃腸道微生物區(qū)系發(fā)生紊亂，最終導(dǎo)致仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育受到抑制。益生菌是一類(lèi)含有活菌及其代謝產(chǎn)物的生物制劑，通過(guò)促進(jìn)腸道有益菌的定植和優(yōu)化腸道微生物區(qū)系，可有效緩解早期斷奶應(yīng)激引起的仔豬免疫功能下降［9］。纖維寡糖結(jié)構(gòu)中的β-1，4糖苷鍵可作為腸道有益菌的碳源，腸道有益菌利用纖維寡糖提供的能量進(jìn)行發(fā)酵，分解產(chǎn)生短鏈脂肪酸，降低腸道內(nèi)pH，從而抑制腸道有害菌、致病菌的生長(zhǎng)繁殖，最終提高豬的生長(zhǎng)性能［10］。

目前，關(guān)于復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能影響的報(bào)道結(jié)果不一。汪彬等［11］研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加益生菌與寡糖可使斷奶仔豬日增重、飼料利用率、采食量分別提高14. 17%、8.88%、4.04%，同時(shí)使仔豬腹瀉率降低42.56%。而史自濤等［12］報(bào)道認(rèn)為，在試驗(yàn)1～14 d時(shí)，飼糧中添加糞腸球菌對(duì)斷奶仔豬的平均日采食量、平均日增重和料重比均無(wú)顯著影響；虞澤鵬等［13］研究認(rèn)為飼糧中添加益生菌對(duì)斷奶仔豬日增重和料重比均無(wú)顯著影響；Jiao等［14］報(bào)道認(rèn)為飼糧中添加纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能并無(wú)顯著影響。斷奶后1～14 d是仔豬逐漸適應(yīng)斷奶的關(guān)鍵時(shí)期，也是仔豬腸道微生態(tài)區(qū)系最不穩(wěn)定的時(shí)期，在這個(gè)時(shí)期使用益生菌制劑效果最好［15］。本試驗(yàn)1～14 d，各組試驗(yàn)仔豬的平均日采食量、平均日增重和料重比均無(wú)顯著差異，與汪彬等［11］和Estienne等［15］報(bào)道結(jié)果不一致。其原因可能為斷奶應(yīng)激造成采食、飲水減少，引起小腸吸收功能下降，進(jìn)而對(duì)仔豬的生長(zhǎng)性能產(chǎn)生抑制作用［16］；也可能為復(fù)合益生菌和纖維寡糖的添加量在仔豬斷奶1～14 d時(shí)還不足以表現(xiàn)出益生作用；此外，仔豬斷奶日齡和飼養(yǎng)管理等因素不同也可能造成試驗(yàn)結(jié)果不一致［17］。試驗(yàn)15～35 d，各組試驗(yàn)仔豬平均日采食量、平均日增重均與對(duì)照組無(wú)顯著差異，但C組試驗(yàn)仔豬平均日采食量、平均日增重比對(duì)照組分別提高11.92%、34.31%，料重比顯著低于對(duì)照組。方桂友等［18］報(bào)道指出，斷奶仔豬飼糧中益生菌和低聚寡糖組合添加比單獨(dú)添加促生長(zhǎng)效果更明顯。結(jié)果提示，在15～35 d時(shí)斷奶仔豬胃腸道逐漸適應(yīng)復(fù)合益生菌制劑和纖維寡糖的添加，單獨(dú)添加或組合添加均對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，但復(fù)合益生菌制劑和纖維寡糖組合添加效果更好，具有協(xié)同互補(bǔ)作用。

3.2復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬糞便微生物和腹瀉率的影響

仔豬哺乳階段腸道微生物區(qū)系保持動(dòng)態(tài)平衡，而在斷奶應(yīng)激條件下腸道乳酸菌數(shù)減少，大腸桿菌數(shù)增加［19］。Bon等［20］報(bào)道認(rèn)為，飼糧中添加釀酒酵母和乳酸片可顯著減少糞便中大腸桿菌的數(shù)量，與侯璐［21］和Mallo等［22］研究結(jié)果相一致。此外，寡糖可促進(jìn)動(dòng)物腸道內(nèi)有益菌群的增殖，改善腸道微生態(tài)環(huán)境［23-24］。楊林［25］報(bào)道認(rèn)為，寡聚果糖、寡聚異麥芽糖、寡聚甘露糖能極顯著地促進(jìn)仔豬腸道雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌的增殖，并顯著抑制大腸埃希菌、葡糖球菌的生長(zhǎng)。本試驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為，A、B、C組試驗(yàn)仔豬糞便中芽孢桿菌數(shù)均高于對(duì)照組（除35 d時(shí)C組外），而大腸桿菌數(shù)量均低于對(duì)照組，但差異均不顯著。這表明添加益生菌和纖維寡糖對(duì)仔豬糞便中芽孢桿菌數(shù)、乳酸菌數(shù)和大腸桿菌數(shù)并未發(fā)生顯著性改變，與前人研究結(jié)果不盡一致，原因可能與復(fù)合益生菌的種類(lèi)、菌種數(shù)量、纖維寡糖與益生菌之間的相互作用等因素有關(guān)。

仔豬受到心理、飼糧和環(huán)境等應(yīng)激時(shí)極易引起腸道微生物區(qū)系紊亂，導(dǎo)致有害菌大量繁殖，從而引起腹瀉的發(fā)生。本試驗(yàn)研究結(jié)果認(rèn)為，在整個(gè)試驗(yàn)期（1～35 d），A、B、C組試驗(yàn)仔豬腹瀉率分別比對(duì)照組降低71.88%、13.89%、62.91%，而各組試驗(yàn)仔豬的平均日采食量、平均日增重和料重比差異較小。王學(xué)東等［26］研究表明，地衣芽孢桿菌在一定程度上降低了腹瀉率，但在促生長(zhǎng)方面并未表現(xiàn)出增長(zhǎng)趨勢(shì)，與董曉麗等［4］的研究結(jié)果相似。說(shuō)明益生菌和寡糖等添加劑對(duì)改善豬腸道微生態(tài)和健康狀況的作用比促生長(zhǎng)作用更加明顯。乳酸菌和大腸菌群被認(rèn)為是指示腸道健康的主要菌群［27］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，益生菌和寡糖的添加對(duì)仔豬糞便微生物菌群（芽孢桿菌、乳酸菌和大腸桿菌）無(wú)顯著影響，但降低了仔豬的腹瀉率。說(shuō)明糞便微生物菌群作為衡量腸道微生物平衡和腸道健康的主要指標(biāo)還有待于進(jìn)一步研究確定。

3.3復(fù)合益生菌和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬血清指標(biāo)的影響

血液是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)環(huán)境的重要組成部分，機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝改變、組織器官機(jī)能變化和病理變化往往會(huì)引起血清生化指標(biāo)的改變，所以對(duì)血液成分的檢測(cè)有重要的臨床意義［28-29］。血清TP由血清ALB和血清GLB組成，其含量的高低主要反映動(dòng)物肝臟蛋白質(zhì)合成能力的強(qiáng)弱；血清ALB在肝臟的蛋白質(zhì)代謝中起重要作用；血清GLB隨血液中抗體水平的增加而增加，其含量的高低在一定程度上反映了動(dòng)物的免疫水平及生理狀況［30-32］。ALB/ GLB能夠衡量機(jī)體的免疫水平，比值降低表明GLB的合成增加，機(jī)體免疫功能提高。SOD是一種活性物質(zhì)，它能消除動(dòng)物機(jī)體在新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)［33］。GSH-Px是動(dòng)物機(jī)體普遍存在的過(guò)氧化物分解酶，它能保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和功能免受過(guò)氧化物的干擾和損害。本試驗(yàn)結(jié)果認(rèn)為，各組試驗(yàn)仔豬血清TP、ALB、GLB含量和SOD、GSH-Px活性均無(wú)顯著差異，但A、B、C組ALB/ GLB均高于對(duì)照組，且B、C組SOD活性和C組GSH-Px活性均高于對(duì)照組。結(jié)果說(shuō)明，斷奶仔豬飼糧中添加復(fù)合益生菌制劑和纖維寡糖不僅有利于清除動(dòng)物生長(zhǎng)過(guò)程中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，還有助于提高機(jī)體的免疫功能，與其他研究結(jié)果相一致［34-36］。

血清免疫球蛋白是體液免疫系統(tǒng)的重要組成成分［37］。IgG是體液免疫反應(yīng)中的主要抗體；IgM是免疫反應(yīng)最初階段產(chǎn)生的抗體；IgA是黏膜免疫的主要抗體，它具有在非特異性免疫防護(hù)機(jī)制協(xié)助下減少病原菌的重要功能［38］。本試驗(yàn)結(jié)果表明，A、B、C組仔豬血清IgM、IgG、IgA含量與對(duì)照組無(wú)顯著差異。而游金明等［39］報(bào)道認(rèn)為，丁酸鈉與甘露寡糖對(duì)斷奶仔豬免疫水平有促進(jìn)作用，尤其以0.10%丁酸鈉+0.10%甘露寡糖的組合效果最佳，與本試驗(yàn)結(jié)果不一致，原因可能是由于本試驗(yàn)復(fù)合益生菌和纖維寡糖的添加量未達(dá)到顯著影響血清免疫指標(biāo)的水平。但A、C組仔豬血清IgM含量分別比對(duì)照組提高4.00%、9.39%，A、B組仔豬血清IgG含量分別比對(duì)照組提高0. 46%、0.50%，這可能與乳酸菌在腸道定植后充當(dāng)免疫佐劑影響非特異性免疫應(yīng)答和刺激特異性免疫反應(yīng)有關(guān)［40-41］。

本試驗(yàn)使用的復(fù)合益生菌和纖維寡糖均屬于微生態(tài)制劑，作用是建立健康的腸道菌群平衡系統(tǒng)，進(jìn)而提高動(dòng)物的免疫功能，這是一個(gè)復(fù)雜的生物過(guò)程。微生態(tài)制劑的促生長(zhǎng)作用可能需要一定的時(shí)間才能表達(dá)出來(lái)，可能在更大日齡的動(dòng)物上才會(huì)表現(xiàn)出促進(jìn)效果。

4　結(jié)　論

本試驗(yàn)條件下，添加復(fù)合益生菌制劑和纖維寡糖對(duì)斷奶仔豬的平均日采食量、平均日增重、糞便微生物菌群數(shù)量和血清指標(biāo)均無(wú)顯著影響，但可改善斷奶仔豬斷奶后1～14 d的腹瀉情況，提高斷奶仔豬斷奶后15～35 d的飼料利用效率。

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（責(zé)任編輯李慧英）

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Effects of Compound Probiotics and Cello-Oligosaccharide on Growth Performance，F(xiàn)ecal Microflora and Serum Parameters of Weaned Piglets

WANG Jie1AI Pingping1，2DIAO Qiyu1ZHANG Naifeng1?
（1. Key Open Laboratory of Feed Biotechnology of the Ministry of Agriculture，F(xiàn)eed Research Institution，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100081，China；2. Shahe Epidemic Prevention Station，Bureau of Animal Health Supervision of Changping District，Beijing 102206，China）

Abstract：The present study was conducted to determine the effects of compound probiotics and cello-oligosaccharide on the growth performance，fecal microflora and serum parameters of weaned piglets. One hundred and twenty weaned piglets with an average body weight of（9.72±2.25）kg were randomly assigned into 4 groups with 3 replicates per group and 10 piglets per replicate. Each group was offered one of the following diets：the basal diet in control group，the basal diet+0.30%compound probiotics in A group，the basal diet+0.08%cello-oligosaccharide in B group and the basal diet+0.30%compound probiotics+0.08%cello-oligosaccharide in C group，respectively. The test period consisted of a 4 days pre-test period and a 35 days experiment period，and the experiment period consisted of 1 to 14 days and 15 to 35 days. The results showed as follows：1）no significant differences were found in average daily feed intake（ADFI），average daily gain（ADG）or feed/ gain（F/ G）among the all groups during every experiment period（P＞0.05），except the F/ G in C group was significantly lower than that in control group during 15 to 35 days（P＜0.05）. The diarrhea rate in A and C groups was significantly lower than that in control group during 1 to 14 days（P＜0.05）. 2）No significant differences were found in the number of Bacillus，Lactobacillus and E. coli in feces among all groups at 14 and 35 days（P＞0.05）. 3）No significant differences were found in serum parameters among all groups（P＞0.05）. In conclusion，under the condition of this experiment，dietary compound probiotics and cello-oligosaccharide have benefit on diarrhea during 1 to 14 days after weaning and feed efficiency during 15 to 35 days after weaning of weaned piglets.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2016，28（3）：881-890］

Key words：compound probiotics；cello-oligosaccharide；weaned piglets；growth performance；fecal microflora；serum parameters

Corresponding author?，associate professor，E-mail：zhangnaifeng@caas.cn

通信作者:?張乃鋒，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail：zhangnaifeng@caas.cn

作者簡(jiǎn)介:王 杰（1989—），男，山東臨沂人，碩士研究生，從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)研究。E-mail：nkywangjie@163.com

基金項(xiàng)目:北京市生豬產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)專(zhuān)項(xiàng)（GWZJ-2014-08）；農(nóng)業(yè)部“引進(jìn)國(guó)際先進(jìn)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)”重點(diǎn)項(xiàng)目（2011-G7）

收稿日期:2015-10-09

doi：10.3969/ j.issn.1006-267x.2016.03.030

中圖分類(lèi)號(hào):S828;S816.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

文章編號(hào):1006-267X（2016）03-0881-10