樊夢(mèng)林， 姜希明， 劉 穎， 劉登科， 王平保*

(1. 天津醫(yī)科大學(xué) 研究生院，天津 300193； 2. 天津藥物研究院有限公司，天津 300193;

3. 天津法莫西醫(yī)藥科技有限公司，天津 300193)

·研究論文·

新型噻吩并四氫吡啶類化合物的合成及其抗血小板聚集活性

樊夢(mèng)林1,2， 姜希明3， 劉 穎2， 劉登科2， 王平保2*

(1. 天津醫(yī)科大學(xué) 研究生院，天津 300193； 2. 天津藥物研究院有限公司，天津 300193;

3. 天津法莫西醫(yī)藥科技有限公司，天津 300193)

噻吩并[3,2-c]四氫吡啶和噻吩并[2,3-c]四氫吡啶分別與取代芐溴(2a～2g)經(jīng)取代反應(yīng)后，用2 mol·L-1氯化氫乙醚溶液成鹽合成了噻吩并四氫吡啶衍生物(3b～3e, 3g和5a～5g)；噻吩并[3,2-c]四氫吡啶酮與取代芐溴經(jīng)取代反應(yīng)，再與乙酸酐縮合，最后經(jīng)2 mol·L-1氯化氫乙醚溶液成鹽合成了噻吩并四氫吡啶衍生物(7d, 7e, 7g～7i)。 3， 5和7均為新化合物，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR 和ESI-MS表征。大鼠體內(nèi)抗血小板聚集活性研究結(jié)果表明：3, 5和7均有一定的抗血小板聚集活性，其中7d, 7h和7i的抑制率分別為66.2%, 86.8%和88.3%，活性優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥噻氯匹啶。

噻吩并四氫吡啶衍生物； 合成； 抗血小板聚集活性; 血栓

血栓是由不同病因和發(fā)病機(jī)制造成的血液異常凝固,發(fā)病率逐年增高,嚴(yán)重危害人類健康。過(guò)去30年間對(duì)抗血栓藥物的研究很大程度上專注于開(kāi)發(fā)具有抗血小板聚集活性的藥物，該類藥物

Scheme 1

主要有噻氯匹啶、氯吡格雷和普拉格雷，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上屬于噻吩并四氫吡啶類化合物，在臨床上發(fā)揮了重要作用[1]。噻氯匹啶自80年代開(kāi)始應(yīng)用于臨床,為一新型強(qiáng)效血小板抑制劑，但噻氯匹啶會(huì)引起一些不良反應(yīng)，包括惡心、中性粒細(xì)胞減少、血小板減少及血小板減少性紫癜(TTP)等不良反應(yīng)，現(xiàn)在正逐漸被氯吡格雷替代[2]。氯吡格雷的藥理作用、適應(yīng)癥與噻氯匹啶類似,但其副作用相對(duì)輕微,引起粒細(xì)胞減少者較為少見(jiàn)。隨著氯吡格雷臨床上廣泛用于治療動(dòng)脈粥狀硬化疾病、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、預(yù)防冠狀動(dòng)脈內(nèi)支架植入術(shù)后支架內(nèi)再狹窄和血栓性并發(fā)癥等，其很多缺點(diǎn)也逐漸暴露，比如出血事件、氯吡格雷抵抗及個(gè)體差異大等[3]。普拉格雷于2009年3月在歐盟上市,用于預(yù)防急性冠脈綜合征,雖然表現(xiàn)出較好的血栓抑制活性,但有出血性風(fēng)險(xiǎn)，致死性出血達(dá)0.4‰[4]，限制了其臨床應(yīng)用。因此尋找高效低不良反應(yīng)的該類藥物是目前研究熱點(diǎn)之一。

本文以噻吩并[3,2-c]四氫吡啶鹽酸鹽(1)和噻吩并[2,3-c]四氫吡啶鹽酸鹽(4)分別與取代芐溴(2a～2g)經(jīng)取代反應(yīng)后，用2 mol·L-1氯化氫乙醚溶液成鹽合成了噻吩并四氫吡啶衍生物(3b～3e, 3g和5a～5g)；噻吩并[3,2-c]四氫吡啶酮(6)依次與取代芐溴(2d, 2e, 2g～2i)經(jīng)取代反應(yīng)，再與乙酸酐縮合，最后經(jīng)2 mol·L-1氯化氫乙醚溶液成鹽合成了噻吩并四氫吡啶衍生物(7d, 7e, 7g～7i)(Scheme 1)。 3， 5和7均為新化合物，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR 和ESI-MS表征。并對(duì)其大鼠體內(nèi)抗血小板聚集活性進(jìn)行了研究。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

YRT-3型熔點(diǎn)儀(溫度未校正)；BRUKERAV400型核磁共振儀(DMSO-d6為溶劑，TMS為內(nèi)標(biāo))；VG ZAB-HS型質(zhì)譜儀；PAM-3型雙通道血小板聚集儀。

所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1) 3b～3e, 3g的合成(以3b為例)

在反應(yīng)瓶中加入1 7.0 g(0.04 mol)和二氯甲烷50 mL，攪拌使其溶解；加入三乙胺9 mL和間氰基芐溴(2b)7.8 g(0.04 mmol),回流(45 ℃)反應(yīng)至終點(diǎn)(TLC監(jiān)測(cè))。依次用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌，用無(wú)水NaSO4干燥，減壓蒸除溶劑,殘余物經(jīng)硅膠柱層析[洗脫劑:A=V(乙酸乙酯) ∶V(石油醚)=1 ∶5]純化得無(wú)色油狀液體，用乙酸乙酯溶解，加入2 mol·L-1氯化氫乙醚溶液5.3 mL調(diào)至pH 5，過(guò)濾，濾餅干燥得白色固體3b 7.65 g。

用類似的方法合成白色固體3c～3e, 3g。

3b: 收率75.3%， m.p.93.2～95.4 ℃;1H NMRδ: 2.25～2.32(t,J=5.6 Hz, 2H), 3.53～3.59(t,J=4.8 Hz, 2H), 4.17(s, 2H), 4.51(s, 2H), 6.87～6.89(d,J=4.3 Hz, 1H), 7.43～7.44(d,J=4.5 Hz, 1H), 7.66～7.70(t,J=8.1 Hz, 1H), 7.93～7.95(d,J=4.6 Hz, 1H), 8.02～8.04(d,J=5.1 Hz, 1H), 8.19(s, 1H); ESI-MSm/z: 281.38{[M+Na]+}。

3c: 收率81.2%， m.p.95.1～96.1 ℃;1H NMRδ: 2.71～2.73(t,J=5.8 Hz, 2H), 2.78～2.79(t,J=4.9 Hz, 2H), 3.45(s, 2H), 3.73(s, 2H), 6.73～6.74(d,J=4.2 Hz, 1H), 7.23～7.24(d,J=4.3 Hz, 1H), 7.53～7.55(d,J=5.1 Hz, 2H), 7.77～7.79(d,J=5.3 Hz, 2H); ESI-MSm/z: 281.38{[M+Na]+}。

3d: 收率83.6%， m.p. 80.1～80.9 ℃;1H NMRδ: 2.63～2.66(t,J=4.7 Hz, 2H), 2.69～2.71(t,J=4.5 Hz, 2H), 3.45(s, 2H), 3.91(s, 2H), 6.73～6.74(d,J=6.1 Hz, 1H), 7.23～7.24(d,J=4.1 Hz, 1H), 7.50～7.54(m, 1H), 7.65～7.67(d,J=4.6 Hz, 2H), 7.86～7.88(d,J=5.3 Hz, 1H); ESI-MSm/z: 297.08{[M+Na]+}。

3e: 收率77.9%， m.p. 204.8～205.6 ℃;1H NMRδ: 2.38(s, 3H), 3.05～3.09(d,J=4.1 Hz, 1H), 3.22～3.26(m, 1H), 3.48～3.50(t,J=4.3 Hz, 1H), 3.61～3.64(d,J=5.3 Hz, 1H), 4.19～4.20(d,J=4.8 Hz, 2H), 4.36～4.49(m, 2H), 6.86～6.88(d,J=4.1 Hz, 1H), 7.22～7.24(m, 1H), 7.25～7.28(m, 1H), 7.30～7.35(d,J=4.3 Hz, 1H), 7.74～7.75(d,J=5.3 Hz, 1H); ESI-MSm/z: 266.38{[M+Na]+}。

3g: 收率85.4%， m.p. 80.1～81.3 ℃;1H NMRδ: 1.74～1.79(q,J=8.3 Hz, 4H), 2.78～2.83(t,J=4.6 Hz, 2H), 3.33～3.37(t,J=4.7 Hz, 2H), 4.01～4.04(m, 1H), 4.73～4.77(m, 1H), 6.88～6.99(d,J=5.3 Hz, 1H), 7.45(s, 4H), 7.72～7.73(d,J=4.5 Hz, 2H); ESI-MSm/z: 266.14{[M+Na]+}。

(2) 5a～5g的合成(以5a為例)

在反應(yīng)瓶中加入4 5.3 g(0.03 mol)和二氯甲烷50 ml，攪拌使其溶解；加入三乙胺9 mL和鄰氰基芐溴(2a)5.9 g(0.03 mol),回流(45 ℃)反應(yīng)至終點(diǎn)(TLC監(jiān)測(cè))。依次用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌，無(wú)水NaSO4干燥，減壓蒸除溶劑后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑:A=1 ∶5)純化得無(wú)色油狀液體，用乙酸乙酯溶解，加入2 mol·L-1氯化氫乙醚溶液5.2 mL調(diào)至pH 5，過(guò)濾，濾餅干燥得白色固體5a 6.07 g。

用類似方法合成白色固體5b～5g。

5a: 收率79.6%, m.p.220.3～222.4 ℃;1H NMRδ: 2.63～2.64(t,J=2.3 Hz, 2H), 2.74～2.76(t,J=4.2 Hz, 3H), 3.65(s, 2H), 3.84(s, 2H), 6.81～6.82(d,J=4.3 Hz, 1H), 7.27～7.28(d,J=4.5 Hz, 1H), 7.28～7.49(m, 1H), 7.60～7.62(d,J=4.1 Hz, 1H), 7.66～7.70(m, 1H), 7.80～7.82(m, 1H); ESI-MSm/z: 281.10{[M+Na]+}。

5b: 收率92.7%， m.p.214.9～215.4 ℃;1H NMRδ: 2.91～2.94(d,J=4.0 Hz, 1H), 3.06(s, 1H), 3.34(s, 1H), 3.65(s, 1H), 4.33(s, 2H), 4.49～4.51(d,J=4.2 Hz, 2H), 6.91～6.92(d,J=4.0 Hz, 2H), 7.47～7.48(d,J=4.0 Hz, 1H), 7.65～7.68(t,J=8.0 Hz, 1H), 7.92～7.94(d,J=8.1 Hz, 1H), 8.01～8.03(d,J=8.3 Hz, 1H), 8.17(s, 1H)； ESI-MSm/z: 281.38{[M+Na]+}。

5c: 收率76.3%， m.p.233.3～234.4 ℃;1H NMRδ: 2.95～2.98(d,J=4.3 Hz, 2H), 3.37～3.70(d,J=4.5 Hz, 1H), 3.61(s, 1H), 4.32(s, 2H), 4.53～4.47(d,J=5.8 Hz, 2H), 6.91～6.92(d,J=4.1 Hz, 1H), 7.48～7.49(d,J=4.5 Hz, 1H), 7.90～7.95(m, 4H); ESI-MSm/z: 281.38{[M+Na]+}。

5d: 收率83.6%， m.p.188.3～188.7 ℃;1H NMRδ: 3.04～3.08(d,J=4.3 Hz, 2H), 3.51～3.54(d,J=4.5 Hz, 1H), 4.03(s, 1H), 4.42(s, 2H), 4.43～4.47(d,J=5.8 Hz, 2H), 6.89～6.92(d,J=4.1 Hz, 1H), 7.43～7.49(d,J=4.5 Hz, 1H), 7.65～7.85(m, 4H); ESI-MSm/z: 278.37{[M+Na]+}。

5e: 收率92.8%， m.p.164.1～165.5 ℃;1H NMRδ: 2.41(s, 3H), 2.92～2.96(d,J=4.6 Hz, 1H), 3.04～3.10(q,J=8.1 Hz, 1H), 3.44～3.47(d,J=4.3 Hz, 1H), 3.58(s, 1H), 4.40～4.51(m, 4H), 6.92～6.93(d,J=5.1 Hz, 1H), 7.25～7.29(t,J=4.8 Hz, 1H), 7.32～7.36(t,J=5.1 Hz, 1H), 7.48～7.49(d,J=4.2 Hz, 1H), 7.73～7.74(d,J=4.5 Hz, 1H); ESI-MSm/z: 247.14{[M+Na]+}。

5f: 收率88.7%， m.p.159.6～160.7 ℃;1H NMRδ: 1.74～1.80(q,J=8.3 Hz, 3H), 2.98～3.04(m, 2H), 3.34～3.41(d,J=6.7 Hz, 2H), 3.92～3.95(m, 1H), 4.55～4.60(m, 1H), 6.77～6.79(d,J=5.3 Hz, 1H), 6.91～6.93(d,J=4.7 Hz, 1H), 7.38～7.40(d,J=5.3 Hz, 1H), 7.42(s, 2H), 7.68～7.72(q,J=7.3 Hz, 2H); ESI-MSm/z: 301.11{[M+Na]+}。

5g: 收率80.9%, m.p.157.2～159.0 ℃;1H NMRδ: 2.94～2.97(q,J=5.6 Hz, 3H), 3.01(s, 3H), 3.25～3.28(t,J=5.6 Hz, 2H), 3.33～3.36(t,J=4.8 Hz, 2H), 3.83(m, 1H), 3.94(q,J=5.6 Hz, 1H), 6.41(s, 1H), 6.46(s, 1H), 7.67～7.72(m, 5H); ESI-MSm/z: 266.14{[M+Na]+}。

(3) 7d, 7e, 7g～7i的合成(以7d為例)

在反應(yīng)瓶中加入6 5.8 g(0.03 mol)和二氯甲烷50 mL，攪拌使其溶解；加入三乙胺9 mL和鄰硝基芐溴(2d)6.5 g(0.03 mol),回流(45 ℃)反應(yīng)至終點(diǎn)(TLC監(jiān)測(cè))。攪拌下于-5 ℃緩慢滴加乙酸酐3 mL，滴畢，反應(yīng)3 h(TLC監(jiān)測(cè))。依次用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌，用無(wú)水NaSO4干燥，減壓蒸除溶劑后經(jīng)硅膠柱層析(洗脫劑:A=1 ∶5)純化得黃色油狀物，用乙酸乙酯溶解，加入2 mol·L-1氯化氫乙醚溶液5.7 mL調(diào)至pH 5，過(guò)濾，濾餅干燥得黃色固體7d 7.39 g。

用類似的方法合成黃色固體7e, 7g～7i。

7d: 收率85.2%， m.p.186.3～187.1 ℃;1H NMRδ: 2.28(s, 3H), 3.11～3.13(t,J=4.9 Hz, 2H), 3.55～3.58(t,J=6.1 Hz, 2H), 4.27(s, 2H), 4.77(s, 2H), 6.59(s, 1H), 7.75～7.78(t,J=5.3 Hz, 1H), 7.85～7.89(t,J=4.5 Hz, 1H), 8.05～8.07(d,J=4.6 Hz, 1H), 8.23～8.24(d,J=4.1 Hz, 1H); ESI-MSm/z: 361.39{[M+Na]+}。

7e: 收率93.6%， m.p.83.6～85.7 ℃;1H NMRδ: 2.25(s, 3H), 2.39(s, 3H), 2.94 ～2.99(d,J=7.2 Hz, 1H), 3.16～3.17(d,J=5.3 Hz, 1H), 3.48(s, 1H), 3.61(s, 1H), 3.98～3.99(d,J=6.2 Hz, 2H), 4.40～4.46(d,J=5.3 Hz, 2H), 6.56(s, 1H), 7.24～7.26(d,J=5.6 Hz, 2H), 7.29～7.30(d,J=5.7 Hz, 1H), 7.72～7.74(d,J=7.3 Hz, 1H); ESI-MSm/z: 330.16{[M+Na]+}。

7g: 收率86.4%, m.p.93.4～93.6 ℃;1H NMRδ: 3.11～3.18(d,J=4.3 Hz, 2H), 3.57～3.59(d,J=4.5 Hz, 1H), 4.06(s, 1H), 4.52(s, 2H), 4.51～4.54(d,J=5.8 Hz, 2H), 6.89～6.95(d,J=4.1 Hz, 1H), 7.53～7.59(d,J=4.5 Hz, 1H), 7.75～7.79(m, 4H); ESI-MSm/z: 330.16{[M+Na]+}。

7h: 收率84.7%， m.p.169.7～170.2 ℃;1H NMRδ: 2.08(s, 1H), 2.26(s, 3H), 2.78～2.80(t,J=4.8 Hz, 2H), 2.84～2.86(t,J=4.3 Hz, 2H), 3.49(s, 2H), 3.83(s, 2H), 6.31(s, 1H), 7.51～7.53(d,J=5.3 Hz, 1H), 7.67～7.69(d,J=5.8 Hz, 1H), 7.77～7.78(d,J=6.1 Hz, 1H); ESI-MSm/z: 413.00{[M+Na]+}。

7i: 收率88.9%， m.p.164.3～164.9 ℃;1H NMRδ: 2.21(s, 1H), 2.42(s, 3H), 2.79～2.81(t,J=4.8 Hz, 2H), 2.92～2.96(t,J=4.3 Hz, 2H), 3.6(s, 2H), 3.91(s, 2H), 6.52(s, 1H), 7.52～7.55(d,J=5.3 Hz, 1H), 7.71～7.74(d,J=5.8 Hz, 1H), 7.81～7.84 (d,J=6.1 Hz, 1H); ESI-MSm/z: 413.00{[M+Na]+}。

1.3 藥理實(shí)驗(yàn)

選用健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分組，實(shí)驗(yàn)設(shè)正常對(duì)照組和受試樣品組，每組6只，給藥量為30 mg·kg-1，給藥容積為10 mL·kg-1·bw-1，正常對(duì)照組給予等量0.5%羧甲基纖維素鈉，給藥2 h后，腹腔注射40 mg·kg-1戊巴比妥鈉(1 mL·kg-1)麻醉，腹主動(dòng)脈采血，用3.8%枸櫞酸鈉抗凝，分別制備富血小板血漿(PRP)和貧血小板血漿(PPP)，在CHRONO-LOG血小板聚集儀測(cè)定ADP(終濃度：1.25 μmol·L-1)誘導(dǎo)的血小板最大聚集百分率，計(jì)算抑制率。

2 結(jié)果與討論

2.1 合成

在3, 5和7的合成中，成鹽反應(yīng)時(shí)溶劑的選擇至關(guān)重要。它們的游離堿為油狀物,遇光不穩(wěn)定,成鹽后為固體,具有良好的穩(wěn)定性。成鹽時(shí)如選用乙醇或丙酮等強(qiáng)極性溶劑，滴加鹽酸乙醇溶液后所得產(chǎn)物發(fā)黏,質(zhì)量較差,用乙酸乙酯作為溶劑并且滴加鹽酸乙醚,可以獲得純度較高、松散的白色固體。

2.2 抗血小板聚集活性

3, 5和7的抗血小板聚集活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)，3的抗血小板聚集活性優(yōu)于5，即噻吩并[3,2-c]四氫吡啶類化合物的活性優(yōu)于噻吩并[2,3-c]四氫吡啶類化合物；當(dāng)鄰位有吸電子基團(tuán)時(shí)如硝基、氰基時(shí)(7d, 7h和7i),化合物均有明顯抗血小板聚集作用，抑制率分別為66.2%， 86.8%和88.3%。其活性活性明顯優(yōu)于3和5及陽(yáng)性對(duì)照藥噻氯匹啶，其詳細(xì)的藥效機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

3 結(jié)論

在前期研究的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)并合成了17個(gè)新型的噻吩并四氫吡啶類化合物。大鼠體內(nèi)抗血小板聚集活性研究結(jié)果表明：7d, 7h和7i的活性優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥噻氯匹啶，具有進(jìn)一步的研究?jī)r(jià)值。

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Synthesis and Anti-platelet Aggregation Activities of Novel Thienopyridine Derivatives

FAN Meng-lin1,2, JIANG Xi-ming3, LIU Ying2, LIU Deng-ke2, WANG Ping-bao2*

(1. Graduate School, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China; 2. Tianjin Institute of Pharmaceutical Limited Co.,Ltd., Tianjin 300193, China; 3. Tianjin Pharmacn Medical Technology Limited Company, Tianjin 300193, China)

Novel thienopyridine derivatives(3b～3e, 3g and 5a～5g) were synthesized by substitution reaction of tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine or tetrahydrothieno[2,3-c]pyridine with substituted benzyl bromides, and salt forming reaction with ethereal hydrochloric acid. Novel thienopyridine derivatives(7d, 7e, 7g～7i) were synthesized by substitution reaction of tetrahydrothieno[3,2-c]pyridone with substituted benzyl bromides, and condensation with acetic anhydride, then salt forming with 2 mol·L-1ethereal hydrochloric acid. The structures were characterized by1H NMR and ESI-MS. The results in platelet aggregation inhibition testsinvivoshowed that the compounds exhibited certain activities, 7d, 7h and 7i showed better activities than the positive control drug ticlopidine, and the inhibitory rate were 66.2%, 86.8% and 88.3%, respectively.

thienopyridine derivative; synthesis; anti-platelet aggregation; thrombus

2015-11-30

國(guó)家科技重大專項(xiàng)“重大新藥創(chuàng)制”課題(2013ZX09102014)

樊夢(mèng)林(1991-)，男，漢族，河南南陽(yáng)人，碩士研究生，主要從事藥物的設(shè)計(jì)與合成的研究。E-mail: fanxingrenshi@163.com

王平保，研究員， Tel. 022-23006864, E-mail: wangpb@tjipr.com

O626; O621.3

A

10.15952/j.cnki.cjsc.1005-1511.2016.04.15393