廣圣芳，孫 磊，劉選仁

·檢驗醫(yī)學(xué)·

室內(nèi)質(zhì)控正常值血漿的制備與應(yīng)用評價

廣圣芳，孫 磊，劉選仁

目的：探討室內(nèi)質(zhì)控正常值血漿的制備及應(yīng)用。方法：自制正常值質(zhì)控血漿，應(yīng)用法國生產(chǎn)的Stago compact型全自動血凝儀，進行凝血四項測定。結(jié)果：自制質(zhì)控血漿作為室內(nèi)正常值質(zhì)控品，效果滿意，且在-20 ℃冰箱可穩(wěn)定保存4個月。結(jié)論：自制正常值質(zhì)控血漿完全能代替原裝進口正常水平質(zhì)控物作為室內(nèi)質(zhì)控品。

凝血檢驗；室內(nèi)質(zhì)控；質(zhì)控范圍

隨著臨床診斷技術(shù)及臨床需求的發(fā)展，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗分工逐漸細(xì)化，止血、凝血功能的檢查與傳統(tǒng)的檢驗“三大常規(guī)”共同成為醫(yī)學(xué)檢驗的常規(guī)檢測項目。凝血四項，即活化部分凝血活酶時間(APTT)、凝血酶原時間(PT)、凝血酶時間(TT)和纖維蛋白原(FIB)，成為手術(shù)前、臨床監(jiān)測抗凝治療和血栓性、出血性疾病等的必須檢查項目之一。隨著人們生活方式的變化和人口老齡化，血栓栓塞性疾病發(fā)病率逐年增加，檢驗科傳統(tǒng)的手工凝血實驗也逐漸被高效率、標(biāo)準(zhǔn)化的全自動血凝儀檢測所替代。血凝儀的使用，不僅使得凝血項目的檢測日趨簡便，檢測結(jié)果愈加精密與準(zhǔn)確[1]，更有利于不同實驗室間凝血檢測結(jié)果的互認(rèn)[2]。但目前我國很多醫(yī)院使用的血凝儀均為進口儀器，其質(zhì)控品也是配套的進口凍干試劑，價格昂貴，這大大增加了檢驗科的成本支出。因此，我們結(jié)合工作實際，利用正常人的凝血檢測標(biāo)本自制凝血四項室內(nèi)正常值質(zhì)控血漿(N值),作為Stago Compact型全自動血凝儀(法國Stago公司)的室內(nèi)正常值質(zhì)控品，取得較好效果，現(xiàn)將其制備、應(yīng)用情況及穩(wěn)定性作一報道。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑 Stago Compact全自動血凝儀，測定所用的反應(yīng)杯、試劑等均為Stago公司原裝進口。枸櫞酸鈉抗凝管購于河南瑞峰醫(yī)療科技有限公司。

1.2 標(biāo)本來源 標(biāo)本取自2014年12月我院在職職工健康體檢人員，清晨空腹抽取靜脈血1.8 mL于藍(lán)色的抗凝管內(nèi)，迅速混勻，3 000 r/min離心10 min，待檢。

1.3 質(zhì)控血漿的制備 選取凝血檢驗結(jié)果正常的血漿標(biāo)本60份(除去溶血、脂血、黃疸、渾濁者)，收集若干于50 mL潔凈離心管中,充分混勻,2 000 r/min離心10 min,將上清液轉(zhuǎn)移至潔凈的大燒杯中，加入5 g/L疊氮鈉防腐,取其中5 mL用于定值，剩余血漿用0.5 mL離心管分裝，每支約0.3 mL，立即用封口膜封口，標(biāo)注批號(201412N)，置于-20 ℃冰箱冷凍保存。整個過程在4 h內(nèi)完成。

1.5 自制質(zhì)控血漿201412N的質(zhì)控效果及穩(wěn)定性考察 每天從-20 ℃冰箱中取1支質(zhì)控品，置37 ℃水浴，復(fù)溶后和日常標(biāo)本一起測定凝血四項。(1)質(zhì)控效果觀察：自制質(zhì)控血漿201412N和Stago原裝進口質(zhì)控血漿(12351)共同連續(xù)測定1個月,比較2種質(zhì)控品檢測結(jié)果。(2)穩(wěn)定性觀察：以自制質(zhì)控血漿201412N的第1個月作為基準(zhǔn),比較以后每月與第1個月的差異,觀察自制質(zhì)控血漿201412N的穩(wěn)定性，連續(xù)測定5個月。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 自制質(zhì)控血漿的定值及質(zhì)控范圍 自制質(zhì)控血漿201412N的定值結(jié)果及質(zhì)控范圍見表1。

表1 自制質(zhì)控血漿201412N的定值結(jié)果及質(zhì)控范圍

2.2 自制質(zhì)控血漿與進口質(zhì)控品測定結(jié)果比較 連續(xù)測定1個月結(jié)果顯示,自制質(zhì)控血漿(201412N)與Stago原裝進口質(zhì)控血漿(12351)的測定結(jié)果基本一致,兩者4項指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(見表2)。

表2 2種質(zhì)控品測定結(jié)果比較(ni=26；

2.3 自制質(zhì)控血漿的穩(wěn)定性 連續(xù)觀察5個月，自制質(zhì)控血漿(201412N)于第1～4個月的檢測結(jié)果均較穩(wěn)定，且每個月的CV%值均<5%，但第5個月FIB、TT的CV%值均>5%。自制質(zhì)控血漿在4個月內(nèi)具有可接受的穩(wěn)定性(見表3)。

3 討論

質(zhì)量控制是確保實驗結(jié)果準(zhǔn)確性的重要措施之一，室內(nèi)質(zhì)控血漿則是開展室內(nèi)質(zhì)控，評價儀器、試劑、試驗環(huán)境等檢測系統(tǒng)可靠性的物質(zhì)基礎(chǔ)[3]。鑒于凝血項目的檢驗易受某些因素如實驗條件、溫度、濕度等環(huán)境因素的干擾,室內(nèi)質(zhì)控更是出凝血常規(guī)檢測結(jié)果準(zhǔn)確判斷的保證。但商品化的進口質(zhì)控品不僅價格昂貴，而且效期短，不能反復(fù)凍融[4]，給室內(nèi)質(zhì)控工作帶來了困難。出于檢驗科質(zhì)量控制和經(jīng)濟利益的綜合考慮，凝血質(zhì)控物的研制在國內(nèi)實驗室廣泛開展[5-6]。

表3 自制質(zhì)控血漿穩(wěn)定性結(jié)果±s)

我室自制質(zhì)控品采用小量分裝的方法進行保存以避免反復(fù)凍融對凝血因子產(chǎn)生不良影響。自制質(zhì)控血漿在健康檢查人群中容易得到，通過1年多的實驗及應(yīng)用，結(jié)果表明：我室自制質(zhì)控血漿(201412N)與Stago原裝進口質(zhì)控血漿(12351)的測定中4項指標(biāo)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；且連續(xù)觀察5個月，自制質(zhì)控血漿(201412N)于第1～4個月的檢測結(jié)果均較穩(wěn)定，每個月的CV%值均<5%，但第5個月FIB、TT的CV%值均>5%。提示我室制備正常值質(zhì)控血漿在-20 ℃條件下,保存4個月，其穩(wěn)定性良好，符合室內(nèi)質(zhì)控物的要求，可以取代商品質(zhì)控品在實驗室內(nèi)使用。

在研制室內(nèi)質(zhì)控品的過程中，我們認(rèn)為合格的標(biāo)本是制備室內(nèi)質(zhì)控血漿的關(guān)鍵，包括采血人數(shù)、采血時間、止血帶的使用、采血順利與否、標(biāo)本及抗凝劑的量等。其次，質(zhì)控血漿的保存條件必須是-20 ℃，使用前37 ℃水浴快速融化，切忌反復(fù)凍融。再者，分裝前應(yīng)充分混勻,防止產(chǎn)生氣泡,從而減少管間誤差。

[1] 楊學(xué)義,劉家秀.APTT測定中國產(chǎn)與進口試劑的比較[J].中國醫(yī)療前沿,2009,4(21):67.

[2] 姜青龍,曾黎峰,萬本愿,等.血液和凝血部分檢驗項目室內(nèi)質(zhì)控數(shù)據(jù)的室間比對研究 [J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2014,32(2):167.

[3] 王蘊端,王晶晶,何桂兒.新鮮冰凍血漿用于凝血功能檢驗室內(nèi)質(zhì)控的探討[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(10):1265.

[4] 靳巖,李艷蓮,張鳳華,等.自制正常范圍質(zhì)控品用于CA血凝儀室內(nèi)質(zhì)控[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2010,32(1):97.

[5] 孔立新,張道杰,孫黎,等.凝血檢驗室內(nèi)質(zhì)控血漿的制備與評估[J].臨床檢驗雜志,2006,24(2):146.

[6] 邱麗君,李瑞賢,許穎彬,等.自制混合血漿作幾項血凝室內(nèi)質(zhì)控物的分析[J].中國實用醫(yī)藥,2008,3(1):54.

(本文編輯 盧玉清)

2016-01-20

安徽醫(yī)科大學(xué)附屬六安醫(yī)院，安徽省六安市人民醫(yī)院 檢驗科，237005

廣圣芳(1974-)，女，副主任檢驗技師.

1000-2200(2016)12-1684-02

R 446.1

A

10.13898/j.cnki.issn.1000-2200.2016.12.047