寇 玉

（遼寧省鞍山市岫巖縣動物衛(wèi)生監(jiān)督管理局洋河鎮(zhèn)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，遼寧鞍山 114300）

兔李斯特氏菌病的檢疫

寇 玉

（遼寧省鞍山市岫巖縣動物衛(wèi)生監(jiān)督管理局洋河鎮(zhèn)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，遼寧鞍山 114300）

李斯特氏菌病或稱李氏桿菌病，是一種散發(fā)性傳染病，以全身血液中毒-敗血癥和子宮炎及流產(chǎn)為特征。本病的病原為單核細(xì)胞增多性李氏桿菌（或單核細(xì)菌增多性李斯特氏菌、產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌）。

兔；李斯特氏菌??；檢疫

1 疾病概況

本菌微嗜氧，在含5～10%二氧化碳的低氧環(huán)境內(nèi)生長較好。在22℃與37℃中生長同樣良好，4℃也能緩慢生長，故可冷增菌。普通培養(yǎng)基均可生長，如加入少許葡萄糖、血液、血清或肝浸液則生長更好。家兔、豚鼠、小鼠對本菌都很敏感，注射、滴眼都可引起感染。病兔出現(xiàn)特殊神經(jīng)癥狀，孕兔流產(chǎn)、血液中單核細(xì)胞增多，剖檢一般沒有特殊肉眼變化。當(dāng)病兔出現(xiàn)特殊神經(jīng)癥狀，孕兔流產(chǎn)、血液中單核細(xì)胞增多時(shí)，可作為診斷的參考。確診必須作細(xì)菌學(xué)診斷。

2 流行病學(xué)

本病的易感動物很廣泛，常為散發(fā)性，偶爾呈地方性流行，不廣泛傳播，發(fā)病率較低，但死亡率很高。本菌由患病動物的糞、尿、乳汁、精液排出，也可由眼、鼻、生殖道分泌物分離到本菌。嚙齒動物特別是鼠類是本菌的貯存宿主。傳染途徑很可能是消化道、呼吸道、眼結(jié)膜或皮膚傷口。食入污染本菌的飼料和飲水可引發(fā)本病。患病動物和帶菌動物是本病的傳染源。

3 活體檢疫

出現(xiàn)明顯癥狀者較少，多不出現(xiàn)癥狀而急性死亡。幼兔多呈急性敗血癥。有的表現(xiàn)精神委頓，獨(dú)蹲一隅，不愿走動。有的則出現(xiàn)痙攣，口流白沫；神志不清。神經(jīng)癥狀呈間歇發(fā)作，發(fā)作時(shí)無目的地向前沖撞，或轉(zhuǎn)圈運(yùn)動。持續(xù)時(shí)間和間歇時(shí)間不一。最后倒地，頭后仰，抽搐，以至衰竭死亡。妊娠兔患病時(shí)，在妊娠后期出現(xiàn)化膿性子宮內(nèi)膜炎、腹膜炎，引起流產(chǎn)。

4 病理學(xué)檢疫

全身淤血，皮下結(jié)締組織呈膠陳樣，皮下淋巴結(jié)腫大。腹水量增加，渾濁。肝臟實(shí)質(zhì)有界限不清的壞死灶，血液和組織中單核細(xì)胞增多。表現(xiàn)敗血癥的病兔，剖檢時(shí)見有敗血癥變化。流產(chǎn)母兔可見到子宮內(nèi)膜充血，以至廣泛壞死。有神經(jīng)癥狀的病兔，腦膜和腦可能見到充血、炎癥或水腫變化，腦干變軟，有細(xì)小膿灶，血管周圍有單核細(xì)胞浸潤。

5 病原學(xué)檢疫

（1）病料采集。采集血、肝、脾、腎、腦脊髓液、腦的病變組織，對出現(xiàn)流產(chǎn)及子宮炎癥狀的患兔，應(yīng)采集子宮內(nèi)分泌物。作觸片或涂片，革蘭氏染色鏡檢。

（2）顯微鏡鏡檢。單核細(xì)胞增多性李氏桿菌為一種細(xì)長的小球桿菌，一般長約1～3μm，寬約0.5μm，無芽孢，無莢膜。有鞭毛，能運(yùn)動，但在22℃培養(yǎng)的細(xì)菌，出現(xiàn)倒傘型生長。在涂片中，或單個(gè)散在，或排成“V”形，或相互并列呈柵狀，有時(shí)呈短鏈（液體培養(yǎng)）或絲狀（固體培養(yǎng)）。幼齡培養(yǎng)菌革蘭氏染色陽性，老齡培養(yǎng)菌常呈革蘭氏陰性。

（3）細(xì)菌分離培養(yǎng)。新鮮無污染病料接種血液或血清培養(yǎng)基，2%葡萄糖和2～3%甘油肝浸液培養(yǎng)基；回盲部內(nèi)容物先用CRT增菌液增菌（或先用LB1增菌液30℃增菌24h后，再用LB2增菌）后，再接種固體培養(yǎng)基分離細(xì)菌；污染病料接種于亞碲酸鉀血液培養(yǎng)基，然后挑取可疑菌落接種血液培養(yǎng)基。經(jīng)過37℃培養(yǎng)數(shù)天后，觀察細(xì)菌的生長性狀。

在含5～10%二氧化碳的低氧環(huán)境中生長良好。在MMA瓊脂平皿上形成菌落在45°光源照射下，呈現(xiàn)藍(lán)綠色，圓形稍凸起，邊緣整齊的小菌落。單核細(xì)胞增多性李氏桿菌在血液瓊脂上培養(yǎng)18～24h，能長出光滑型直徑約0.8mm的灰白色菌落，菌落周圍有狹窄的β溶血環(huán)，扁平濕潤，稍有隆起，邊緣整齊。粗糙型的則稍大而平坦，在培養(yǎng)基上形成長絲，可斷成桿狀，邊緣如齒狀，中間如臍狀，脆而不易乳化，中央為顆粒狀。亞碲酸鉀血液培養(yǎng)基生長的單核細(xì)胞增多性李氏桿菌為呈β型溶血的細(xì)小黑色菌落，邊緣發(fā)綠。在液體培養(yǎng)基內(nèi)，光滑型的均勻混濁，粗糙型的則為顆粒狀生長。在含有0.5～1%的葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)幾天后菌落可達(dá)1～3mm。明膠穿刺培養(yǎng)，沿穿刺線長出分散的菌落，形成一棵“倒載的松樹”，明膠不液化。

單核細(xì)胞增多性李氏桿菌能發(fā)酵麥芽糖、鼠李糖、水楊苷，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；也能發(fā)酵蔗糖，但較慢；不發(fā)酵阿拉伯糖、木糖、衛(wèi)矛醇。不形成硫化氫和吲哚，不產(chǎn)生過氧化氫酶。三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基30±1℃培養(yǎng)18～24h，斜面產(chǎn)酸，底層產(chǎn)酸，硫化氫陰性。

（4）動物接種試驗(yàn)。在家兔、小鼠或幼豚鼠腹腔、靜脈內(nèi)注射，都可引起敗血癥死亡。最簡易的方法是將病料懸液滴入試驗(yàn)動物眼內(nèi)，一天后發(fā)生結(jié)膜炎，之后發(fā)生敗血癥死亡，妊娠2周的動物常發(fā)生流產(chǎn)。①家兔接種：取0.5ml菌懸液（約3×108/ml）耳靜脈注射幼兔，在3～5d內(nèi)，幼兔血液內(nèi)的單核細(xì)胞可上升到40%以上。②小鼠接種：選擇16～20g小鼠1只，腹腔注射0.2ml肉湯培養(yǎng)物，飼喂5天，將其殺死，可發(fā)現(xiàn)肝臟、脾臟有壞死灶，如進(jìn)行分離培養(yǎng)可回收到本菌。③結(jié)膜囊點(diǎn)眼試驗(yàn)：取幼兔或豚鼠1只，用待檢細(xì)菌的24h肉湯培養(yǎng)物1滴，滴入動物一側(cè)結(jié)膜囊內(nèi)，另一側(cè)為對照，觀察5d。一般在接種24～36h內(nèi)，出現(xiàn)化膿性結(jié)膜炎。

［1］ 王巖梅，隋春麗，黃翠麗.李氏桿菌病的致病性及診療［J］.中國畜禽種業(yè)，2014，（2）：15.

［2］ 黃翠麗，王玲.李氏桿菌病研究進(jìn)展［J］.山東畜牧獸醫(yī)，2006，（4）：30.

寇玉（1987—），男，籍貫：遼寧省鞍山市岫巖滿族自治縣岫巖鎮(zhèn)，助理獸醫(yī)師，本科，主要從事動物檢疫防疫工作。