許　宏，楊佳卉，楊景麗（蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，甘肅　蘭州730020）

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原人參二醇對人肺腺癌A549細胞作用的meta分析

許宏，楊佳卉，楊景麗
（蘭州大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院，甘肅蘭州730020）

摘要：利用Meta分析方法評價原人參二醇對人肺腺癌A549細胞的作用。meta分析結(jié)果顯示：原人參二醇[20(S)-原人參二醇或20(R)-原人參二醇]對人肺腺癌A549細胞在阻滯細胞周期、抑制細胞增殖、促進細胞凋亡不同方面有明顯的作用,且隨著濃度增大，作用隨之更加明顯。

關(guān)鍵詞：原人參二醇；人肺腺癌A549細胞；細胞周期；細胞存活率；細胞凋亡

肺癌是一種嚴(yán)重影響人類生命健康的疾病之一，目前已成為世界上發(fā)病率和死亡率最高的惡性腫瘤。肺腺癌惡性程度較高，近年來全球范圍內(nèi)發(fā)病率呈上升趨勢，已經(jīng)超越鱗癌成為最常見的肺癌，A549細胞是人肺腺癌的細胞株，屬于常見的惡性腫瘤類型。目前，肺癌病因及發(fā)病機制尚未完全闡明，但從腫瘤細胞學(xué)來看，肺癌發(fā)生的本質(zhì)在于細胞增殖與凋亡的調(diào)節(jié)失控。近年來中藥的抗癌機制研究取得了很大進展，尤其對肺癌細胞增殖周期的調(diào)控與誘導(dǎo)細胞凋亡兩方面內(nèi)容。積極尋找特效和低毒的腫瘤防治藥物成為當(dāng)今我國乃至世界面臨的緊迫任務(wù)之一[1]。人參作為中國傳統(tǒng)中藥，在中藥史上占有重要的地位，具有大補元氣、補氣益肺、安神益智的功效，被用于多種古方驗方的主藥，人參為五加科多年生草本植物,其成分具有諸多生物活性[2]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，人參具有抗腫瘤、抗衰老、抗輻射等多種生物活性作用[3]。原人參二醇為從人參中提取出的有效成分之一。為了客觀的評價原人參二醇對人肺腺癌A549細胞的作用，本研究采用meta分析的方法合并分析當(dāng)前所有原人參二醇與A549細胞的關(guān)系的研究，期望為原人參二醇在肺腺癌治療中的價值提供證據(jù)。

1　資料與方法

1.1納入排除標(biāo)準(zhǔn)

納入原人參二醇對人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡影響的研究，原人參二醇的濃度不限。排除：①聯(lián)合其他化學(xué)藥；②數(shù)據(jù)不完整或有錯誤。對重復(fù)發(fā)表的文獻僅保留最先發(fā)表的一篇。對同一研究多次發(fā)表，僅保留樣本量最大和信息最全的一篇。

1.2文獻檢索

利用“人參”、“A549”、“肺癌”、“肺腺癌”檢索萬方數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、維普中文科技期刊數(shù)據(jù)庫，獲取有關(guān)原人參二醇對人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡影響的研究，檢索實施時間為2015年5月，所有檢索策略均通過多次預(yù)檢索后確定，檢索式根據(jù)具體數(shù)據(jù)庫做相應(yīng)的調(diào)整。此外，追查已納入文獻的參考文獻，以獲取以上檢索未發(fā)現(xiàn)的相關(guān)信息。

1.3資料提取

提取內(nèi)容主要包括：①一般資料：題目、作者姓名、發(fā)表日期和文獻來源。②人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡情況。③實驗的方法。如遇分歧通過討論或根據(jù)第3位研究人員的意見協(xié)商處理。

1.4統(tǒng)計分析

對不同濃度原人參二醇對的人肺腺癌A549細胞周期，細胞存活率和細胞凋亡影響采用RevMan5.2統(tǒng)計軟件Meta分析，以均數(shù)差（MD）為效應(yīng)量，效應(yīng)量以95%CI表示。

2　結(jié)果

2.120(S)-原人參二醇對A549細胞細胞周期的影響[4-5]

由表1可知，在20 (S)-原人參二醇作用24h時，檢測G0/G1期時，對照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。檢測G2/M期時，對照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，20μmol/mL和40μmol/mL組有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。檢測S期時，對照組分別和10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1　20(S)-原人參二醇對A549細胞細胞周期的影響

2.220(S)-原人參二醇對A549細胞存活率的影響[5-65]

由2表可知，在20 (R)-原人參二醇作用72h時，檢測細胞存活率，對照組分別和1μmol/mL、10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意（P＜0.05）；1μmol/mL分和10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）; 10μmol/ml分和50μmol/mL、100μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）; 50μmol/mL和100μmol/mL相比，無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

表2　20(R)一原人參二醇對對A549細胞存活率的影響

2.320(S)-原人參二醇對A549細胞凋亡率的影響[4,5]

由表3可知，在20(S)-原人參二醇作用24h時，定量分析G0/G1期前的亞二倍體凋亡峰（SubG1)得到細胞凋亡率。對照組分別和10μmol/mL、20μmol/ mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意（P＜0.05）；10μmol/mL和20μmol/mL、40μmol/mL相比，均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）; 20μmol/mL和40μmol/mL相比，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表3　20(S)-原人參二醇A549細胞凋亡率的影響

3　討論

人參被人們稱為“百草之王”,是我國傳統(tǒng)的名貴藥材。人參含有多種人參皂苷單體及人參倍半萜稀、人參酸、人參英、人參奎酮、人參寧、人參多糖、B族維生素、煙酸、膽堿、多種氨基酸以及微量元素鍺等成分[7]。其主要活性成分是人參皂苷,人參皂苷具有抗疲勞、延緩衰老、抑制腫瘤細胞生長、調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、提高機體免疫力、改善心腦血管供血不足等作用。關(guān)于抗腫瘤作用方面研究最多的是二醇組人參皂苷，20(S)-人參皂苷Rg3和Rh2,它們在抑制腫瘤血管生成、降低腫瘤微血管密度、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡、抗腫瘤轉(zhuǎn)移、對化療藥物減毒增效等方面具有較廣泛的抗腫瘤功效[8,9]。將人參皂苷Rg3的3位上的末端葡萄糖水解掉可得到人參皂苷Rh2,再把人參皂苷Rh2的3位上的最后一個葡萄糖水解掉就得到20(S)-原人參二醇,20(S)-原人參二醇作為人參二醇組皂苷化學(xué)水解及人腸道菌代謝的最終產(chǎn)物,有可能比人參皂苷Rg3和人參皂苷Rh2具有更強的抗癌活性、抗癌增效減毒作用以及增強機體免疫功能的作用,而且生物利用度可能更高[10]。20(S)-原人參二醇的分子式為C30H52O3。

本研究結(jié)果顯示，20(S)-原人參二醇以0μmol/ mL、10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL和0μmol/ mL、25μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL的兩組劑量作用于A549細胞24h后，實驗組G0/G1期細胞與對照組相比，呈現(xiàn)濃度依賴性遞增，而G2/M期與S期細胞數(shù)目相應(yīng)減少，提示20(S)-原人參二醇對A549細胞的周期調(diào)控作用主要發(fā)生于Gl期，阻止其向G2/M期與S期發(fā)展,即可將細胞阻滯于Gl期，從而抑制細胞的增值。張銳等研究結(jié)果表明20(S)-原人參二醇對A549細胞的殺傷作用可能由于其對A549細胞凋亡的誘導(dǎo)。

20 (R)-原人參二醇以分別以對照組以0μmol/ mL、1μmol/mL、10μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL作用于A549細胞72h后，實驗組細胞存活率與對照組相比，呈現(xiàn)濃度依賴性遞增。

20 (S)-原人參二醇以0μmol/mL、10μmol/mL、20μmol/mL、40μmol/mL和0μmol/mL、25μmol/mL、50μmol/mL、100μmol/mL的兩組劑量作用于A549細胞24h后，實驗組G0/G1細胞凋亡率與對照組相比，呈現(xiàn)濃度依賴性遞增。有文獻報道AKT活性的下調(diào)可能是PPD誘導(dǎo)A549細胞凋亡的一個關(guān)鍵步驟，PPD可通過抑制PI3K/AKT信號途徑作用線粒體通路誘導(dǎo)A549細胞凋亡。

參考文獻：

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