張亮權(quán)

（廣州力智農(nóng)業(yè)有限公司，廣東廣州 510555）

豬偽狂犬病毒病與圓環(huán)病毒病2型混合感染的診斷分析

張亮權(quán)

（廣州力智農(nóng)業(yè)有限公司，廣東廣州 510555）

近些年來(lái)，豬偽狂犬病毒病和圓環(huán)病毒病2型在養(yǎng)豬場(chǎng)中的混合感染發(fā)病嚴(yán)重地危害到國(guó)內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展，針對(duì)病豬進(jìn)行臨床診斷與檢測(cè)，判斷病豬的感染病原，確診為PRV與PCV2混合感染，采取合理防控措施后，取得較好效果。

養(yǎng)豬場(chǎng)；偽狂犬病毒；圓環(huán)病毒2型；診斷

豬偽狂犬病毒病是一種與其它動(dòng)物共患的皰疹病毒科急性傳染病，簡(jiǎn)稱(chēng)為PRV，仔豬在斷奶前或斷奶后若感染該疾病，其癥狀表現(xiàn)有咳嗽、呼吸困難、腹瀉、嘔吐或者神經(jīng)癥狀等，甚至部分病豬會(huì)出現(xiàn)死亡的情況。而豬圓環(huán)病毒病可引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征，其主要病原為圓環(huán)病毒病2型感染病毒，可簡(jiǎn)稱(chēng)為PCV2。隨著PRV與PCV2混合感染的不斷發(fā)生，對(duì)其進(jìn)行合理診斷與防治具有重要價(jià)值與意義。

1 PRV與PCV2混合感染的流行特點(diǎn)及癥狀

截止至2011年，豬偽狂犬病毒病在疫苗的有效運(yùn)用下得到了良好控制，發(fā)病率并不高，但是近些年來(lái)國(guó)內(nèi)很多區(qū)域的養(yǎng)豬場(chǎng)先后流行了豬偽狂犬病毒病，甚至實(shí)施了常規(guī)疫苗的豬場(chǎng)也再次出現(xiàn)類(lèi)似病豬。其中部分豬場(chǎng)是豬偽狂犬病毒病與PCV2混合感染造成的，此類(lèi)病豬與以往單純感染豬偽狂犬病毒病的病豬相比，具有發(fā)病更急、病豬的發(fā)病率及死亡率也更高的特點(diǎn)。感染病毒豬的癥狀表現(xiàn)為[1]：①體溫：介于40.5～41.5℃之間；②體表：皮膚呈現(xiàn)蒼白，耳背部位呈現(xiàn)青紫色，體型逐漸消瘦，口吐白沫；③呼吸系統(tǒng)癥狀：氣喘、流鼻汁、腹式呼吸；④步態(tài)：呈現(xiàn)犬坐姿勢(shì)，步行時(shí)狀態(tài)不穩(wěn)，一些病豬只在倒臥的時(shí)候姿勢(shì)為游泳狀；⑤腹股溝淋巴結(jié)出現(xiàn)比較顯著的腫大癥狀。

2 PRV與PCV2混合感染的診斷與檢測(cè)方法

2.1 做好流行病學(xué)調(diào)查

可以通過(guò)詢問(wèn)法來(lái)對(duì)豬場(chǎng)發(fā)病狀況及其臨床癥狀進(jìn)行了解，種母豬返情率是否升高，流產(chǎn)、死胎、木乃伊的比例是否升高，哺乳仔豬和保育豬的死淘率是否上升，病殘豬是否出現(xiàn)神經(jīng)癥狀等。

2.2 臨床癥狀和病理解剖觀察

這一環(huán)節(jié)包括兩個(gè)部分：第一，對(duì)未死的病豬進(jìn)行臨床觀察。病豬體型消瘦，皮膚蒼白，被毛粗亂，精神沉郁，且腹式呼吸，存在共濟(jì)失調(diào)和間歇性痙攣的問(wèn)題，倒臥時(shí)呈游泳狀姿勢(shì)。第二，對(duì)病死豬進(jìn)行剖檢，胸腔、腹腔的無(wú)菌切開(kāi)，吸取積液，或者用棉簽將胸膜或者腹膜的黏附物取出，并將死病豬的脾、腎、肺、肝和淋巴結(jié)等取出，對(duì)其病理變化進(jìn)行觀察。

2.3 細(xì)菌培養(yǎng)

對(duì)病死豬取出的脾、腎、肺、肝和淋巴結(jié)等組織觸片實(shí)施瑞氏染色與革蘭染色，并在顯微鏡鏡下觀察是否具有特征性的細(xì)菌生長(zhǎng)現(xiàn)象。在無(wú)菌操作劃線下，于普通瓊脂培養(yǎng)基中接種病料，在37℃的環(huán)境中進(jìn)行24h的培養(yǎng)，觀察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)。[2]若無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)，則該病不是由細(xì)菌感染造成并無(wú)繼續(xù)細(xì)菌感染，若有細(xì)菌生長(zhǎng)，則對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分型分析，并判斷是原發(fā)疾病還是繼發(fā)感染，同時(shí)進(jìn)行藥敏試驗(yàn)指導(dǎo)生產(chǎn)用藥。

2.4 開(kāi)展Elisa檢測(cè)

采取病豬血液樣品并分離血清，做好標(biāo)記后根據(jù)偽狂犬gE抗體Elisa檢測(cè)試劑盒的相關(guān)說(shuō)明書(shū)操作。有必要時(shí)，要對(duì)整個(gè)群體，按照種豬群和肉豬群的不同比例進(jìn)行抽檢，普查偽狂犬的整體感染情況。

2.5 PCR檢測(cè)

取出15g的脾、腎、肺、肝和淋巴結(jié)病料，根據(jù)病料和PBS的1：5比例，加入PBS制作懸液，在-20℃的溫度下反復(fù)進(jìn)行三次凍融，取出200μl組織勻漿液，然后根據(jù)DNA提取試劑盒的相關(guān)說(shuō)明進(jìn)行DNA提取操作。對(duì)病豬病料進(jìn)行DNA提取后，開(kāi)展復(fù)合PCR檢測(cè)，結(jié)果顯示為同時(shí)擴(kuò)增出大小為198bp、321bp的兩條特異性條帶，符合預(yù)期條帶大小，可以確診為檢測(cè)的病豬病料中含有豬偽狂犬病毒病與圓環(huán)病毒2型病原，病豬為PRV與PCV2混合感染。

3 PRV與PCV2混合感染的防控策略

首先，確診疫病后，要進(jìn)行病豬隔離處理，病死豬及時(shí)無(wú)害化處理，可對(duì)豬群進(jìn)行偽犬疫苗與圓環(huán)病毒疫苗的緊急接種，同時(shí)，在疫病壓力下，偽狂犬疫苗免疫最好使用活苗+活苗+滅活苗的方式，間隔4周進(jìn)行一次免疫。其次，要增強(qiáng)養(yǎng)豬場(chǎng)的飼養(yǎng)管理。比如，選用優(yōu)質(zhì)小豬料的喂養(yǎng)，加強(qiáng)環(huán)境衛(wèi)生以及溫度、濕度和通風(fēng)的管理，在飼料中拌入中藥或抗生素，比如抗病毒板藍(lán)根、黃氏多糖、連翹、維生素與氟苯尼考等等。最后，要強(qiáng)化養(yǎng)豬場(chǎng)的消毒處理。尤其在疫情剛開(kāi)始爆發(fā)時(shí)非常關(guān)鍵，需要增加對(duì)豬場(chǎng)全場(chǎng)的消毒頻率，盡快降低環(huán)境中的病毒載量。另外，帶豬消毒時(shí)，可以使用復(fù)合酚或者聚維酮碘等消毒劑[3]。通過(guò)這一系列的綜合防控措施后，疫情可以得到有效控制。

4 結(jié)束語(yǔ)

對(duì)于偽狂犬病毒而言，豬是其自然宿主和貯存宿主，引起母豬繁殖障礙，哺乳仔豬和保育豬的大量死亡，育肥豬呼吸道疾病、生長(zhǎng)緩慢，對(duì)豬場(chǎng)的危害極大，會(huì)造成豬場(chǎng)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。而PCV2病原具有免疫抑制作用，可引起多種感染疾病，其中就包含了斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征。近年來(lái)豬偽狂犬病毒病與圓環(huán)病毒2型混合感染疾病不斷出現(xiàn)，必須積極開(kāi)展相關(guān)臨床診斷與病理剖析、防治措施，保障豬群的健康及豬場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。

[1] 劉建，湯德元，曾智勇，等.某規(guī)?；i場(chǎng)豬偽狂犬病毒和豬圓環(huán)病毒2型混合感染的診斷[J].黑龍江畜牧獸醫(yī)，2013，（19）：95-97.

[2] 譚衛(wèi)國(guó).豬圓環(huán)病毒病與豬瘟、豬偽狂犬病混合感染的應(yīng)急措施[J].畜牧市場(chǎng)，2010，（7）：105-106.

[3] 溫新瑞，潘承鳳，石永勝.豬偽狂犬病和圓環(huán)病毒2型混合感染的診斷與防控[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘，2016，（3）：131.