魏向群，吳春秀，馮昊，李文亮，陳艷歡

（1.昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科，云南昆明650118；2.河北省秦皇島市第一醫(yī)院婦科，河北秦皇島066000；3.河北省秦皇島市第三醫(yī)院外科，河北秦皇島066000）

?

腹腔鏡與開腹宮頸癌根治術(shù)對(duì)機(jī)體細(xì)胞免疫影響的對(duì)比研究*

魏向群1，吳春秀2，馮昊3，李文亮1，陳艷歡1

（1.昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科，云南昆明650118；2.河北省秦皇島市第一醫(yī)院婦科，河北秦皇島066000；3.河北省秦皇島市第三醫(yī)院外科，河北秦皇島066000）

摘要：目的對(duì)比研究腹腔鏡及傳統(tǒng)開腹宮頸癌根治術(shù)對(duì)早期宮頸癌患者細(xì)胞免疫的影響。方法收集昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科早期（Ⅰa2～Ⅱa1期）宮頸癌患者60例，開腹組、腹腔鏡組各30例。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天外周血中T淋巴細(xì)胞亞群、自然殺傷細(xì)胞（NK）、多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）和T淋巴細(xì)胞活化功能，比較兩組手術(shù)前后免疫指標(biāo)的變化。結(jié)果①術(shù)后1天兩組患者T淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量較術(shù)前1天下降（P＜0.05），術(shù)后5天各指標(biāo)較術(shù)后1天有所升高，腹腔鏡組下降程度小于開腹組（P＜0.05），且恢復(fù)快；②術(shù)后1天兩組患者外周血人白細(xì)胞抗原（HLA）-DR+CD3+數(shù)量較術(shù)前下降，HLA-DR+CD8+較術(shù)前升高，腹腔鏡組變化程度小，在術(shù)后5天恢復(fù)快。結(jié)論腹腔鏡組術(shù)后免疫功能變化幅度小，恢復(fù)快，對(duì)患者免疫功能抑制程度輕，可能更好地保護(hù)了患者的免疫功能。

關(guān)鍵詞：細(xì)胞免疫；子宮頸癌；腹腔鏡宮頸癌根治術(shù)；人白細(xì)胞抗原DR；T細(xì)胞亞群

子宮頸癌（cervical carcinoma）是原發(fā)于子宮頸的上皮惡性腫瘤。早期宮頸癌的主要治療手段是手術(shù)，其5年生存率可達(dá)70%～90%。腫瘤的術(shù)后復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移是最主要的致命原因[1]，而腫瘤術(shù)后的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、種植、擴(kuò)散在一定程度上取決于機(jī)體的免疫功能狀態(tài)[2]。研究表明，惡性腫瘤患者術(shù)前已存在免疫抑制現(xiàn)象和自身免疫監(jiān)視能力下降，手術(shù)創(chuàng)傷會(huì)導(dǎo)致其免疫功能進(jìn)一步下降[3]，其抑制程度與手術(shù)創(chuàng)傷嚴(yán)重程度有關(guān)[4-6]。本文通過比較腹腔鏡及開腹宮頸癌根治術(shù)手術(shù)前、后外周血中T淋巴細(xì)胞亞群、自然殺傷細(xì)胞（natural killer，NK）、多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer，CIK）以及T淋巴細(xì)胞活化功能的變化，旨在探討兩種術(shù)式對(duì)患者機(jī)體免疫的影響，為早期宮頸癌患者手術(shù)方式的選擇及術(shù)后預(yù)后判斷提供理論依據(jù)。

1　資料與方法

1.1一般資料

選取昆明醫(yī)科大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科2012年10月-2013年10月收治的早期（Ⅰa2～Ⅱa1期）宮頸癌患者60例，行開腹宮頸癌根治術(shù)（abdominal radical hysterectomy，ARH）及腹腔鏡宮頸癌根治術(shù)（laparoscopic radical hysterectomy，LRH），ARH組30例，LRH組30例，兩組病例手術(shù)均由同一組醫(yī)師完成，手術(shù)時(shí)均采用全麻。入組病例，ARH組平均年齡為（42.67±7.93）歲，體重（57.7±7.62）kg；LRH組平均年齡為（41.37±6.37）歲，體重（56.5±6.30）kg。ARH組鱗癌26例，腺癌4例；LRH組鱗癌25例，腺癌5例。采用國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（International Federation of Gynecologyand Obstetrics，F(xiàn)IGO）2009年更新的臨床分期標(biāo)準(zhǔn)，ARH組宮頸癌患者Ⅰa2期1例，Ⅰb1期26例，Ⅰb2期1例，Ⅱa1期2例；LRH組Ⅰa2期0例，Ⅰb1期28例，Ⅰb2期1例，Ⅱa1期1例。兩組間年齡、體重、病理類型及FIGO分期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組患者均為原發(fā)性腫瘤，術(shù)前、術(shù)后采血期間均未接受放化療、免疫抑制劑及免疫增強(qiáng)劑治療；術(shù)前排除第2種腫瘤、罹患自身免疫性疾病、免疫缺陷病、超敏反應(yīng)性疾病的患者、術(shù)中及術(shù)后輸血患者及其他內(nèi)外科合并癥患者；后續(xù)補(bǔ)充治療和術(shù)后隨訪均在本院進(jìn)行。

術(shù)式：ARH術(shù)（廣泛子宮切除±雙附件切除+盆腔淋巴結(jié)清掃）均按劉新民主編《婦產(chǎn)科手術(shù)學(xué)》[7]第3版手術(shù)方法進(jìn)行；LRH術(shù)（腹腔鏡下廣泛子宮切除±雙附件切除+盆腔淋巴結(jié)清掃）手術(shù)方法參照文獻(xiàn)[8]進(jìn)行。

1.2主要試劑及主要儀器

1.2.1試驗(yàn)主要試劑①熒光素標(biāo)識(shí)單克隆抗體（BDMutiTESTINK.kit）含有A和B 2種4色抗體。A：CD45-FITC/CD4-RD1/CD8-ECD/CD3-PC5，鑒別T淋巴細(xì)胞亞群的免疫表型。B：CD3-FITC/CD16+ 56-PE+CD45-PC5，鑒別T淋巴細(xì)胞NK細(xì)胞、CIK細(xì)胞的免疫表型；②抗體：CD3-FITC/HLA-DR-PE+ CD45-PC5鑒別活化3的免疫表型；CD8-FITC/HLADR-PE+CD45PC5鑒別活化8的免疫表型。

1.2.2主要儀器流式細(xì)胞儀Beckman Coulter（美國(guó)Beckman Coulter公司）。

1.3外周血的收集

采集患者術(shù)前1天及術(shù)后1天、術(shù)后5天和術(shù)后28天的空腹外周血2 ml，加入含肝素抗凝管，送檢。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，各免疫指標(biāo)組內(nèi)比較采用方差分析，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1 LRH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量的變化

研究LRH組手術(shù)前后外周血T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量變化，結(jié)果顯示：LRH組術(shù)后1天外周血CD3+數(shù)量、CD4+數(shù)量及CD4+/CD8+比值均較術(shù)前明顯下降（P＜0.05），CD8+數(shù)量術(shù)后1天較術(shù)前亦有下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；在術(shù)后5天CD3+、CD4+、CD8+數(shù)量以及CD4+/CD8+比值較術(shù)后1天升高，且已恢復(fù)至術(shù)前水平。手術(shù)前、術(shù)后1天、術(shù)后5天NK細(xì)胞、CIK細(xì)胞數(shù)量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），術(shù)后28天各項(xiàng)免疫指標(biāo)與術(shù)前比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量的變化

研究ARH組手術(shù)前后外周血T細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量變化，結(jié)果顯示：ARH組術(shù)后1天外周血CD3+、CD4+、CD8+數(shù)量及CD4+/CD8+比值均較術(shù)前明顯下降（P＜0.01）；在術(shù)后5天較術(shù)后1天明顯升高，但CD4+、CD8+數(shù)量尚未恢復(fù)至術(shù)前水平（P＜0.05）。手術(shù)前、術(shù)后1天、術(shù)后5天NK細(xì)胞、CIK細(xì)胞數(shù)量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），術(shù)后28天各項(xiàng)免疫指標(biāo)與術(shù)前比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表1 LRH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量的變化（±s）

表1 LRH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量的變化（±s）

注：1）術(shù)前1天與術(shù)后1天比較，P＜0.05；2）術(shù)后1天與術(shù)后5天比較，P＜0.05；3）術(shù)后1天與術(shù)后28天比較，P＜0.05

時(shí)點(diǎn)　CD3+/%　CD4+/%術(shù)前1天　65.11±5.89　35.52±3.82術(shù)后1天　59.42±5.291）　30.60±4.191）術(shù)后5天　65.06±5.122）　35.08±4.012）術(shù)后28天　65.76±6.443）　35.40±4.463）CD8+/%　CD4+/CD8+　NK/%　CIK/% 26.38±3.59　1.37±0.20　13.95±4.40　0.87±0.64 24.52±3.50　1.27±0.191）　13.71±5.38　0.89±0.62 26.01±3.12　1.35±0.17　13.05±4.03　0.93±0.69 26.83±4.433）　1.34±0.19　13.88±4.76　0.97±0.71

表2 ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量的變化（±s）

表2 ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天T淋巴細(xì)胞亞群、NK細(xì)胞及CIK細(xì)胞數(shù)量的變化（±s）

注：1）術(shù)前1天與術(shù)后1天比較，P＜0.05；2）術(shù)后1天與術(shù)后5天比較，P＜0.05；3）術(shù)后1天與術(shù)后28天比較，P＜0.05；4）術(shù)后5天與術(shù)前1天比較，P＜0.05

時(shí)點(diǎn)　CD3+/%　CD4+/%術(shù)前1天　65.24±6.32　 35.07±5.064）術(shù)后1天　53.87±6.131）　25.64±3.411）術(shù)后5天　62.19±5.762）　31.85±4.462）術(shù)后28天　66.91±6.073）　35.20±4.223）CD8+/%　CD4+/CD8+　NK/%　CIK/% 26.57±2.974）　1.33±0.21　13.57±5.29　0.88±0.58 21.78±2.751）　1.19±0.211）　13.00±4.43　0.91±0.64 24.69±3.242）　1.28±0.18　12.55±8.49　0.93±0.50 26.32±3.723）　1.35±0.173）　14.15±4.82　1.00±0.68

2.3 LRH組及ARH組手術(shù)前、術(shù)后1天和術(shù)后5 天T細(xì)胞亞群數(shù)量變化比較

2.3.1 LRH組及ARH組手術(shù)前、后CD3+數(shù)量變化比較LRH組術(shù)后1天CD3+的數(shù)量（59.42± 5.29）下降幅度明顯小于ARH組（53.87±6.13）（P＜0.01）；術(shù)后5天LRH組（65.06±5.12）較ARH組（62.19±5.76）恢復(fù)快（P＜0.05），LRH組在術(shù)后5天已恢復(fù)至術(shù)前水平，但ARH組指標(biāo)仍低于術(shù)前。見表3。

2.3.2 LRH組及ARH組手術(shù)前、后CD4+數(shù)量變化比較LRH組術(shù)后1天CD4+的數(shù)量（30.60± 4.19）下降幅度明顯小于ARH組（25.64±3.41）（P＜0.01）；術(shù)后5天LRH組（35.08±4.01）較ARH組（31.85±4.46）恢復(fù)快（P＜0.05），LRH組在術(shù)后5天已恢復(fù)至術(shù)前水平，但ARH組指標(biāo)仍低于術(shù)前。見表4。

2.3.3 LRH組及ARH組手術(shù)前和后CD8+數(shù)量變化比較LRH組術(shù)后1天CD8+的數(shù)量（24.52± 3.50）下降幅度明顯小于ARH組（21.78±2.75）（P＜0.01）；術(shù)后5天LRH組（26.01±3.12）較ARH組（24.69±3.24）恢復(fù)快，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），LRH組在術(shù)后5天已恢復(fù)至術(shù)前水平，但

ARH組指標(biāo)仍稍低于術(shù)前。見表5。

2.3.4 LRH組及ARH組手術(shù)前、后CD4+/CD8+數(shù)量變化比較LRH組術(shù)后1天CD4+/CD8+比值（1.27±0.19）下降幅度小于ARH組（1.19±0.21），但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；術(shù)后5天LRH組（1.35±0.17）較ARH組（1.28±0.18）恢復(fù)快，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），LRH組在術(shù)后5天已恢復(fù)至術(shù)前水平，但ARH組指標(biāo)仍稍低于術(shù)前。見表6。

表3 RH組及ARH組手術(shù)前、后CD3+數(shù)量變化比較（±s）

表3 RH組及ARH組手術(shù)前、后CD3+數(shù)量變化比較（±s）

注：?LRH組與ARH組比較，P＜0.05

組別　　術(shù)前1天　　術(shù)后1天　　術(shù)后5天ARH組（n=30）　65.24±6.32　 53.87±6.13　 62.19±5.76 LRH組（n=30）　65.11±5.89　 59.42±5.29?　65.06±5.12?

表4 LRH組及ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天和術(shù)后5天外周血中CD4+數(shù)量變化比較（±s）

表4 LRH組及ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天和術(shù)后5天外周血中CD4+數(shù)量變化比較（±s）

注：?LRH組與ARH組比較，P＜0.05

組別　　術(shù)前1天　　術(shù)后1天　　術(shù)后5天ARH組（n=30）　35.07±5.06　 25.64±3.41　 31.85±4.46 LRH組（n=30）　35.52±3.82　 30.60±4.19?　35.08±4.01?

2.4 LRH組及ARH組患者外周血中T淋巴細(xì)胞活化功能的變化

2.4.1 LRH組及ARH組患者外周血中活化T細(xì)胞人白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-DR+CD3+的變化LRH組和ARH組術(shù)后1天外周血HLA-DR+CD3+數(shù)量（4.31±1.36；2.97± 1.15）均較術(shù)前（5.82±2.15；5.78±2.57）下降，且LRH組下降程度小于ARH組（P＞0.05）；兩組患者術(shù)后5天HLA-DR+CD3+（5.48±1.47；4.38±1.39）較術(shù)后1天均有升高趨勢(shì)，且LRH組較ARH組恢復(fù)快，LRH組已恢復(fù)至術(shù)前水平，而ARH組仍低于術(shù)前，且至術(shù)后28天ARH組（4.76±1.21）仍未恢復(fù)至術(shù)前水平（P＞0.05）。兩組間手術(shù)前后HLA-DR+CD3+的數(shù)量均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表7。

2.4.2 LRH組及ARH組患者外周血中活化Ts細(xì)胞HLA-DR+CD8+的變化LRH組及ARH組患者術(shù)后1天外周血HLA-DR+CD8+的數(shù)量（2.02± 1.12；2.69±1.12）均較術(shù)前（1.63±0.92；1.67±0.82）升高，且LRH組升高程度小于ARH組（P＞0.05）；兩組術(shù)后5天HLA-DR+CD8+（1.66±0.75；2.01± 1.08）均較術(shù)后1天有所下降，且LRH組較ARH組恢復(fù)快（P＞0.05），LRH組已降至術(shù)前水平，而ARH組仍高于術(shù)前；兩組之間手術(shù)前后HLA-DR+CD8+的數(shù)量均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表8。

表5 LRH組及ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天外周血中CD8+數(shù)量變化比較（±s）

表5 LRH組及ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天外周血中CD8+數(shù)量變化比較（±s）

注：?LRH組與ARH組比較，P＜0.05

組別　　術(shù)前1天　　術(shù)后1天　　術(shù)后5天ARH組（n=30）　26.57±2.97　 21.78±2.75　 24.69±3.24 LRH組（n=30）　26.38±3.59　 24.52±3.50?　26.01±3.12

表6 LRH組及ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天外周血中CD4+/CD8+比值變化比較（±s）

表6 LRH組及ARH組手術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天外周血中CD4+/CD8+比值變化比較（±s）

組別　　術(shù)前1天　　術(shù)后1天　　術(shù)后5天ARH組（n=30）　1.33±0.21　 1.19±0.21　 1.28±0.18 LRH組（n=30）　1.37±0.20　 1.27±0.19　 1.35±0.17

表7兩組術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天活化T細(xì)胞HLA-DR+CD3+數(shù)量變化（±s）

表7兩組術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天活化T細(xì)胞HLA-DR+CD3+數(shù)量變化（±s）

注：1）術(shù)后1天與術(shù)前1天比較，P＜0.05；2）術(shù)后1天與術(shù)后28天比較，P＜0.05

組別　　術(shù)前1天　術(shù)后1天ARH組（n=30）5.78±2.571）2.97±1.15 LRH組（n=30）　5.82±2.15 4.31±1.36術(shù)后5天　術(shù)后28天4.38±1.39　 4.76±1.212）5.48±1.47　 5.78±1.29

表8兩組術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天活化Ts細(xì)胞HLA-DR+CD8+數(shù)量變化比較（±s）

表8兩組術(shù)前1天、術(shù)后1天、術(shù)后5天及術(shù)后28天活化Ts細(xì)胞HLA-DR+CD8+數(shù)量變化比較（±s）

注：1）術(shù)后1天與術(shù)前1天比較，P＜0.05；2）術(shù)后1天與術(shù)后28天比較，P＜0.05

組別　　術(shù)前1天　術(shù)后1天ARH組（n=30）1.67±0.821）2.69±1.12 LRH組（n=30）　1.63±0.92 2.02±1.12術(shù)后5天　術(shù)后28天2.01±1.08 1.68±0.732）1.66±0.75 1.67±0.81

3　討論

近幾年來，宮頸癌的診斷及治療均取得一定的進(jìn)展，宮頸癌根治術(shù)是早期宮頸癌患者的主要治療手段，早期宮頸癌患者5年生存率達(dá)到85%～90%，但仍有約10%早期宮頸癌患者最終死于腫瘤的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，而腫瘤術(shù)后的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、種植、擴(kuò)散在一定程度上取決于機(jī)體的免疫功能狀態(tài)。外科手術(shù)是對(duì)人體一種特殊形式的創(chuàng)傷，雖然受多種因素的影響，但其基本過程與一般創(chuàng)傷相同，外科手術(shù)所致的應(yīng)激反應(yīng)可使機(jī)體免疫功能受抑制，且免疫抑制的程度及持續(xù)時(shí)間與手術(shù)或創(chuàng)傷的大小有關(guān)，免疫抑制時(shí)間越長(zhǎng)，術(shù)后并發(fā)感染率及腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生率就越高[8]。目前腹腔鏡手術(shù)治療早期宮頸癌對(duì)患者免疫功能影響的報(bào)道少見。本研究從早期宮頸癌患者外周血中T淋巴細(xì)胞亞群以及T淋巴細(xì)胞活化功能的角度出發(fā)，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)患者免疫功能，從而研究腹腔鏡及開腹兩種不同手術(shù)方式的宮頸癌根治術(shù)對(duì)患者免疫功能的影響，為早期宮頸癌患者手術(shù)方式的選擇及術(shù)后預(yù)后的判斷提供依據(jù)。

3.1機(jī)體的抗腫瘤免疫機(jī)制

機(jī)體的抗腫瘤免疫的效應(yīng)機(jī)制包括細(xì)胞免疫和體液免疫兩個(gè)方面，其中細(xì)胞免疫是抗腫瘤免疫的主力[9]，是免疫活性T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的一系列免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)功能。免疫活性T淋巴細(xì)胞可分為CD4（輔助性T細(xì)胞）和CD8（抑制性T細(xì)胞）兩個(gè)亞群。CD4+T淋巴細(xì)胞是人體免疫系統(tǒng)中一種重要的免疫細(xì)胞，而CD4+/CD8+是監(jiān)視人體細(xì)胞免疫功能、反映免疫狀態(tài)的重要指標(biāo)，比值越低，細(xì)胞對(duì)腫瘤免疫應(yīng)答能力就越低[10]。

3.2兩種術(shù)式對(duì)T淋巴細(xì)胞亞群的影響

T淋巴細(xì)胞是一種具有多功能的細(xì)胞群體，分為若干亞群，其中CD4（輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞）、CD8（抑制/細(xì)胞毒T細(xì)胞）是兩類重要的細(xì)胞亞群，CD4+/CD8+比值更能反映機(jī)體的免疫狀態(tài)。CD3+T細(xì)胞的減少是免疫功能受抑制的總體反映。CD4+T細(xì)胞主要分化為輔助性T淋巴細(xì)胞，CD4+T細(xì)胞在嚴(yán)重的創(chuàng)傷后發(fā)生兩個(gè)方面的變化，一是總數(shù)的減少，輔助其他細(xì)胞參與免疫應(yīng)答的能力減弱；另一方面是Th1/Th2失衡，最終臨床上表現(xiàn)為“免疫麻痹”。CD8+T細(xì)胞包括細(xì)胞毒性T細(xì)胞和抑制性T細(xì)胞兩個(gè)亞群，有實(shí)驗(yàn)研究表明開腹宮頸癌術(shù)后CD8+下降。對(duì)宮頸癌腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)，CD8+的數(shù)量隨宮頸癌臨床病理分期的進(jìn)展、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的出現(xiàn)而減少，也是宮頸癌獨(dú)立的預(yù)后影響因素。正常情況下，T淋巴細(xì)胞及亞群的數(shù)目在周圍組織中相對(duì)穩(wěn)定，若T淋巴細(xì)胞總數(shù)及其亞群或CD4+/CD8+異常時(shí)，可導(dǎo)致機(jī)體免疫功能的紊亂和一系列的病理變化，易發(fā)生腫瘤或自身免疫性疾病[11]。

本研究利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞，結(jié)果表明，LRH術(shù)及ARH術(shù)后1天外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+的表達(dá)均較術(shù)前明顯下降，并且LRH組下降幅度明顯小于開腹組；術(shù)后第5天LRH組各指標(biāo)基本恢復(fù)至術(shù)前水平，但ARH術(shù)后第5天CD3+、CD4+和CD8+的表達(dá)仍低于術(shù)前。手術(shù)后CD3+數(shù)量、CD4+數(shù)量和CD4+/CD8+比值較術(shù)前明顯下降，而CD8+T細(xì)胞包括抑制性T細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞，手術(shù)后一部分CD8+T細(xì)胞可能因炎性或病原等因素會(huì)出現(xiàn)數(shù)量升高，但其總數(shù)是下降的，機(jī)體免疫受抑制。這一結(jié)果與國(guó)內(nèi)外報(bào)道一致。本研究結(jié)果也表明，LRH組和ARH組雖都可引起一定程度的免疫功能抑制，但LRH組對(duì)機(jī)體免疫功能的抑制較ARH組為輕。

3.3兩種術(shù)式對(duì)T淋巴細(xì)胞活化功能的影響

HLA-DR主要作用是參與抗原提呈。當(dāng)機(jī)體受到各種外源性或內(nèi)源性致病因子刺激時(shí)，這些抗原經(jīng)單核細(xì)胞處理后呈遞給T淋巴細(xì)胞，從而誘發(fā)免疫應(yīng)答反應(yīng)。研究顯示[12-14]手術(shù)或創(chuàng)傷后，HLA-DR表達(dá)下降，其下降的程度與損傷的程度相關(guān)。Bolla 等[15]研究發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞表面HLA-DR的表達(dá)在開腹手術(shù)后長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)降低，而腹腔鏡術(shù)后無明顯改變。Wu等[16]隨機(jī)對(duì)照研究了12例腹腔鏡和14例開腹結(jié)直腸癌切除術(shù)，發(fā)現(xiàn)兩組術(shù)后2 h外周血HLA-DR均降低，術(shù)后第4天腹腔鏡組恢復(fù)至術(shù)前水平，而開腹組仍低于術(shù)前水平，認(rèn)為手術(shù)損傷的程度決定了HLA-DR恢復(fù)的快慢。另有學(xué)者在對(duì)26例腎細(xì)胞癌患者的研究中，發(fā)現(xiàn)外周血HLA-DR在腹腔鏡和開腹術(shù)后無明顯差別[17]。

本研究結(jié)果顯示，LRH組和ARH組術(shù)后1天外周血HLA-DR+CD3+均較術(shù)前下降，LRH組下降程度小于ARH組；兩組患者術(shù)后5天HLA-DR+ CD3+均有升高趨勢(shì)，且LRH組已恢復(fù)至術(shù)前水平，而ARH組仍低于術(shù)前，且至術(shù)后28天ARH組仍未恢復(fù)至術(shù)前水平。兩組患者術(shù)后1天外周血HLA-DR+CD8+較術(shù)前升高，在術(shù)后5天HLA-DR+ CD8+較術(shù)后1天有下降趨勢(shì)，且LRH組已降至術(shù)前水平，而ARH組仍高于術(shù)前。本研究樣本量較少，雖然目前結(jié)果顯示兩組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但本研究的結(jié)果與國(guó)內(nèi)外研究總體趨勢(shì)是一致的。手術(shù)后HLA-DR+CD3+T細(xì)胞，即能有效抗腫瘤的活化T細(xì)胞的比例發(fā)生下降，且下降程度與損傷程度相關(guān)，而HLA-DR+CD8+T細(xì)胞，即活化部分CD8+T細(xì)胞受炎性、病原等因素出現(xiàn)升高，免疫功能受抑制，且腹腔鏡手術(shù)對(duì)外周血T淋巴細(xì)胞HLA-DR表達(dá)的影響較開腹手術(shù)小。

綜上所述，手術(shù)后免疫指標(biāo)的復(fù)雜變化能影響機(jī)體免疫功能的狀態(tài)。相對(duì)開腹手術(shù)來說，腹腔鏡手術(shù)引起機(jī)體免疫反應(yīng)輕，對(duì)免疫功能的抑制作用也較小，術(shù)后恢復(fù)快[18]。本研究再次證實(shí)了這一點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]趙映華,李孟達(dá),彭小萍,等.具有盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌預(yù)后影響因素研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志, 2007, 17(5): 623-625.

[2] Pagès F, Galon J, Dieu-Nosjean MC, et al. Immune infiltration in human tumors: a prognostic factor that should not be ignored[J]. Oncogene, 2010, 29(8): 1093-1102.

[3] Mlecnik B, Bindea G, Pagès F, et al. Tumor immunosurveillance in human cancers[J]. Cancer Metastasis Rev, 2011, 30(1): 5-12.

[4] Burke JG, Watson RW, McCormack D, et al. Intervertebral discs which cause low hack pain secrete higl1 levels of proinflammatory mediators[J]. Bone Joint Surg Br, 2002, 84(2): 196-201.

[5] Perez-Cruet MJ, Foley KT, Isaacs RE, et al. Micreendeseopic lurebar discectomy: technique note[J]. Neure Surgery, 2002, 51(5 Supp1): s129-sl36.

[6] Fridman WH, Pages F, Sautes-Fridman C, et al. The immune contexture in human tumours: impact on clinical outcome[J]. Nat Rev Cancer, 2012, 12(4): 298-306.

[7]劉新民.婦產(chǎn)科手術(shù)學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 2003: 296-309.

[8]馬原,魏向群,楊琳琳,等.腹腔鏡下宮頸癌根治術(shù)治療宮頸癌的臨床分析[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 34(10): 107-110.

[9]施曉,章波兒,李海洋,等.腹腔鏡手術(shù)對(duì)良性婦科疾病患者免疫功能的影響[J].中國(guó)婦幼保健, 2011, 26(1): 125-127.

[10]朱小麗.外周血T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)在惡性腫瘤中的價(jià)值[J].醫(yī)藥論壇雜志, 2011, 32(1): 83-84.

[11]史繼靜,劉潮奇.白介素6與腫瘤相關(guān)性的研究進(jìn)展[J].生命的化學(xué), 2008, 28(1): 12-14.

[12]李潔華,許丹.腹腔鏡與開腹手術(shù)剝除卵巢良性畸胎瘤對(duì)機(jī)體免疫功能影響的比較研究[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志, 2010, 26(5): 358-360.

[13] Schietroma M, Carlei F, Lezoche E, et al. Evaluation of immune response in patients after open or laparoscopic cholecystectomy[J]. Hepatogastroenterology, 2004, 48(39): 642-645.

[14]趙倩,邊愛平.腹腔鏡子宮切除術(shù)對(duì)IL-2、HLA-DR表達(dá)的影響[J].醫(yī)藥論壇雜志, 2006, 27(12): 13-15.

[15] Bolla G, Tuzzato G. Immunologic postoperative competence after laparoscopy versus laparotomy[J]. Surg Endosc, 2003, 17(8): 1247-1250.

[16] Wu FP, Sietses C, Blomberg BM, et al. Systemic and peritoneal inflammatory response after laparoscopic or conventional colon resection in cancer patients: a prospective, randomized trial[J]. Dis Colon Rectum, 2003, 46(2): 147-155.

[17] Landman J, Olweny E, Sundaram CP, et al. Prospective comparison of the immunological and stress response following laparoscopic and open surgery for localized renal cell carcinoma[J]. J Urol, 2004, 17l(4): 1456-1460.

[18] Kloosterman T, Von Blomberg BM, Borgstein P, et al. Unimpaired immune function after laparoscopic cholecystectomy[J]. Surg, 2011, 115(4): 424-426.

（吳靜編輯）

論著

Comparative study of laparoscopic and transabdominal radical hysterectomy's impact on the cellular immunity*

Xiang-qun Wei1, Chun-xiu Wu2, Hao Feng3, Wen-liang Li1, Yan-huan Chen1

(1.Department of Gynecological Oncology, the 3rd Hospital affiliated to Kunming Medical University, Kunming, Yunnan 650118, China; 2.Department of Gynecology, the 1st Hospital of Qinhuangdao, Qinhuangdao, Hebei 066000, China; 3.Department of Surgery, the 3rd Hospital of Qinhuangdao, Qinhuangdao, Hebei 066000, China)

Abstract:Objective To compare the difference of impact on the cellular immunity between laparoscopic and transabdominal radical hysterectomy. Methods 60 patients with early cervical cancer (Ⅰa2～Ⅱa1), half of them were assigned to do abdominal radical hysterectomy (ARH) and the other half for laparoscopic radical hysterectomy (LRH). Adopt flow cytometry (FCM) detect peripheral blood T lymphocyte subsets, NK cells, CIK cells and T lymphocyte activation function on one day before surgery, one day, five days, and 28 days after the surgery separately. Compare the changes of immune status. Results After one day, the number of T lymphocyte subsets declined compared with preoperative one day(P＜0.05). After five days, each index in LRH group was increased compared with postoperative one day, and the degree of decline is less than the ARH group (P＜0.05), and recovered faster. After one day, the number of HLA-DR+CD3+in LRH group compared with the preoperative one day declined and HLA-DR+CD8+increased, and the degree of change is less than the ARH group, and recovered faster. Conclusions Immune function in patients after laparoscopic group was less changed, and recovered quickly, while the immune function were less inhibited, it may protect patients' immune function better.

Keywords:cellular immunity; cervical cancer; laparoscopic cervical cancer radical prostatectomy; human leukocyte antigen-DR (HLA-DR); T-cell subsets

*基金項(xiàng)目：云南省科技廳資助項(xiàng)目（No：2014FZ036）

收稿日期：2015-08-19

文章編號(hào)：1007-1989（2016）03-0001-06

DOI:10.3969/j.issn.1007-1989.2016.03.001

中圖分類號(hào)：R737.3

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A