陳青松 董 耘 張正鳳

(江蘇省淮安市淮安區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,江蘇淮安 223200)

淮安區(qū)雞禽流感綜合防控技術(shù)探討

陳青松 董 耘 張正鳳

(江蘇省淮安市淮安區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,江蘇淮安 223200)

禽流感疫苗抗體產(chǎn)生慢、有效保護(hù)期短,免疫程序比較難掌控,嚴(yán)重威脅家禽生產(chǎn)安全,為了制定一較好的免疫程序,有效保護(hù)養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展,我們針對(duì)本地實(shí)際情況,對(duì)雞母源抗體持續(xù)時(shí)間、疫苗注射后抗體產(chǎn)生時(shí)間、有效保護(hù)時(shí)間等進(jìn)行檢測(cè),并制對(duì)規(guī)模雞場(chǎng)制定定了免疫程序、推廣使用免疫效果監(jiān)測(cè),提升了免疫防控效果,建立了免疫、監(jiān)測(cè)、撲殺、消毒、生物安全等內(nèi)容的綜合防控措施,有效控制了禽流感的危害。

雞;禽流感;母源抗體;免疫抗體;抗體效價(jià);免疫程序;綜合防控

禽流感（AI）是由A型禽流感病毒（AIV）引起的一種禽類(lèi)傳染性疾病，該病是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織規(guī)定的A類(lèi)傳染病，我國(guó)列為一類(lèi)動(dòng)物疫病。禽流感的流行給養(yǎng)禽業(yè)造成極大危害，同時(shí)也成為影響人類(lèi)公共健康的危險(xiǎn)，但由于禽流感疫苗抗體產(chǎn)生慢、有效保護(hù)期短，所以免疫程序比較難掌控。我們采用血凝-血凝抑制試驗(yàn)，對(duì)雞禽流感母源抗體持續(xù)時(shí)間及免疫抗體消漲規(guī)律進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)了解雞場(chǎng)的禽流感抗體水平，為我區(qū)養(yǎng)雞戶(hù)提供相對(duì)合理的免疫程序，同時(shí)結(jié)合科學(xué)飼養(yǎng)管理、加強(qiáng)防疫消毒、生物安全等措施，有效控制了我區(qū)禽流感的危害。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 材料

（1）重組禽流感病毒H5亞型三加滅活苗（Re-6株+Re-7株+Re-8株），生產(chǎn)廠(chǎng)家：青島易邦生物工程有限公司，免疫期4個(gè)月，停藥期28d；

（2）禽流感病毒H5亞型抗體血凝抑制試驗(yàn)抗原，生產(chǎn)廠(chǎng)家：哈爾濱維科生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司；

（3）0.5%紅細(xì)胞懸液

采取健康青年公雞（淮城鎮(zhèn)張軍雞場(chǎng)）的血液加于盛有抗凝劑的試管中，用20倍量的PBS液洗的血球，反復(fù)3～4次，每次離心5s，最后一次離心10s，吸取壓積紅血球，用PBS配置成0.5%紅細(xì)胞懸液。

（4）雞血清：在淮安區(qū)車(chē)橋任慶云蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng)隨機(jī)抽取300只蛋雞進(jìn)行抗體檢測(cè)試驗(yàn)，苗雞為2016年2月28日購(gòu)進(jìn)的1日齡苗雞）。

（5）試驗(yàn)時(shí)間2016年3月～2016年8月。

1.2 試驗(yàn)方法

采用抗凝-抗凝抑制試驗(yàn)。將300只蛋雞隨機(jī)分為A、B、C三組，每組100只。A組檢測(cè)母源抗體；B、C組在14日齡（3月14日）首免；C組在首免20天后（4月3日）進(jìn)行二免。

2 試驗(yàn)結(jié)果

抗體檢測(cè)統(tǒng)計(jì)表：

（1）母源抗體消漲規(guī)律：根據(jù)吳庭才等人的試驗(yàn)，禽流感最低保護(hù)臨界值為4log2，表1顯示，蛋雞在1日齡時(shí)，其母源抗體有一定保護(hù)作用，保護(hù)率可達(dá)54%；到1周齡時(shí)，母源抗體升至高峰，保護(hù)率達(dá)84%，以后逐漸下降，2周齡時(shí)，保護(hù)率達(dá)62%；3周齡時(shí)，保護(hù)率下降到8%；4周齡時(shí)已基本沒(méi)有保護(hù)力。

（2）表2顯示，首免后一周內(nèi)，沒(méi)有產(chǎn)生抗體，達(dá)不到保護(hù)作用。免疫2周后，抗體逐漸產(chǎn)生，但仍然沒(méi)有達(dá)不到保護(hù)作用，滴度4log2以上的只有30只，占15%；免疫3周后，保護(hù)率達(dá)到80%以上，免疫4周后，保護(hù)率達(dá)到82%以上，并逐漸穩(wěn)定；首免疫4個(gè)月時(shí)，抗體滴度還保持在 81%，并逐漸下降；首免5個(gè)月后保護(hù)率降低到52.5%，且接近臨界值；首免6個(gè)月后，已基本沒(méi)有保護(hù)作用。

（3）表3顯示，二免一周后，全部產(chǎn)生有效抗體，保護(hù)率達(dá)100%，并持續(xù)保持近4個(gè)月，二免4個(gè)月后，抗體保護(hù)率仍然達(dá)91%，以后逐漸下降，二免130天后，保護(hù)率達(dá)77%。

表1 A組 母源抗體檢測(cè)表 單位：只

表2 B、C組 首免后抗體檢測(cè)表 單位：只

表3 C組 二免后抗體檢測(cè)表 單位：只

3 討論與總結(jié)

（1）表1顯示，母源抗體保護(hù)作用在1～2周齡，2周齡時(shí)盡管母源抗體保護(hù)率仍然達(dá)60%以上，達(dá)抗體滴度只在4log2～5log2之間，保護(hù)力較弱；表2顯示，首免后2周內(nèi)，雞群還沒(méi)有產(chǎn)生有效保護(hù)作用。根據(jù)施祖灝等人的試驗(yàn)結(jié)果，雞禽流感強(qiáng)化免疫應(yīng)選擇在抗體雞群抗體滴度在4log2～5 log2時(shí)進(jìn)行，免疫過(guò)早，易與母源抗體產(chǎn)生中和作用，免疫過(guò)遲會(huì)形成抗體保護(hù)空白期，所以雞禽流感首免應(yīng)在10～14日齡，不應(yīng)超過(guò)14日齡。

（2）根據(jù)表2，雞群只進(jìn)行首免時(shí)，抗體產(chǎn)生較慢，且保護(hù)力較弱，抗體滴度最高只有6log2；根據(jù)表3可知雞群在進(jìn)行二免后會(huì)快速產(chǎn)生抗體，一內(nèi)保護(hù)率即上升到100%，且保護(hù)力強(qiáng)，抗體滴度都在6log2以上。所以雞群首次免疫后，一定要進(jìn)行二免。

（3）根據(jù)原麗麗等人的研究是首免后30d進(jìn)行二免，我們根據(jù)實(shí)踐和試驗(yàn)認(rèn)為，首免后3周進(jìn)行二免比較好，可快速產(chǎn)生抗體，減少免疫空白期，盡快對(duì)雞群起到保護(hù)作用。

（4）如禽流感母源抗體較差的雞群，應(yīng)提早進(jìn)行首免，首免因在7日齡左右。

（5）試驗(yàn)說(shuō)明，在母源抗體較好的情況下，10～14日齡首免，在首免后21d左右才能產(chǎn)生有效保護(hù)作用，而且應(yīng)該進(jìn)行二免，而疫苗停藥期為28d，肉雞一般40d出欄，所以此類(lèi)禽流感疫苗不宜用于肉雞。

（6）一般疫苗免疫后不能立即產(chǎn)生免疫力，需要一定的誘導(dǎo)期，這段時(shí)期稱(chēng)為免疫空白期。在免疫空白期間，由于還沒(méi)有產(chǎn)生堅(jiān)強(qiáng)的免疫力，如有病毒存在，就有可能引發(fā)疫病。因此要重視這段時(shí)期的飼養(yǎng)管理，防止免疫失敗。

（7）平時(shí)就要加強(qiáng)飼養(yǎng)管，理定期消毒，認(rèn)真做好雞群隔離、雞場(chǎng)環(huán)境及流動(dòng)人員和車(chē)輛消毒等工作，切斷外界傳染源；病死家禽及污染物及時(shí)無(wú)害化處理防止環(huán)境污染，切斷病原在場(chǎng)內(nèi)的傳播；有條件的場(chǎng)實(shí)施全封閉、全進(jìn)全出管理等；提升圈舍設(shè)施化程度，改善蛋雞飼養(yǎng)環(huán)境，提高蛋雞免疫保護(hù)水平，降低家禽發(fā)病率和死亡率。

（8）為了便于免疫接種，疫苗在使用前從冰箱中取出，置于室溫（22℃左右）2h左右。疫苗使用前充分搖勻。疫苗注射期間，經(jīng)常搖動(dòng)，混勻疫苗。疫苗啟封后，限24h內(nèi)用完。

（9）接種前要檢查家禽是否健康，禁止給不健康的家禽接種疫苗。因?yàn)椴唤】档募仪萁臃N疫苗免疫效果差或無(wú)效，甚至加重病情。發(fā)現(xiàn)家禽群體中有可疑傳染病時(shí)，立即停止疫苗接種。此外，為了避免家禽發(fā)生反胃現(xiàn)象，疫苗注射的當(dāng)天早晨要禁飼。

（10）做好免疫記錄檔案

給蛋雞接種疫苗后，為及時(shí)掌握區(qū)域內(nèi)每只蛋雞已接種疫苗的種類(lèi)和接種疫苗的次數(shù)，以及執(zhí)行免疫程序的情況，追溯疫苗的免疫質(zhì)量，動(dòng)物防疫員和雞場(chǎng)獸醫(yī)人員要及時(shí)做好免疫記錄。免疫記錄既是一個(gè)重要的任務(wù)，也是一項(xiàng)科學(xué)性很強(qiáng)的工作。如果隨意地、不科學(xué)地記錄，那么記錄的免疫數(shù)據(jù)就可能沒(méi)有什么意義甚至產(chǎn)生誤導(dǎo)，就達(dá)不到記錄的目的。要做到科學(xué)地記錄，記錄內(nèi)容應(yīng)包括蛋雞的品種、年齡，疫苗的來(lái)源、批次，接種時(shí)間等。

總之只有綜合運(yùn)用免疫、監(jiān)測(cè)、撲殺、消毒、生物安全等措施，才能有效控制了禽流感病毒的危害。

[1] 吳庭才，張春杰，郭向鵬.禽流感母源抗體消長(zhǎng)規(guī)律和免疫保護(hù)抗體臨界值的測(cè)定[J]. 洛陽(yáng)農(nóng)業(yè)高等專(zhuān)科學(xué)校學(xué)報(bào)，2002，22（4）：243-244.

[2] 施祖灝，祁克宗，盧運(yùn)戰(zhàn)，等.種雞禽流感抗體群體滴度與最佳免疫時(shí)間的探討[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2007，（3）：38.

[3] 原麗麗，李永剛，鄭書(shū)濤，等.規(guī)?；半u場(chǎng)H5亞型禽流感疫苗免疫程序與抗體水平分析[J].中國(guó)家禽，2007，29（24）：127.