權(quán)彤彤 王海英 劉 斌 楊潞溪 樂樹澤

(1.解放軍昆明總醫(yī)院北較場分院傳染結(jié)核科，云南 昆明 650232；2.解放軍昆明療養(yǎng)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650200)

阿爾茨海默病患者尿中阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白含量的變化

權(quán)彤彤1王海英2劉 斌1楊潞溪1樂樹澤1

(1.解放軍昆明總醫(yī)院北較場分院傳染結(jié)核科，云南 昆明 650232；2.解放軍昆明療養(yǎng)院檢驗(yàn)科，云南 昆明 650200)

阿爾茨海默病( Alzheimer's disease，AD)又稱原發(fā)性老年癡呆癥，其病因迄今不明，目前診斷主要靠患者病史、癥狀、神經(jīng)心理學(xué)測試并排除其他類型癡呆等，只有待患者死后病理尸檢這一金標(biāo)準(zhǔn)確診。研究表明，AD患者的神經(jīng)元纖維纏結(jié)（NFTs）中存在大量阿爾茨海默病相關(guān)神經(jīng)絲蛋白（AD7c-NTP）[1]。我們觀察了50例AD患者尿AD7c-NTP水平的變化，報(bào)告如下。

1 病例與方法

1.1 病例 2007年1月-2016年3月在我院神經(jīng)內(nèi)科住院治療的AD患者50例，入選病例均符合美國國立神經(jīng)病學(xué)、語言功能障礙和和中風(fēng)研究所（NIHCDS-ADR-DA）AD診斷標(biāo)準(zhǔn)[2-3]（血壓、心電圖、血常規(guī)、血糖及血脂等是否正常未作篩選）；50例AD患者中男30例,女20例；年齡58～89歲，平均（70.5±5.8）歲。 對照組為同期在我院行健康查體的人群中專門篩查出的智能檢查均正常，無心腦血管疾病，血壓、心電圖、血常規(guī)、血糖及血脂均在正常范圍，無神經(jīng)系統(tǒng)和其他疾病200例中老年人；對照組中男120例,女80例；年齡50～80歲，平均（65.2 ± 6.9） 歲。兩組性別、年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 標(biāo)本采集與檢測 留取晨尿的中段尿50～100 ml，混勻，肉眼觀察，渾濁和尿色深的標(biāo)本棄除。50例AD患者所留尿液標(biāo)本均符合采集要求，離心5～10 min后，取上清液以專用試管于2～8 ℃冰箱密封保存（保存不超過1周）備用。AD7c-NTP含量測定采用ELISA方法，采用KHBST-360酶標(biāo)儀（上海科華公司）和AD7c-NTP ELISA檢測試劑盒（深圳安群公司）進(jìn)行檢測，按試劑盒說明書操作。結(jié)果判定：AD7c-NTP含量≥2.0 ng/mL判定為陽性，陽性結(jié)果重復(fù)檢測3次，取平均值；若3次檢測結(jié)果差異過大則重新留取標(biāo)本復(fù)檢。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 13.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

AD組尿AD7c-NTP陽性43例（86%），陰性7例（14%）；對照組中尿AD7c-NTP陽性20例（10%），陰性180例（90%）；兩組陽性率比較，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=22.3，P＜0.01)。AD組尿AD7c-NTP含量為（2.04±0.14）ng/mL，對照組尿AD7c-NTP含量為（1.22±0.90）ng/mL，兩組尿AD7c-NTP含量比較，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01)。

3 討 論

AD是發(fā)生于老年和老年前期、以進(jìn)行性認(rèn)知功能障礙和行為損害為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，臨床上表現(xiàn)為記憶障礙、失語、失用、失認(rèn)、視空間能力損害、抽象思維和計(jì)算力損害、人格和行為改變等，是老年期癡呆的最常見類型，嚴(yán)重危害老年人身心健康[4]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，≥65歲的老年人約有5%患有AD，隨著年齡的增長，患病率逐漸上升，至85 歲，每3～5 名老年人中就有1名罹患AD[3]。隨著社會老齡化進(jìn)程的加速，AD已成為嚴(yán)重威脅人類生命健康的疾病，并給家庭和社會帶來沉重負(fù)擔(dān)[5]。早期診斷、早期防治是目前提高AD患者生活質(zhì)量的唯一途徑。AD7c-NTP由腦神經(jīng)元表達(dá)，與NFTs共同定位于神經(jīng)細(xì)胞發(fā)生的軸突。在AD神經(jīng)元退行性變過程中，AD7c-NTP表達(dá)是早期事件，其發(fā)生在NFTs形成之前，即可在沒有NFTs的神經(jīng)元中發(fā)現(xiàn)AD7c-NTP表達(dá)，AD7c-NTP在AD患者的腦脊液和尿液中存在，且隨著病程的延長，含量逐漸升高，與癡呆程度成正相關(guān)[6]。

本研究以中老年人為研究對象，對尿液AD7c-NTP含量進(jìn)行檢測，結(jié)果表明，AD患者尿中AD7c-NTP含量較同齡非AD患者明顯升高； AD患者尿AD7c-NTP陽性率較非AD人群明顯升高。提示中老年人尿AD7c-NTP含量變化對AD診斷有重要意義。研究顯示，一些藥物如姜黃素可降低小鼠尿液中AD7c-NTP含量，推測AD患者使用姜黃素可能會降低尿液中AD7c-NTP含量，延緩AD的進(jìn)展[7]。

在目前的檢測技術(shù)下，影響尿AD7c-NTP含量檢測結(jié)果的主要因素是未按要求留取標(biāo)本和檢測的操作方法。本檢測為無創(chuàng)性，標(biāo)本留取方便，易被中老年患者接受；所需時(shí)間較短，一般2～3h即可報(bào)告結(jié)果；且ELISA檢測方法可操作性強(qiáng)、簡單、方便，易于在基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室開展，是目前早期發(fā)現(xiàn)和診斷AD的一種有效方法。但未按要求留取標(biāo)本和檢測的操作方法不規(guī)范會影響到檢測結(jié)果，因而在實(shí)際工作中需要引起注意。

［1］Honjo K,Black SE,Verhoeff NP.Alzheimer's disease,cerebrovascular disease,and theβ-amyloid cascade[J].Can J Neurol Sci,2012,39:712-728.

［2］Dubois B,Feldman HH,Jacova Cl.Research criteriafor the diagnosis of Alzheimer' s disease :revising the NINCDS-ADRDA criteria[J].Lancet Neurology,2007,6(8):734-746

［3］龐傳武. 阿爾茨海默病的診斷與治療[J]. 社區(qū)醫(yī)學(xué)雜志,2013 , 11(19) :82-84

［4］廖玨，廖新品. 阿爾茨海默病的研究現(xiàn)狀[J]. 黑龍江醫(yī)學(xué),2012,36(1):16-18

［5］但秀娟，王曉京，苑萍.老年期癡呆患者衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)狀況分析[J].感染、炎癥、修復(fù)，2016，17（2）：106-108.

［6］王蓉，姬志娟，盛樹立. 阿爾茨海默病尿神經(jīng)絲蛋白方法的建立及其臨床意義[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2010，33（1）：46-50

［7］李瑞晟，李勇，王虹，任映，朱志慧，孫海蕓，楊金鐸，王蓬文.動(dòng)態(tài)觀察姜黃素對APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠尿液AD7c-NTP濃度的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2010，18（5）：406-409

2016-04-22)

10. 3969/j. issn. 1672-8521. 2016. 03. 007