徐 芬，羅 潔，徐 鈿，吳 劍

(江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，江西上饒，334000)

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·個案與短篇·

EDTA依賴性假性血小板減少癥1例及實驗室解決思路

徐 芬，羅 潔，徐 鈿，吳 劍

(江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校，江西上饒，334000)

乙二胺四乙酸； 依賴性假性血小板減少； 血小板聚集； 丁胺卡那霉素

對某校2015級1 224例新生進(jìn)行入學(xué)體檢，用全自動血細(xì)胞分析儀進(jìn)行全血細(xì)胞計數(shù)，發(fā)現(xiàn)1例出現(xiàn)乙二胺四乙酸(EDTA)依賴性假性血小板減少。國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)推薦使用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)作為全自動血細(xì)胞分析儀的抗凝劑，濃度為1.4～1.6 mg/mL血。EDTA 依賴性假性血小板減少是一種在EDTA鹽作用下發(fā)生的一種免疫介導(dǎo)的血小板聚集[1-2]。這一現(xiàn)象的發(fā)生率很低，據(jù)國外文獻(xiàn)報道，發(fā)生率為0.09%～0.21%[3]。然而這一現(xiàn)象常被臨床科室和檢驗科忽略，造成對疾病的誤診或延緩對病情的診治，給患者心理、生理造成巨大影響和經(jīng)濟上的負(fù)擔(dān)?，F(xiàn)以本次體檢中發(fā)現(xiàn)的1例EDTA依賴性假性血小板減少癥標(biāo)本為例，對其實驗室解決思路做一探討。

1 臨床資料

王某，女，18歲，新生入學(xué)后常規(guī)體檢。全身體格檢查無異常，無皮膚、黏膜出血，心肺功能正常，肝腎功能、血糖、電解質(zhì)均無異常。血常規(guī)：白細(xì)胞5.62×109/L，紅細(xì)胞4.58×1012/L，血紅蛋白134 g/L，血小板37×109/L，重復(fù)2次(不同時間)血小板結(jié)果維持在(30～45)×109/L。

2 解決思路

2.1 排除血小板消耗性減少的可能 更換標(biāo)本，按照國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會推薦方法重新采集被檢者EDTA抗凝肘靜脈血 2 mL，排除之前標(biāo)本因采集過程不當(dāng)引起的血液部分凝固造成的血小板消耗性減少。血液標(biāo)本于采血后即刻，15、30、60 min 4個時間段重復(fù)測定，并同時推張血涂片做瑞氏染色后鏡檢。結(jié)果：4個不同時間段血小板分別為145×109/L、95×109/L、48×109/L、40×109/L；油鏡下4張片子出現(xiàn)情況依次為血小板散在可見、部分血小板出現(xiàn)聚集(5～10個聚集在一起)、大量血小板聚集(10個以上聚集成團)、大量血小板聚集(周邊及尾部多見)。結(jié)論：除外由血液凝固導(dǎo)致的消耗性血小板減少，符合EDTA 依賴性假性血小板減少癥。

2.2 實驗室解決方法

2.2.1 更換抗凝劑 采用109 mmol/L枸櫞酸鈉0.2 mL抗凝1.8 mL靜脈血(V∶V=1∶9)，血液標(biāo)本于采血后即刻，15、30、60 min 4個時間段重復(fù)測定，并同時推張血涂片做瑞氏染色后鏡檢。結(jié)果：4個不同時間段血小板分別為151×109/L、156×109/L、143×109/L、150×109/L；油鏡下4張片子出現(xiàn)情況均為血小板散在可見。

2.2.2 即采即做 在實驗室采未抗凝的靜脈血，即刻上儀器做。結(jié)果：血小板為152×109/L。

2.2.3 在EDTA抗凝管中加入丁胺卡那霉素 丁胺卡那霉素對EDTA-K2抗凝劑引起的血小板聚集有解離作用[4-6]。5 mg/mL的丁胺卡那霉素能使患者血小板數(shù)在4 h內(nèi)保持穩(wěn)定[7]。常規(guī)EDTA抗凝管中加入5 mg/mL的丁胺卡那霉素抗凝2 mL全血，于采血后即刻，15、30、60 min 4個時間段重復(fù)測定，并同時推張血涂片做瑞氏染色后鏡檢。結(jié)果：4個不同時間段白細(xì)胞分別為147×109/L、151×109/L、156×109/L、145×109/L；油鏡下4張片子出現(xiàn)情況均為血小板散在可見。

2.2.4 手工計數(shù) 取未抗凝血標(biāo)本20 μL，用草酸胺按1∶19比例稀釋標(biāo)本，按全國臨床檢驗操作規(guī)程(3版)[4]進(jìn)行手工法計數(shù)血小板，重復(fù)計數(shù)2次，取平均值。結(jié)果：血小板均值為158×109/L。

3 討 論

依賴性假性血小板減少癥是在EDTA誘導(dǎo)下發(fā)生的血小板聚集和衛(wèi)星現(xiàn)象，用全自動血細(xì)胞分析儀計數(shù)時，發(fā)生的血小板數(shù)值假性減少。該現(xiàn)象的發(fā)生率很低，國外文獻(xiàn)報道的發(fā)生率為0.09%～0.21%[3]。EDTA依賴的血小板計數(shù)假性減少的病理原因，到目前為止并不是特別清楚。有研究表明，EDTA導(dǎo)致的血小板假性減少的原因，是血小板在抗凝劑EDTA誘導(dǎo)下活化，血小板表面存在某種隱匿性抗原暴露，與存在于血漿中的自身抗體結(jié)合[8]。Bragnai等[9]指出，活化后的血小板釋放花生四烯酸、5-羥色胺(HT)、膠原、凝血酶原、內(nèi)源性鈣離子等活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)又能活化血小板纖維蛋白原受體，促使血小板與纖維蛋白原聚集成團，出現(xiàn)使血小板互相凝集的現(xiàn)象。

在血細(xì)胞分析儀日益普及的今天，很多基本的手工檢驗方法已被自動化儀器所取代，檢驗人員已過多地依賴儀器的檢測。在檢驗工作中，對血細(xì)胞分析儀做出的血小板數(shù)值降低的審核方式，往往都是將原標(biāo)本復(fù)查或重新抽血復(fù)查后便報告結(jié)果，而復(fù)查結(jié)果沒有多大變化，忽視了血小板假性減少的可能性，造成對疾病的誤診或延緩對病情的診治。因此，檢驗人員在日常工作中要具有防范依賴性假性血小板減少癥發(fā)生的措施，當(dāng)遇到血小板計數(shù)嚴(yán)重減少、與臨床病情不符者，應(yīng)及時和臨床醫(yī)生溝通，排除干擾因素，選擇上述可行的實驗方法復(fù)查血小板，為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實驗數(shù)據(jù)。雖有文獻(xiàn)[10]認(rèn)為，枸櫞酸鈉抗凝血做血小板計數(shù)和手工血小板計數(shù)結(jié)果有一定差異，不能作為最后結(jié)果報告給臨床，但該法仍是排除依賴性假性血小板減少癥的一種快捷可行方法之一。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.24.065

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1673-4130(2016)24-3526-02

2016-07-18

2016-09-26)