何惠珍

（保山市隆陽(yáng)區(qū)疾病預(yù)防控制中心 云南保山 678000）

現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用

何惠珍

（保山市隆陽(yáng)區(qū)疾病預(yù)防控制中心 云南保山 678000）

隨著時(shí)代的進(jìn)步和科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，人們?cè)絹?lái)越希望能夠通過(guò)簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法獲得精確的結(jié)果。其中，如何提高微生物檢驗(yàn)的檢測(cè)時(shí)間和結(jié)果的精確性，成為微生物研究人員的著重考慮的問(wèn)題。本文主要分析了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用，基因芯片技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用，核酸探針技術(shù)以及其它分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用，以期提高微生物檢驗(yàn)效率和檢驗(yàn)精確度，從而促進(jìn)生物學(xué)科研工作的進(jìn)步和發(fā)展。

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù) 微生物檢驗(yàn) 現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)

隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和發(fā)展，人們?cè)絹?lái)越注重各種檢驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性和精確性。目前分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用是比較新型的檢驗(yàn)方法，因此本文主要分析了分析生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用原理和檢測(cè)方向。根據(jù)分子生物學(xué)的概念，其是在分子水平研究生物現(xiàn)象的科學(xué)。分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中是通過(guò)研究生物大分子（核酸、蛋白質(zhì)）的結(jié)構(gòu)，功能和生物合成等相關(guān)的科學(xué)。

1 現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的優(yōu)勢(shì)

分子生物學(xué)主要是以研究脫氧核糖核酸和核糖核酸等為基礎(chǔ)的相關(guān)技術(shù)，成為微生物檢驗(yàn)的方法?，F(xiàn)代分析生物技術(shù)能夠有效促進(jìn)和提高微生物檢驗(yàn)的檢驗(yàn)精確度和檢驗(yàn)范圍。隨著現(xiàn)代分子學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的推廣和發(fā)展，且微生物檢驗(yàn)越來(lái)越受到認(rèn)可，從而可以促進(jìn)其他相關(guān)領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展，如農(nóng)業(yè)、食品、藥品等。

2 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)（PCR）具有發(fā)展快、應(yīng)用廣、生命力強(qiáng)大等特點(diǎn)。研究人員根據(jù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)的特性和原理，將其進(jìn)行進(jìn)一步的研究，從而促進(jìn)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)的完善，并發(fā)掘出其它的相關(guān)用途，如連接酶鏈反應(yīng)依賴(lài)核酸序列的擴(kuò)增、轉(zhuǎn)錄依賴(lài)擴(kuò)增系統(tǒng)以及免疫PCR等。20世紀(jì)末，我國(guó)已經(jīng)開(kāi)始將聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)應(yīng)用在病原微生物檢驗(yàn)中，如檢驗(yàn)肝炎病毒、性病致病菌等，甚至是傳播甚廣的禽流感致病病毒的檢驗(yàn)也是利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)。

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)還可同時(shí)檢驗(yàn)多種病原菌，主要是通過(guò)在反應(yīng)管中同時(shí)加入相關(guān)病原菌的特異性引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。通過(guò)研究和分析可知，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)同時(shí)檢驗(yàn)和鑒定多種病原體的主要組合有：①檢驗(yàn)肝炎病毒，如果多種肝炎病毒二重感染相同的病人，其中可以是甲乙丙型肝炎病毒二重感染，也可能是甲乙或乙丙型肝炎病毒二重感染。②檢驗(yàn)?zāi)c道致病性細(xì)菌，傷害、霍亂都可能導(dǎo)致人們出現(xiàn)相似的腸道癥狀。痢疾、霍亂可以并存同一病人身體中，此外還可能出現(xiàn)同時(shí)發(fā)病的情況。③檢驗(yàn)性病，可以明確檢測(cè)出梅毒、艾滋病等。④檢驗(yàn)傷口感染細(xì)菌和生物戰(zhàn)擠細(xì)菌，如引起破傷風(fēng)的病原菌、鼠疫桿菌等。

因此聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的具有重要的作用和意義。

3 基因芯片技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用

基因芯片技術(shù)是二十世紀(jì)末取得進(jìn)步和發(fā)展較為深遠(yuǎn)的科學(xué)，它融合了多種尖端新型的科學(xué)技術(shù)，如微電子學(xué)、生物學(xué)以及計(jì)算機(jī)科學(xué)等。基因芯片技術(shù)是通過(guò)在玻片上排列大量生物活性分子，以期實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢驗(yàn)多種疾病的目的?；蛐酒夹g(shù)具有準(zhǔn)確高效檢驗(yàn)病原體遺傳信息的特點(diǎn)，因此它主要是應(yīng)用在基因系列分析，病原菌感染的研究中。

根據(jù)研究和應(yīng)用基因芯片技術(shù)，可以了解到基因芯片技術(shù)具有很多優(yōu)勢(shì)：①基因芯片技術(shù)具有檢驗(yàn)抗體產(chǎn)生之前的感染的特性，因此通過(guò)檢驗(yàn)可以判斷出有無(wú)感染。②基因芯片技術(shù)具有更加準(zhǔn)確的檢驗(yàn)特性，能夠檢驗(yàn)出利用其它方法不能檢驗(yàn)出的感染問(wèn)題。③基因芯片技術(shù)具有更加高校的檢驗(yàn)特性，能夠快速直接確定病原體的類(lèi)型。傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)無(wú)法有效獲得患者的精確信息，因此醫(yī)生會(huì)由于缺乏相關(guān)信息而無(wú)法有效的進(jìn)行治療。通過(guò)基因芯片技術(shù)能夠提前檢驗(yàn)感染問(wèn)題的特性，可以對(duì)患者進(jìn)行診斷和排除，從而實(shí)現(xiàn)盡早發(fā)現(xiàn)和治療的目的。傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)難以有效檢驗(yàn)出感染的范圍和程度，而基因芯片技術(shù)則解決了這個(gè)弊端。

4 核酸探針技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用

核酸探針技術(shù)的原理是堿基配對(duì)。核酸探針是指帶有標(biāo)記物的已知序列的核酸片段，它能和相互作用的核酸序列雜交，形成雙鏈。根據(jù)探針標(biāo)記方式的分類(lèi)中，運(yùn)用較多的是非放射性標(biāo)記，具有直觀、準(zhǔn)確等特點(diǎn)。其中非放射性標(biāo)記又可分為生物素標(biāo)記、熒光素標(biāo)記等。根據(jù)核苷酸成分的分類(lèi)中，運(yùn)用較多的DNA探針。根據(jù)選用基因的分類(lèi)，可以分為同全部DNA分子中的一部分發(fā)生反應(yīng)的探針和只能同一種基因組DNA發(fā)生雜交反應(yīng)的探針。

根據(jù)研究和應(yīng)用基因芯片技術(shù)，可以了解到核酸探針技術(shù)具有很多優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)：①核酸探針技術(shù)能夠有效檢驗(yàn)無(wú)法培養(yǎng)的微生物產(chǎn)物、不能進(jìn)行生化鑒定的微生物產(chǎn)物和無(wú)法觀察到的微生物產(chǎn)物等。②核酸探針技術(shù)能夠有效檢驗(yàn)由植物病毒寄生引起的病害。③核酸探針技術(shù)能夠有效檢驗(yàn)出細(xì)菌內(nèi)的抗藥基因。④核酸探針技術(shù)能夠有效檢驗(yàn)出食品是否被耐藥菌株污染。

另外，除了以上三種所描述的分子生物學(xué)技術(shù)外，還有ATP發(fā)光法、DNA指紋圖譜自動(dòng)分析系統(tǒng)以及氣相色譜等其它分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用。

5 結(jié)束語(yǔ)

綜上所述，現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用已經(jīng)較為普遍，其優(yōu)勢(shì)和技術(shù)也較明顯和先進(jìn)，現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中具有快速、準(zhǔn)確、高效、廣泛等特點(diǎn)。通過(guò)上述分析可知，現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)可以向自動(dòng)化和特異性的方向發(fā)展，并且注重于其他學(xué)科和技術(shù)的融合，擴(kuò)大應(yīng)用范圍。

［1］路則寶，白現(xiàn)廣.分子生物學(xué)技術(shù)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.紅河學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，02：61-63.

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