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氧化應(yīng)激反應(yīng)在糖尿病慢性皮膚潰瘍中的作用

吳海霞

(北京中醫(yī)醫(yī)院順義醫(yī)院 皮膚科, 北京, 101300)

關(guān)鍵詞:糖尿病; 皮膚潰瘍; 氧化應(yīng)激; 細(xì)胞凋亡; 炎癥反應(yīng); 炎癥因子

近年來，糖尿病患者的發(fā)病率和死亡率有逐年升高的趨勢[1-2]。糖尿病與高血壓和腫瘤已經(jīng)成為威脅人類健康的3大殺手[3-4]。糖尿病皮膚潰瘍是糖尿病患者常見的并發(fā)癥，主要表現(xiàn)為傷口不能及時(shí)痊愈，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量[5-6]。氧化應(yīng)激反應(yīng)是細(xì)胞內(nèi)氧化和抗氧化狀態(tài)的失衡，是糖尿病多種并發(fā)癥的共同病理過程。本研究分析氧化應(yīng)激反應(yīng)在糖尿病慢性皮膚潰瘍中的作用，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料

對本院2010年5月—2015年5月診治的120例糖尿病慢性皮膚潰瘍患者進(jìn)行研究，其中男66例，女54例，年齡54～71歲，平均(59.3±7.8)歲。另選取同期健康體檢者80例為對照組，糖尿病患者100例為糖尿病組。糖尿病及糖尿病慢性皮膚潰瘍患者均符合中華醫(yī)學(xué)會糖尿病分會2013年制定的中國2型糖尿病防治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)。各組患者性別比例、年齡等一般資料比較無顯著差異(P>0.05)。

1.2試劑與方法

抽取所有研究對象外周靜脈血，低速離心后分離上層血清，保存于4℃冰箱待用。CAT及MDA檢測試劑盒購自北京天根生物技術(shù)有限公司；SOD及GSHPX檢測試劑盒購自南京檢測生物工程研究所; NAPDH氧化酶亞基p22和p47檢測試劑盒購自美國R&D公司; p67及gp91檢測試劑盒購自美國Omega公司; TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10檢測試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司；Bax及Bcl2檢測試劑盒購自美國Abcam公司; Caspase3及Caspase9檢測試劑盒購自美國Snata Cruz公司。所有操作過程均按照說明書進(jìn)行。

1.3檢測項(xiàng)目

分析糖尿病慢性皮膚潰瘍患者血清中氧化還原酶CAT、MDA、SOD及GSHPX水平變化；ELISA法檢測患者血清中NADPH氧化酶亞基p22、p47、p67及gp91和細(xì)胞凋亡Bax、Caspase3和Ccaspase9蛋白及炎癥因子TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10水平變化。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料用單因素方差分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

與對照組和糖尿病組患者相比，糖尿病慢性皮膚潰瘍組患者血清中MDA水平明顯升高，而CAT、SOD和GSHPX水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。與對照組和糖尿病組患者相比，糖尿病慢性皮膚潰瘍組患者血清中NADPH氧化酶亞基p22、p47、p67及gp91表達(dá)明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表2。與對照組和糖尿病組患者相比，糖尿病慢性皮膚潰瘍組患者血清中細(xì)胞凋亡蛋白Bax、Caspase3和Ccaspase9表達(dá)明顯升高，而Bcl2表達(dá)明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表3。與對照組和糖尿病組患者相比，慢性皮膚潰瘍組患者血清中炎癥因子TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 見表4。

3討論

糖尿病患者體內(nèi)的高血糖引起的微血管和大血管并發(fā)癥是影響健康的主要因素。糖尿病及其并發(fā)癥的發(fā)生機(jī)制目前尚未完全清楚，研究[7]顯示其可能與高血糖、脂質(zhì)過氧化、氧化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡及多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路密切相關(guān)。糖尿病慢性皮膚潰瘍是糖尿病常見的并發(fā)癥，但其發(fā)病機(jī)制尚不明確，臨床上也無特效藥物。

表1　3組患者血清中氧化指標(biāo)比較

與糖尿病慢性皮膚潰瘍組比較, *P<0.05。

表2　3組患者血清中氧化應(yīng)激蛋白表達(dá)比較　β-actin

與糖尿病慢性皮膚潰瘍組比較, *P<0.05。

表3　3組患者血清中細(xì)胞凋亡蛋白表達(dá)比較　β-actin

與糖尿病慢性皮膚潰瘍組比較, *P<0.05。

表4　3組患者血清中炎癥反應(yīng)因子水平比較

與糖尿病慢性皮膚潰瘍組比較, *P<0.05。

本研究發(fā)現(xiàn)，與對照組和糖尿病組患者相比，糖尿病慢性皮膚潰瘍組患者血清中MDA水平明顯升高，而CAT、SOD和GSHPX水平明顯降低; NADPH氧化酶亞基p22、p47、p67及gp91表達(dá)明顯升高(P<0.05), 且細(xì)胞凋亡蛋白Bax、Caspase3和Ccaspase9表達(dá)明顯升高，而Bcl2表達(dá)明顯降低；同時(shí)，糖尿病慢性皮膚潰瘍組患者血清中炎癥因子TNF-α、IL-2、IL-6和IL-10水平明顯升高。因此，氧化應(yīng)激反應(yīng)和細(xì)胞凋亡參與了糖尿病慢性皮膚潰瘍的發(fā)病過程，且可以作為臨床診斷和治療的指標(biāo)。

氧化應(yīng)激是細(xì)胞內(nèi)氧化還原的失衡狀態(tài)，是多種疾病發(fā)生及發(fā)展的共同途徑，也參與了糖尿病多種并發(fā)癥的發(fā)生過程[8-10]。有研究[11]發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎病大鼠腎臟內(nèi)存在明顯的氧化應(yīng)激反應(yīng)，且可以作為白藜蘆醇的作用靶點(diǎn)。在分析黑靈芝多糖對Ⅱ型糖尿病大鼠肝臟氧化應(yīng)激損傷保護(hù)作用的研究中[12]也證實(shí)，氧化應(yīng)激是黑靈芝多糖改善糖尿病大鼠腎臟損傷的關(guān)鍵靶點(diǎn)。劉偉等[13]研究也證實(shí)，筋脈通主要通過調(diào)節(jié)大鼠背根神經(jīng)節(jié)氧化應(yīng)激及細(xì)胞凋亡發(fā)揮作用。本研究也發(fā)現(xiàn)，糖尿病慢性皮膚潰瘍組患者血清中NADPH氧化酶表達(dá)明顯升高，血清中MDA水平明顯升高，而CAT、SOD和GSHPX水平明顯降低，表明氧化應(yīng)激也參與了糖尿病慢性皮膚潰瘍的發(fā)病過程。氧化應(yīng)激是由一系列氧化酶類所介導(dǎo)，如黃嘌呤氧化酶、NADPH氧化酶等。本研究發(fā)現(xiàn)，與對照組和糖尿病組患者相比，糖尿病慢性皮膚潰瘍組患者血清中NADPH氧化酶亞基p22、p47、p67及gp91表達(dá)明顯升高，表明NADPH氧化酶在此過程中發(fā)揮著重要的作用。因此，氧化應(yīng)激反應(yīng)和細(xì)胞凋亡參與了糖尿病慢性皮膚潰瘍的發(fā)病過程，且可以作為臨床診斷和治療的指標(biāo)。

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中圖分類號:R 587.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號:1672-2353(2016)05-185-03

DOI:10.7619/jcmp.201605068

收稿日期:2015-11-26