張　揚(連云港市贛榆區(qū)人民醫(yī)院藥劑科，江蘇 連云港　222100)

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復方中藥組方抗炎鎮(zhèn)痛作用的研究

張揚*(連云港市贛榆區(qū)人民醫(yī)院藥劑科，江蘇 連云港222100)

DOI10.14009/j.issn.1672-2124.2016.02.021

摘要目的：研究復方中藥組方的抗炎、鎮(zhèn)痛作用。方法：用復方中藥組方治療尿酸鈉誘導的急性痛風性關節(jié)炎模型大鼠，觀測治療前后大鼠受試關節(jié)體積；用小鼠醋酸扭體實驗、小鼠熱水甩尾實驗檢測復方中藥組方對小鼠的鎮(zhèn)痛作用。結果：在對復方中藥組方的抗炎作用研究中發(fā)現，復方中藥組方在各時間段均有顯著減低大鼠足趾發(fā)炎程度的效果。在對復方中藥組方的鎮(zhèn)痛作用研究中發(fā)現，與空白對照組相比，復方中藥組方高、中劑量組能極顯著地提高小鼠甩尾反應潛伏期；復方中藥組方高劑量組能極顯著地降低醋酸所致小鼠扭體反應次數，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論：復方中藥組方有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛療效。

關鍵詞復方中藥組方； 急性痛風性關節(jié)炎； 鎮(zhèn)痛； 抗炎

Research on Effects of Chinese Medicines Section on Anti-inflammatory and Analgesic

ZHANG Yang(Dept.of Pharmacy，People’s Hospital of Lianyungang Ganyu District，Jiangsu Lianyungang 222000，China)

ABSTRACTOBJECTIVE：To investigate the effects of Chinese medicines section(AG) on anti-inflammatory and analgesic. METHODS：The model rats with acute gouty arthritis caused by sodium urate were treated with AG，then the joint volume of tested rats were observed before and after treatment. Through the experiment of mice writhing and mice tail-flicking，the effects of AG on analgesic were detected. RESULTS：Through the research on anti-inflammatory experiment，AG could significantly decrease the degree of inflammation in rat paw in each period. Through the research on analgesic experiment，compared with blank control group，the high and middle dose groups of AG could significantly increase the response latency of mice tail-flicking; the high dose group could significantly decrease the times of writhing response. CONCLUSIONS：AG has significant and accurate anti-inflammatory and analgesic effects.

KEYWORDSChinese medicines section； Acute gouty arthritis； Analgesic； Anti-inflammatory

痛風是一種以持續(xù)性高尿酸血癥導致尿酸鈉晶體在關節(jié)及其周圍組織沉積為特征的代謝性疾病[1-2]。尿酸鹽在滑膜組織的沉積及其引起的炎癥是急性痛風發(fā)作的基礎[3-4]。國內外用于控制急性痛風性關節(jié)炎的藥物主要有秋水仙堿、非甾體抗炎藥等，但由于毒副作用較大限制了藥物的應用[5-7]。連云港市贛榆區(qū)人民醫(yī)院(以下簡稱“我院”)根據傳統(tǒng)中醫(yī)配方研制出復方中藥組方(AG)，經初步篩選療效較好，為進一步開發(fā)，本研究對其抗炎、鎮(zhèn)痛等指標進行研究，探討其防治痛風的作用[8-9]，現報告如下。

1材料

1.1動物

清潔級小鼠120只，體質量18～22 g，雌雄各半，由揚州大學比較醫(yī)學中心提供，許可證號：SCXK蘇2014-0005；清潔級大鼠70只，體質量180～220 g，雌性，由浙江省實驗動物中心提供，許可證號：SCXK浙2014-0009。

1.2藥品與試劑

AG：包括三七、冰片等成分，現成分及配比保密，將該復方濃縮成浸膏并干燥，1 g浸膏相當于6.8 g生藥，三七及冰片磨成粉末入藥，各成分按照處方混合。藥物配制：臨用前用0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)研磨配制成所需濃度的均勻混懸液。吲哚美辛(山西云鵬制藥有限公司，規(guī)格：每片25 mg，批號：A140102)；痛風舒片(湖南康普制藥有限公司，規(guī)格：每片0.32 g，批號：20131102)；冰醋酸(分析純，南京化學試劑有限公司，批號：13071610661)；秋水仙堿(昆明制藥集團有限公司，規(guī)格：每片0.5 mg，批號：130823-01)；尿酸鈉(美國Sigma公司，批號：121254025)。

1.3方法

1.3.1尿酸鈉晶體的制備：取194 ml蒸餾水加6 ml 1M氫氧化鈉，煮沸后加1 g尿酸鈉，用稀鹽酸至pH 7.2，攪拌冷卻，貯存于4 ℃冰箱中24 h，去上清液，用濾紙將沉淀物水份吸干，干燥即可得尿酸鈉結晶。取2 500 mg尿酸鈉結晶，加入22.5 ml的0.9%氯化鈉注射液，同時加入2.5 ml聚山梨酯-80，加熱攪拌，配成50 ml尿酸鈉混懸液(100 mg/ml)備用[10]。

1.3.2急性痛風性大鼠關節(jié)炎模型的建立及實驗方法：取大鼠70只，體質量180～220 g，雌性，按隨機數字表法分為空白對照組、模型對照組、秋水仙堿組、痛風舒片組及AG高、中、低劑量組。分別灌胃給藥，1日1次，連續(xù)14 d，空白對照組和模型對照組大鼠灌胃等量的CMC-Na。于末次給藥后30 min，在空白對照組注射0.1 ml的0.9%氯化鈉注射液，在其他各組每只大鼠右后足踝關節(jié)內注入0.1 ml尿酸鈉溶液(按Coderre[3]等經典方法略作改進，用6號注射針在受試大鼠右側踝關節(jié)背側，從45°方向插入脛骨肌膜內側，將0.1 ml尿酸鈉溶液注入到踝關節(jié)腔，形成急性痛風性關節(jié)炎模型)。給藥前測各鼠右踝關節(jié)下0.5 mm直徑。致炎后每1 h用足趾容積測量儀測各鼠右踝關節(jié)容積1次，連續(xù)測5 h，以致炎前、后測定差值為關節(jié)腫脹程度。足趾腫脹率(%)=致炎后足趾容積(ml)/致炎前足趾容積(ml)-1×100%。腫脹抑制率(%)=1-給藥組腫脹率平均值(%)/模型組腫脹率平均值(%) ×100%。

1.3.3熱水所致小鼠甩尾實驗：取清潔級小鼠60只，體質量18～22 g，雌雄各半，按隨機數字表法分為6組，每組10只，分別為空白對照組，吲哚美辛組，痛風舒片組及AG高、中、低劑量組。灌胃給藥，給藥容積為0.2 ml/10 g，對照組小鼠灌胃等容積的0.5%CMC-Na溶液，1日1次，連續(xù)7 d。末次給藥后30 min，以(55±1)℃的恒溫熱水為致痛原，在給藥后0.5 h用秒表測每只小鼠用藥前尾尖 5 cm 浸入熱水持續(xù)時間(以甩尾為終點)作為基礎痛閾。計算其痛閾的提高率，并將給藥前后甩尾潛伏期進行t檢驗評價藥效，見表1。痛覺提高閾(%)=1-給藥組甩尾潛伏期/空白對照組甩尾潛伏期×100%。

1.3.4醋酸所致小鼠扭體實驗：取清潔級小鼠60只，體質量18～22 g，雌雄各半，按隨機數字表法分為6組，每組10只，分別為空白對照組，吲哚美辛組，痛風舒片組，AG高、中、低劑量組。連續(xù)灌胃7 d，對照組小鼠灌胃給藥等容積的0.5% CMC-Na溶液。末次灌胃后30 min，腹腔注射0.7%冰醋酸0.1 ml/10 g。觀察每組小鼠15 min內平均扭體反應次數，從而計算鎮(zhèn)痛率。鎮(zhèn)痛率(%)=1-給藥組平均扭體次數/空白對照組平均扭體次數×100%。

1.4統(tǒng)計學方法

2結果

2.1各組大鼠關節(jié)腫脹情況比較

AG對尿酸鈉所致大鼠關節(jié)炎腫脹的影響見表1。

2.2各組小鼠對熱水所致小鼠甩尾反應的比較

6組小鼠對熱水所致小鼠甩尾反應的情況見表2。

2.3各組小鼠醋酸所致扭體反應次數的比較

6組小鼠醋酸所致扭體反應次數的12]情況見表3。

3討論

近年來，由于經濟的飛速發(fā)展、飲食結構的改變以及人類壽命的增長，痛風的發(fā)病率日益提高，成為當今世界中年男性的常見病[13]，大量的研究結果證明，中醫(yī)藥治療痛風有肯定療效[14-15]。AG是我院研究開發(fā)的治療痛風性關節(jié)炎的中藥復方，配方包括三七、冰片等，對痛風有較好的治療效果。為闡明該復方的藥效學基礎，本研究對其進行了抗炎鎮(zhèn)痛方面的實驗研究。

通過尿酸鈉所致大鼠關節(jié)炎腫脹實驗發(fā)現，與空白對照組相比，模型對照組在1 h的足趾腫脹率有顯著提高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，在2～4 h的足趾腫脹率有極顯著提高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，說明造模是成功的，形成了大鼠關節(jié)炎模型。與模型對照組相比，秋水仙堿組在1～5 h均可極顯著的降低由尿酸鈉所致大鼠足跖腫脹發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；痛風舒組在2 h可以顯著的降低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，在3～5 h均可極顯著地減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；AG高劑量組在1～2 h均可顯著地降低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，在3～5 h均可極顯著的減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；AG中劑量組在3～5 h均可極顯著的減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；AG低劑量組在3 h可顯著的降低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，在4～5 h均可極顯著的減低大鼠足趾發(fā)炎程度，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。

通過熱水所致小鼠甩尾試驗發(fā)現，與空白對照組相比，吲哚美辛組和AG高劑量組均能極顯著的提高小鼠甩尾反應潛伏期，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；痛閾提高率分別為33.33%和28.95%，痛風舒片組和AG中劑量組均能顯著提高小鼠甩尾反應潛伏期，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，痛閾提高率分別為27.19%和23.25%。

±s)

注：與模型對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與空白對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；“—”表示無相關數據

Note：vs. model control group，*P<0.05，**P<0.01；vs. blank control group，#P<0.05，##P<0.01；“—”stands for no relevant data available

±s)

注：與空白對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；“—”表示無相關數據

Note：vs. blank control group，#P<0.05，##P<0.01；“—”stands for no relevant data available

±s)

注：與空白對照組比較，#P<0.05，##P<0.01；“—”表示無相關數據

Note：vs. blank control group，#P<0.05，##P<0.01；“—”stands for no relevant data available

通過醋酸所致小鼠扭體實驗發(fā)現，與空白對照組相比，吲哚美辛組和AG高劑量組均能極顯著的降低醋酸所致小鼠扭體反應次數，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，鎮(zhèn)痛率分別為42.76%和36.40%，痛風舒片組能顯著的降低醋酸所致小鼠扭體反應次數，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，鎮(zhèn)痛率為20.14%。

綜上所述，AG有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛作用，其療效相比于西藥陽性藥較弱，相比于中藥陽性藥痛風舒片較強，有進一步研究開發(fā)的價值。

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(收稿日期：2015-11-09)

中圖分類號R932

文獻標志碼A

文章編號1672-2124(2016)02-0198-03

*主管藥師。研究方向：藥學、醫(yī)改、農村公共衛(wèi)生。 E-mail：gyxwsjdcb@126.com