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        Weel蛋白在鼻咽癌組織中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系

        2016-03-09 13:25:38霍占江李偉高飛
        海南醫(yī)學(xué) 2016年3期
        關(guān)鍵詞:鼻咽癌陽(yáng)性率陽(yáng)性

        霍占江,李偉,高飛

        (1.張家口市第一醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科,河北 張家口 075061;2.中國(guó)人民解放軍251醫(yī)院病理科,河北 張家口 075000;3.中國(guó)人民解放軍251醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科,河北 張家口 075000)

        Weel蛋白在鼻咽癌組織中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系

        霍占江1,李偉2,高飛3

        (1.張家口市第一醫(yī)院耳鼻咽喉頭頸外科,河北 張家口 075061;2.中國(guó)人民解放軍251醫(yī)院病理科,河北 張家口 075000;3.中國(guó)人民解放軍251醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科,河北 張家口 075000)

        目的 探討Wee1蛋白在鼻咽癌組織中的表達(dá)及其與臨床預(yù)后的關(guān)系。方法收集2005年1月至2010年12月期間在張家口市第一人民醫(yī)院和中國(guó)人民解放軍251醫(yī)院耳鼻喉科住院患者70例,手術(shù)病理活檢均明確診斷為鼻咽癌,應(yīng)用免疫組織化學(xué)(EnVisionTM)法檢測(cè)其Wee1蛋白表達(dá),并與30例正常組織的表達(dá)進(jìn)行比較,同時(shí)分析Weel蛋白的表達(dá)與鼻咽癌臨床病理因素的關(guān)系及其5年生存率。結(jié)果Wee1蛋白在鼻咽癌組織、正常組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為52.86%(37/70)、10.00%(3/30),兩組的陽(yáng)性表達(dá)率比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01);Wee1蛋白的陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)?quán)徑M織及EBV感染有關(guān)(P>0.05),與性別、年齡、組織學(xué)類型及腫瘤部位無(wú)關(guān)(P>0.05);Wee1蛋白陽(yáng)性表達(dá)的鼻咽癌患者5年生存率為35.14%(13/37),明顯低于Wee1蛋白陰性表達(dá)的81.82%(27/33),兩組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)。結(jié)論Wee1蛋白的異常表達(dá)不僅參與了鼻咽癌的發(fā)生,而且有利于癌細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移,對(duì)預(yù)測(cè)患者的生存預(yù)后也有參考價(jià)值。

        鼻咽癌;Wee1蛋白;生存;預(yù)后

        鼻咽癌是鼻咽部黏膜發(fā)生的癌變,在光鏡和超微結(jié)構(gòu)中被證實(shí)具有鱗狀上皮分化,其包括鱗狀細(xì)胞癌、非角化性癌(分化型或未分化型)和基底樣鱗狀細(xì)胞癌,而腺癌和涎腺型癌除外[1]。目前,鼻咽癌發(fā)病病因還未完全闡明,但認(rèn)為其與EB病毒感染、化學(xué)致癌物質(zhì)及遺傳因素等有關(guān)。上述一種或多種因素的刺激下,細(xì)胞結(jié)構(gòu)或功能發(fā)生改變,導(dǎo)致細(xì)胞增殖凋亡失衡,進(jìn)而引起腫瘤的形成。細(xì)胞的增殖或凋亡與細(xì)胞周期的轉(zhuǎn)變有關(guān),而Wee1蛋白在細(xì)胞周期轉(zhuǎn)變中具有重要的調(diào)節(jié)作用。本實(shí)驗(yàn)主要探討Wee1蛋白在鼻咽癌形成中的作用及與病理參數(shù)之間的關(guān)系,同時(shí)分析其對(duì)患者5年生存預(yù)后的影響。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 收集2005年1月至2010年12月期間在張家口市第一人民醫(yī)院和中國(guó)人民解放軍251醫(yī)院耳鼻喉科住院患者資料70例,手術(shù)病理活檢明確診斷為鼻咽癌。男性患者37例,女性患者33例?;颊吣挲g18~83歲,中位數(shù)年齡46歲,其中≥46歲者41例、<46歲者29例。腫瘤直徑≥3 cm者39例、<3 cm者31例;腫瘤部位:側(cè)壁25例,咽隱窩34例,上側(cè)壁11例。組織學(xué)類型:角化性鱗狀細(xì)胞癌9例、非角化性分化型癌32例、非角化性未分化型癌29例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者40例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者30例。浸潤(rùn)?quán)徑M織者38例,無(wú)浸潤(rùn)?quán)徑M織者32例。EBV陽(yáng)性者36例,EBV陰性者34例。并對(duì)上述患者或家屬電話隨訪5年。同時(shí)選取癌旁正常組織30例作為對(duì)照組。

        1.2 試劑和方法 即用型兔抗人Wee1單克隆抗體及其配套試劑盒、DAB顯色劑均由福州邁新生物技術(shù)有限公司提供。免疫組化染色采取EnVision兩步法,操作步驟參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對(duì)照。

        1.3 結(jié)果判斷 Wee1著色于細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì),可表現(xiàn)為淺黃色、棕黃色、棕褐色。計(jì)數(shù)高倍鏡視野下每張切片著色的細(xì)胞,判斷標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)[2]。染色結(jié)果由兩名以上病理醫(yī)師進(jìn)行雙盲評(píng)估,并建議(-)和(+)標(biāo)為低表達(dá),記為陰性;(++)和(+++)標(biāo)為高表達(dá),記為陽(yáng)性。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS17.0處理相關(guān)數(shù)據(jù),計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)及復(fù)式條形圖,多個(gè)率之間的比較采用RxC χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié) 果

        2.1 Wee1蛋白在鼻咽癌組織和黏膜慢性炎組織中的表達(dá) Wee1蛋白著色于細(xì)胞核,在70例鼻咽癌組織中陽(yáng)性表達(dá)37例,陽(yáng)性率為52.86%;在30例正常組織中陽(yáng)性表達(dá)3例,陽(yáng)性率為10.00%,兩組之間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=16.07,P=0.00<0.01),見(jiàn)圖1、圖2。

        2.2 Wee1蛋白的表達(dá)與鼻咽癌臨床病理因素的關(guān)系 Wee1蛋白在男性患者組中陽(yáng)性表達(dá)率為51.35%,女性患者組中陽(yáng)性率為54.54%,兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Weel蛋白在≥46歲組中陽(yáng)性率為53.65%,<46歲組中陽(yáng)性率為51.74%,兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Wee1蛋白在腫瘤直徑≥3 cm組中陽(yáng)性率為66.67%,在腫瘤直徑<3 cm組中陽(yáng)性率為35.48%,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Wee1蛋白在咽側(cè)壁、咽隱窩和上側(cè)壁瘤組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為52.00%、52.94%、54.54%,三組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Wee1蛋白在角化性鱗狀細(xì)胞癌、非角化性分化型癌和非角化性未分化型癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率分別為44.44%、53.13%、55.17%,三組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);Wee1蛋白在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性率為67.50%,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中陽(yáng)性率為33.33%,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Wee1蛋白的表達(dá)在浸潤(rùn)?quán)徑M中陽(yáng)性率為68.45%,無(wú)浸潤(rùn)?quán)徑M中陽(yáng)性率為34.37%,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);Wee1蛋白在EBV陽(yáng)性組中陽(yáng)性率為66.67%,EBV陰性組中陽(yáng)性率為38.23%,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

        表1 Wee1蛋白的表達(dá)與鼻咽癌臨床病理因素的關(guān)系(例)

        2.3 Wee1蛋白的表達(dá)對(duì)鼻咽癌患者5年生存預(yù)后的影響 70例鼻咽癌患者在5年隨訪期間無(wú)一例失訪。隨訪期內(nèi)發(fā)現(xiàn),Wee1蛋白陽(yáng)性表達(dá)的37例患者中有13例患者存活,5年存活率為35.14%;Wee1蛋白陰性表達(dá)的33例患者中有27例患者存活,5年存活率為81.82%,兩組之間差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2= 15.52,P=0.00<0.01),見(jiàn)圖3。

        圖1 Wee1蛋白在鼻咽癌組織陽(yáng)性表達(dá)(EnVision×100)

        圖2 Wee1蛋白在黏膜慢性炎組織中陰性表達(dá)(EnVision×100)

        圖3 Weel蛋白的表達(dá)對(duì)鼻咽癌患者5年生存預(yù)后的影響

        3 討 論

        人Wee1基因位于11p15.3~11p15.1,是編碼分子量為94 kD、含有647個(gè)氨基酸的蛋白。Wee1蛋白激酶作為G2/M期檢查點(diǎn)的關(guān)鍵激酶而特異性地參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié),其表達(dá)的異常都會(huì)影響細(xì)胞周期的正常轉(zhuǎn)變,進(jìn)而改變細(xì)胞的生物功能。國(guó)外研究資料顯示,多種惡性腫瘤高表達(dá)Wee1蛋白,且通過(guò)抑制或沉默其表達(dá),相關(guān)腫瘤細(xì)胞的增殖速度降低,甚至引起細(xì)胞的凋亡或死亡。外陰鱗狀細(xì)胞癌組織中Wee1過(guò)表達(dá),其表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分化差有關(guān),且有可能成為單一療法患者治療的靶點(diǎn)[2-5]。Pappano等[6]認(rèn)為Wee1在正常細(xì)胞生長(zhǎng)情況下起著腫瘤抑制基因的作用,但在腫瘤細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn),特異性抑制Wee1不利于無(wú)p53活性的腫瘤增殖和生存。國(guó)內(nèi)學(xué)者呂慧等[7]發(fā)現(xiàn),Wee1蛋白在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)明顯高于肝硬化及正常肝組織,不僅如此,肝細(xì)胞癌中Wee1蛋白表達(dá)越高,其分化程度越低。張金敏等[8]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,PB方案介入治療后,Wee1蛋白的表達(dá)較介入前顯著降低,推測(cè)Wee1蛋白的表達(dá)有可能成為監(jiān)測(cè)PB方案療效的指標(biāo)。

        本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Wee1蛋白在鼻咽癌組織中的表達(dá)明顯高于正常組織,且其表達(dá)與鼻咽癌腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)?quán)徑M織及EBV感染有關(guān)。這說(shuō)明癌細(xì)胞異常高表達(dá)Wee1蛋白不僅增加了癌細(xì)胞的增殖抗凋亡能力,而且也有利于癌細(xì)胞的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移,同時(shí),與EBV感染之間的關(guān)系也顯示出,EBV感染陽(yáng)性組中的Wee1蛋白表達(dá)明顯高于對(duì)應(yīng)組,這提示EBV有可能上調(diào)了Wee1蛋白,進(jìn)而促進(jìn)了病變的發(fā)生。統(tǒng)計(jì)分析鼻咽癌患者5年生存預(yù)后發(fā)現(xiàn),Wee1蛋白陽(yáng)性表達(dá)患者5年生存預(yù)后明顯低于Wee1蛋白陰性表達(dá),因而,Wee1蛋白表達(dá)的高低有可能成為檢測(cè)患者預(yù)后好壞的指標(biāo)。綜上所述,鼻咽癌組織存在Wee1蛋白的過(guò)表達(dá),其表達(dá)水平能反映癌細(xì)胞的生物學(xué)行為,也能為臨床判斷預(yù)后提供參考。

        [1]Barnes L,Eveson JW,Reichart P,et al.頭頸部腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)[M].劉紅剛,高巖,主譯,北京∶人民衛(wèi)生出版社,2006∶95.

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        [7]呂慧,楊玉秀,張立達(dá),等.Wee1與肝癌的關(guān)系[J].世界華人消化雜志,2011,19(14)∶1515-1519.

        [8]張金敏,王翔宇,李南,等.PB方案在宮頸癌介入化療中的療效觀察及對(duì)Wee1表達(dá)的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,14(9)∶1719-1723.

        Expression of Wee1 protein in nasopharyngeal carcinoma and its relationship with clinical prognosis.

        HUO Zhan-jiang1,LI Wei2,GAO Fei3.1.Department of Otolaryngology,Head and Neck Surgery,the First People's Hospital of Zhangjiakou City,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA;2.Department of Pathology,the 251thHospital of Chinese People's Liberation Army,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA;3.Department of Intensive Care Unit,the 251thHospital of Chinese People's Liberation Army,Zhangjiakou 075000,Hebei,CHINA

        ObjectiveTo investigate the expression of Wee1 protein in nasopharyngeal carcinoma and its relationship with clinical prognosis.MethodsSeventy patients with nasopharyngeal carcinoma were collected from the First People`s Hospital of Zhangjiakou City and the 251thHospital of Chinese People′s LiberationArmy from January 2005 to December 2010,which were definitely diagnosed as nasopharyngeal carcinoma by surgery pathology biopsy.The expression of Wee1 protein was detected by immunohistochemisty(EnVisionTM)in nasopharyngeal carcinoma tissues in the 70 patients and compared with that of normal tissues(n=30).The relationship between the expression of Wee1 protein and clinicopathological factors,the patients′five-year survival rate were analyzed by χ2test.ResultsThe positive expression rate of Wee1 protein was 52.86%(37/70)in nasopharyngeal carcinoma tissues and 10.00%(3/30)in normal tissues,with statistically significant difference(P<0.01).The positive expression of Wee1 protein in nasopharyngeal carcinoma tissues was related to tumor size,lymph node metastasis,infiltrating adjacent tissues and EBV infection(P<0.05),but not related to gender,age,histological category and tumor site(P>0.05).The five-year survival rate of the patients with nasopharyngeal carcinoma with the positive expression of Wee1 was 35.14%(13/37),which was significantly less than that of the patients with negative expression of(81.82%)(27/33),and the difference was statistically significant(P<0.01).ConclusionThe overexpression of Wee1 not only takes part in the development of nasopharyngeal carcinoma,but also is useful for cancer infiltrating and metastasis,which is valuable in forecasting the survival and prognosis of patients.

        Nasopharyngeal carcinoma;Wee1 protein;Survival;Prognosis

        R739.63

        A

        1003—6350(2016)03—0360—03

        2015-06-25)

        李偉。E-mail:liwei-324@163.com

        doi∶10.3969/j.issn.1003-6350.2016.03.006

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