●桂彩云

羥基紅花黃色素A對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)作用

●桂彩云

據(jù)科植物紅花的干燥花即為中藥紅花，具有活血化瘀的功效，屬于該功效的代表性藥物。紅花包含的化學(xué)成分較多，具有復(fù)雜性特點(diǎn)，其中黃酮類(lèi)、色素、脂肪酸、揮發(fā)油以及多炔等化合物已得到實(shí)驗(yàn)證實(shí)。有研究顯示，水溶性的黃色素集中了其還不嘔血化瘀的主要成分。本文通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，對(duì)羥基紅花黃色素A對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)作用進(jìn)行了探索。

羥基紅花黃色素A；實(shí)驗(yàn)性腦缺血；保護(hù)作用

羥基紅花黃色素A（以下簡(jiǎn)稱(chēng)HSYA）、紅花明苷A、紅花明苷B和其他低含量成分是紅花黃色素的主要化學(xué)成分，其中HSYA的含量最高，而且活性較高。為了探討HSYA對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦缺血的保護(hù)作用，本文建立了大鼠腦動(dòng)脈阻塞性腦缺血模型，對(duì)HSTA對(duì)大鼠的行為評(píng)分和缺血面積產(chǎn)生的影響進(jìn)行了觀察研究，具體研究如下。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品和試劑

注射用和HSYA凍干粉針（山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心，20000525，10mg/支），使用生理鹽水配置特定濃度的溶液，血塞通注射液（徐州萊恩藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字Z32020421），主要藥理成分為三七總皂苷。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性Aistar大鼠，體重控制在（320±33）克左右。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 模型建立和分組[1]

按照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》中的規(guī)定和操作流程，對(duì)大鼠建立實(shí)驗(yàn)性腦缺血模型。然后將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為A組（假手術(shù)組）、B組（生理鹽水組）、C組（1.5mg/kgHSYA組）、D組（3mg/kgHSYA組）、E組（6mg/kgHSYA組）、F組（0.2mg/kg尼莫地平組）和G組（36mg/kg血塞通組）等7個(gè)組別，每組10只大鼠。除A組外，其他6組在缺血0.5小時(shí)后，均采用對(duì)應(yīng)藥物和劑量行靜脈給藥，給藥體積為1ml/kg。

2.2 行為評(píng)分和腦缺血面積檢測(cè)

在大鼠缺血1天后，參照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》對(duì)其神經(jīng)功能行為進(jìn)行評(píng)分，將其殺死后，取腦，然后采用TTC（紅四氮唑）染色法，檢測(cè)其腦缺血面積。具體操作為：將小腦、低位腦干和嗅球去掉后，用生理鹽水沖洗干凈，將其冠狀切成5片。將大腦前極和視覺(jué)交叉連線(xiàn)的中點(diǎn)、視交叉、漏斗柄和后極之間作為切片位置。

使用3.4毫升蒸餾水、0.1毫升1mmol/L磷酸氫二鉀和1.5毫升4%紅四氮唑配置成5毫升染液，在37℃的環(huán)境中，將腦片放置其中，染色0.5小時(shí)，每隔5分鐘翻動(dòng)1次。染色后，正常組織呈紅色，梗死組織呈白色，照相備用，然后用病理圖像軟件對(duì)5個(gè)腦片的梗死面積/腦片總面積進(jìn)行計(jì)算。

2.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS17.0軟件對(duì)本組研究數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用%表示，進(jìn)行x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)。當(dāng)P＜0.05時(shí)，表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

3.1 HSYA對(duì)行為評(píng)分的影響

A～G7組大鼠的行為評(píng)分分別為0、10.15±0.95、9.26±1.24、7.19±0.61、5.78±1.12、4.83±1.47 和 7.54±0.86分。

和A組比較，B組大鼠經(jīng)生理鹽水給藥后，開(kāi)始出現(xiàn)明顯的行為障礙。C組、D組和E組分別給與了不同劑量的HSYA，結(jié)果大鼠的行為評(píng)分明顯低于B組，差異均有意義（P＜0.05），提示劑量存在依賴(lài)性。D組大鼠的行為評(píng)分和G組相比，組間差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。同時(shí)，E組和F組的大鼠行為評(píng)分也無(wú)明顯差異（P＞0.05）。由此可知，不同劑量的HSYA靜脈給藥，對(duì)于改善腦缺血?jiǎng)游锏男袨檎系K具有顯著作用。[2]

3.2 HSYA對(duì)腦缺血面積的影響

A～G 組的腦缺血面積分別為 1.6±0.2、31±10、29±14、12±7、4.7±3.0、4.87±2.7 和 18±9。

由病理圖像分析結(jié)果可知，在缺血1天后，大鼠的腦組織開(kāi)始出現(xiàn)明顯的缺血區(qū)域，而且該部分面積超過(guò)了全腦面積的30%。在缺血0.5小時(shí)后，采用HSYA進(jìn)行治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，C組、D組和E組的缺血面積明顯小于B組，而且和給藥劑量具有密切聯(lián)系。D組和G組比較，大鼠腦缺血的面積差異較小，不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而且E組大鼠的腦缺血面積明顯小于G組（P＜0.05），但和F組無(wú)明顯差異（P＞0.05）。由此可知，HSYA對(duì)于抗腦缺血具有顯著作用。

4 小結(jié)

由本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，在缺血1天后，大鼠的腦組織開(kāi)始出現(xiàn)明顯的缺血區(qū)域，而且該部分面積超過(guò)了全腦面積的30%。使用尼莫地平可以顯著減輕腦缺血損傷，表示線(xiàn)法阻斷大鼠大腦中動(dòng)脈所致局灶性腦缺血模型是成功的。于腦缺血0.5小時(shí)后，HSYA靜脈給藥對(duì)大鼠局灶性腦缺血性損傷有明顯的保護(hù)作用，而且6mg/kgHSYA給藥的作用和尼莫地平作用相當(dāng)。由此可知，紅花有效單體成分HSYA在體內(nèi)和體外均顯示出具有抗腦缺血活性。[3]

（作者單位：解放軍第184醫(yī)院藥械科）

[1]姜華. 羥基紅花黃色素A對(duì)大鼠腦缺血-再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制[J]. 中藥材,2013,03（14）:462-464.

[2]劉永剛,李芳君,湯芳. 羥基紅花黃色素A對(duì)大鼠心肌細(xì)胞缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J]. 中藥藥理與臨床,2015,01（18）:71-74.

[3]徐露,董志. 注射用羥基紅花黃色素A對(duì)大鼠腦神經(jīng)元線(xiàn)粒體的保護(hù)作用研究[J]. 中國(guó)藥房,2012,23（10）:2127-2129.