彭婧超

（湖南省醫(yī)藥技工學校 湖南長沙 410208）

探討熒光光譜法在藥物分析中的應用

彭婧超

（湖南省醫(yī)藥技工學校 湖南長沙 410208）

熒光光譜法是目前我國藥物分析的主要方法，在我國各科研機構(gòu)的應用廣泛，具有一定的優(yōu)勢。熒光光譜法能夠從分子之間的相互作用中分析藥物的分子的相互作用，在藥物分析中具有非常廣闊的發(fā)展前景。熒光光譜法的主要原理，是根據(jù)不同物質(zhì)在光照下的不同反射顏色和強度為主，根據(jù)反射光分析物質(zhì)的原理。本文主要對熒光光譜的傳統(tǒng)分析方法、新型分析方法以及與其他方法之間的聯(lián)用三個部分進行分析，總結(jié)熒光光譜法在藥物分析中的應用，并做發(fā)展展望。

熒光光譜法 技術分析 未來展望

不同的物質(zhì)具有不同的光線反射特質(zhì)，其反射的顏色和強度都有所不同，而如果物質(zhì)受到紫外光的照射，也會發(fā)出不同強度和顏色的熒光，熒光光譜法由此產(chǎn)生，并在藥物分析、食品檢驗等領域得到了充分的利用與發(fā)展。熒光光譜法的主要功能，是在不同的熒光反射下對物質(zhì)進行定性和定量，具有非常高的靈敏度，在臨床藥物研究與分析中能力突出。特別是對微量的藥物和痕量的藥物檢測時，能夠靈敏準確的得到藥物的檢測結(jié)果，具有非常大的優(yōu)勢，熒光光譜法經(jīng)過長時間的實際應用，已經(jīng)發(fā)展和創(chuàng)新了許多新的方法，具有十分成熟的檢驗體系，與其他檢驗方法也有一定的聯(lián)用。

1 常見的熒光光譜法

1.1 直接熒光法

許多藥物自身具有熒光成分，能夠直接通過熒光光譜法進行分析和測定，例如在檢測木香花中的總黃酮含量時，就可以直接應用激發(fā)波長為430nm、發(fā)射波長為497nm的紫外光進行分析，直接熒光法能夠快速、方便的檢測例如總黃酮的含量和性質(zhì)，對植物以及植物制劑中的物質(zhì)定量十分方便。而一些物質(zhì)則可以借助溶液為對照品進行直接熒光法的使用，例如在進行中藥巴戟天中蒽醌含量的測定時，就需要以丙酮為溶劑，激發(fā)波長為425nm、發(fā)射波長為513nm進行檢測，檢測結(jié)果與總黃銅含量相同，具有非常便捷、迅速的特點。

1.2 熒光衍生物法

熒光衍生法主要適用于不具有熒光或熒光非常微弱的物質(zhì)，這種物質(zhì)能夠借助試劑生成具有熒光的衍生物，衍生物的熒光屬于特異性熒光。此類物質(zhì)在臨床上的應用較多，如氨基糖苷類藥物，就屬于此類。氨基糖苷類藥物主要有慶大霉素、小諾霉素、阿米卡星、卡那霉素等。在氨基糖苷類藥物的檢測過程中，能夠利用2-巰基乙醇存在下，使用氨基與鄰苯二甲醛發(fā)生反應，生成具有強熒光性物質(zhì)的原理，以此方法進行水溶液中氨基糖苷類藥物的方法，熒光衍生物法與其他測量方法相比，具有重現(xiàn)性好、選擇性高、靈敏度高的優(yōu)勢，為熒光光譜法的提供了更廣闊的應用范圍。

1.3 化學引導熒光法

化學引導熒光法的主要原理，是利用化學方法，將一些自身無法產(chǎn)生熒光的化合物變?yōu)榫哂袩晒獾幕衔?，該方法主要分為氧化還原、水解、縮合反應、配合反應等。例如在維生素K3的檢驗中，維生素K3能夠在酸性條件下，通過三氯化鈦還原成有熒光的甲萘酚?；瘜W引導法進一步的提高了熒光光譜法的適用范圍，使不具有熒光的物質(zhì)也能通過熒光光譜法迅速的鑒別和定性定量。

2 新型熒光分析法

2.1 導數(shù)熒光分析法

導數(shù)熒光分析法的主要原理，是通過熒光的強度對波長的導數(shù)為縱坐標進行發(fā)射光譜的記錄。當波長導數(shù)為dF/dλ時，所使用的方法為一階導數(shù)熒光光譜法，而波長導數(shù)為d2F/d2λ時，則稱為二階導數(shù)熒光光譜法。通過這種方法能夠獲得其他高階導數(shù)熒光光譜結(jié)果，這種利用導數(shù)熒光的分析法，就成為導數(shù)熒光分析法。導數(shù)熒光分析法具有強力的抗干擾能力，在多混合物無法分離或直接測定的物質(zhì)分析當中應用效果顯著，在已有藥物中的維生素B、氧氟沙星對映體、環(huán)丙沙星等藥物的測量中廣泛應用。

2.2 同步熒光分析法

同步熒光法的主要適用范圍，在化合物的激發(fā)波長與發(fā)射波長差距較大時使用，同步熒光法能夠有效的降低散射峰的干擾。在測量時同時進行激發(fā)和發(fā)射光譜的掃描并做微分處理，從而得到較為準確的測量結(jié)果，在臨床上，同步熒光法往往與倒數(shù)熒光法聯(lián)用，取得較高的臨床應用效果。例如在檢驗尿樣中痕量左氧氟沙星以及洛美沙星是，能夠取得非常精準的效果。

3 與其他藥物分析技術的聯(lián)用

熒光聯(lián)用技術是指，在所有熒光光譜分析法當中進行不同熒光分析法的聯(lián)用，聯(lián)用技術能夠有效的提升分析的效率與效果。在臨床上應用較為廣泛的聯(lián)用技術有色譜-熒光檢測技術和流動注射-熒光檢測技術。多種技術聯(lián)用，能夠使藥物分析的方法更加自動化、智能化。也成為藥物分析的發(fā)展方向。

3.1 薄層色譜-熒光聯(lián)用

薄層色譜法是指，在實驗品中對已經(jīng)分離出的被測部分進行再次的熒光分析，提高熒光分析的準去程度，該方法適用于微量分析，在臨床上主要應用于黃連或香連丸中鹽酸小檗堿的含量測定，效果十分明顯。

3.2 凝膠色譜-熒光聯(lián)用

凝膠色譜-熒光法是指，在試驗品中已經(jīng)分離出的被測部分進行再次的分析，臨床上對膠體態(tài)鋁和溶解態(tài)鋁的分離效果與研究效果顯著，通過使用8-羥基喹啉和鉻藍黑R等兩種不同的衍生試劑進行分析，能夠從飲用水中分析單核鋁、無機單核鋁的含量，而結(jié)合硝酸消解，則可以測定飲用水中的總鋁和溶膠態(tài)鋁和膠體態(tài)鋁。

3.3 高效液相色譜-熒光聯(lián)用

高校液相色譜法操作方法和流程較為簡單，不需要衍生化和光照，在分離時能夠強力的分離雜志，對結(jié)果的干擾小，在復合維生素的檢測中優(yōu)勢明顯，復合維生素保健品當中核黃素含量的HPLC-熒光檢測法就是其中一種，高效液相色譜法的線性比較好，選擇性較高，且實驗精密度高、時間短，準確率高，在臨床上受到藥物分析工作人員的一致喜愛，臨床上還用該方法進行人血漿中坎地沙坦的檢測。

4 結(jié)語

醫(yī)學的發(fā)展離不開藥學科學的發(fā)展，藥物的成分、使用效果以及不良反應等都越來越受到臨床以及患者的關注，根據(jù)藥物的反射原理與特質(zhì)，熒光光譜法應用而生，熒光光譜法是檢測方法便捷、精準度高、操作簡單的檢驗方法，在臨床上的應用廣泛，隨著熒光光譜法與計算機技術的結(jié)合，未來熒光光譜法的發(fā)展前景廣闊能夠得到更多的發(fā)展空間，與更多的檢測方法聯(lián)用，為藥學檢驗做出貢獻。

［1］ 潘祖亭，關洪亮，原華平，李微，陳果.熒光光譜法在藥物分析中的應用［J］.吉首大學學報（自然科學版），2005（03）：27-34.

［2］ 陳智嫻.同步熒光分析法在藥物分析中的應用研究［J］.海峽藥學，2011（09）：53-56.

TQ460.7

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1674-2060（2016）02-0204-01