龐念德，黃文財(cái)，屈燕銘，饒澤珍

(深圳市鹽田區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科，廣東 深圳 518083)

大腸息肉患者CD24、TK1表達(dá)水平與其臨床病理的關(guān)系

龐念德，黃文財(cái)，屈燕銘，饒澤珍

(深圳市鹽田區(qū)人民醫(yī)院消化內(nèi)科，廣東 深圳 518083)

目的 研究大腸息肉臨床病理與CD24、胸苷激酶(TK1)表達(dá)的關(guān)系。方法選取我院消化內(nèi)科2014年1月至2015年9月期間收治的88例大腸息肉患者，其中炎性息肉、管狀腺瘤、管狀絨毛狀腺瘤、絨毛狀腺瘤各22例，同時(shí)選取同期住院的正常大腸黏膜和腺癌各22例作為對(duì)照組；觀察CD24、TK1的表達(dá)水平與息肉組織類(lèi)型、息肉異型增生、息肉大小及息肉數(shù)量的關(guān)系。結(jié)果CD24、TK1水平的表達(dá)隨著組織類(lèi)型的遞增而逐漸增高(P＜0.05)，正常黏膜、炎性息肉、管狀腺瘤、管狀絨毛狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、腺癌CD24水平陽(yáng)性率分別為0(0/22)、0(0/22)、27.3%(6/22)、40.9%(9/22)、45.5%(10/22)、90.9%(20/22)，TK1水平陽(yáng)性率分別為0(0/22)、0(0/22)、9.1%(2/22)、18.2%(4/22)、27.3%(6/22)、50.0%(11/22)；隨著異型增生程度的增加，CD24、TK1水平的陽(yáng)性表達(dá)也逐漸增加(P＜0.05)，無(wú)增生、輕度增生、中度增生、重度增生CD24水平陽(yáng)性率分別為0(2/22)、50.0%(11/22)、72.7%(16/22)、90.9% (20/22)，TK1水平陽(yáng)性率分別為0(2/22)、45.5%(10/22)、59.1%(13/22)、90.9%(16/22)；隨著息肉直徑的增加，CD24、TK1水平的陽(yáng)性表達(dá)率逐漸增加，且呈現(xiàn)相關(guān)性(P＜0.05)，直徑≤1.0 cm、1.1～1.9 cm、≥2.0 cm CD24水平陽(yáng)性率分別為18.2%(4/22)、50.0%(11/22)、81.8%(18/22)，TK1水平陽(yáng)性率分別為22.7%(5/22)、45.5%(10/22)、90.9%(16/22)；單發(fā)、多發(fā)CD24水平陽(yáng)性率分別為4.5%(1/22)、68.2%(15/22)，TK1水平陽(yáng)性率分別為9.1%(2/22)、63.6%(14/22)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論CD24、TK1水平在大腸息肉中呈高表達(dá)，而增生的程度不一、大小不一、數(shù)量不同、病理類(lèi)型不同的腺瘤，其表達(dá)的程度也不同。

CD24水平；胸苷激酶水平；大腸息肉；病理關(guān)系；臨床價(jià)值

大腸息肉是臨床消化系統(tǒng)的常見(jiàn)疾病，多見(jiàn)于直腸和乙狀結(jié)腸，其發(fā)病率較高，且發(fā)病率會(huì)隨著年齡的增長(zhǎng)而逐漸增高，同時(shí)，大腸息肉還具有一定的惡變傾向，惡變率約為10%，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，因此，進(jìn)行早期癌風(fēng)險(xiǎn)篩查具有重要的臨床意義[1]。有研究顯示，胸苷激酶(TK1)是早期篩查癌風(fēng)險(xiǎn)的敏感性指標(biāo)，可在惡性腫瘤與諸多癌前疾病中呈現(xiàn)高表達(dá)；CD24水平也被認(rèn)為在結(jié)直腸癌中有高表達(dá)。因此，本文旨在探討CD24、TK1水平與大腸息肉臨床病理的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院消化內(nèi)科2014年1月至2015年9月期間收治的88例大腸息肉患者，其中男性68例，女性20例；年齡20～70歲，平均(62.3±7.8)歲。所有患者均進(jìn)行手術(shù)切除，并經(jīng)腸鏡檢查和病理學(xué)確診，其中炎性息肉、管狀腺瘤、管狀絨毛狀腺瘤、絨毛狀腺瘤各22例；同時(shí)選取同期住院正常的大腸黏膜和腺癌各22例作為對(duì)照組。排除有貧血疾病史和女性月經(jīng)期者。

1.2 方法 HE染色：采用常規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色法，將標(biāo)本組織連續(xù)切片，厚度為4μm；免疫組化染色：按照最佳濃度1:200配備CD24、TK1水平，磷酸鹽緩沖液(PBS)做空白對(duì)照，同時(shí)將已知的陽(yáng)性片做陽(yáng)性對(duì)照。具體內(nèi)容為：①脫蠟、水化：于二甲苯液體中放置所制的切片，浸泡10 min后更掉二甲苯溶液，再次浸泡10 min；依次置于無(wú)水乙醇、95%乙醇、75%乙醇中浸泡5 min。②抗原、修復(fù)：于pH 6.0的檸檬酸鈉緩沖液(SSC)容器中放置組織切片，在700 W的微波加熱10 min，進(jìn)行修復(fù)抗原。冷卻至室溫后沖洗3次，每次3 min。③加一抗：將血清CD24、TK1抗體滴加在切片上，然后在低溫(4℃)環(huán)境下孵育24 h，在37℃溫箱中復(fù)溫15 min，之后使用PBS緩沖液沖洗3次，每次3 min。④加二抗：方法同上。⑤使用DAB顯色：以1:50的DAB顯色，之后在鏡下觀察染色程度，染色滿(mǎn)意后進(jìn)行封片。

1.3 觀察指標(biāo)與判定方法 觀察CD24、TK1水平的表達(dá)與息肉組織類(lèi)型、息肉異型增生、息肉大小及息肉數(shù)量的關(guān)系情況。結(jié)果判定[2]：陽(yáng)性：鏡下可見(jiàn)棕黃色或黃色的顆粒；隨機(jī)選取五個(gè)切片，于高倍的顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)。依據(jù)染色的程度記為：棕黃色3分、黃色2分、淺黃色1分、不著色0分；依據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)量記為：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在70%以上為3分、陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在(30%～70%)間為2分、陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)在(10%～30%)間為1分、陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)小于10%為0分；根據(jù)染色程度+陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)之和分為四級(jí)：0分為陰性(-)，1～2分為弱陽(yáng)性(+)，3～4分為陽(yáng)性(++)，5～6分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，

2 結(jié) 果

2.1 CD24、TK1水平的表達(dá)與大腸息肉組織類(lèi)型的關(guān)系 CD24、TK1水平的表達(dá)隨著組織類(lèi)型的遞增而逐漸增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表1。正常黏膜組織及癌組織CD24、TK1水平的表達(dá)見(jiàn)圖1～圖4。

表1 CD24、TK1水平與息肉組織類(lèi)型的關(guān)系[例(%)]

圖1 正常黏膜組織CD24的表達(dá)(×400)

圖2 癌組織CD24的表達(dá)(×200)

2.2 不同息肉異型增生組織CD24、TK1的表達(dá) 隨著異型增生程度的增加，CD24、TK1水平的陽(yáng)性表達(dá)也逐漸增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

2.3 息肉大小對(duì)CD24、TK1水平的影響 隨著息肉直徑的增加，CD24、TK1水平的陽(yáng)性表達(dá)率逐漸增加，且呈現(xiàn)相關(guān)性(P＜0.05)；直徑≤1.0 cm和直徑≥2.0 cm的息肉其CD24、TK1水平表達(dá)率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.818、11.003，P＜0.05)，見(jiàn)表3。

圖3 正常黏膜組織TK1的表達(dá)(×200)

圖4 癌組織TK1的表達(dá)(×200)

表2 不同息肉異型增生組織CD24、TK1的表達(dá)[例(%)，n=22]

表3 息肉大小對(duì)CD24、TK1水平的影響[例(%)，n=22]

2.4 息肉數(shù)量對(duì)CD24、TK1水平的影響 在單發(fā)息肉和多發(fā)息肉中，CD24、TK1水平的陽(yáng)性表達(dá)率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表4。

表4 CD24、TK1水平的表達(dá)與息肉數(shù)量的關(guān)系[例(%)，n=22]

3 討 論

大腸息肉是臨床常見(jiàn)的疾病，臨床上分為腫瘤性和非腫瘤性?xún)纱箢?lèi)。而腺瘤性息肉又是腺癌的重要癌前病變，其大小、數(shù)量、部位、增生程度及病理類(lèi)型成為癌變的重要因素。因此，對(duì)腺瘤性息肉尤進(jìn)行早期篩查診斷尤為重要[3]。目前臨床上常采用原癌基因蛋白產(chǎn)物、抑癌基因的表達(dá)來(lái)診斷，但這些蛋白基因?qū)υ缙诘陌┌Y診斷效果不佳，而腺瘤演變成腺癌則需5～10年的時(shí)間。本研究探討CD24、TK1水平與大腸息肉臨床病理的關(guān)系，CD24主要存在在早期的上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及神經(jīng)細(xì)胞等，是一種低分子高度糖基化的粘附分子，參與造血分化和成熟及細(xì)胞的分化[4]。近些年有研究顯示，在結(jié)直腸癌患者中也存在高水平的CD24；TK1是一種嘧啶補(bǔ)救途徑的激酶，可在某種條件下轉(zhuǎn)化為腺胸苷酸，且TK1還與細(xì)胞周期、DNA合成均密切相關(guān)，可在腫瘤細(xì)胞的G1/S期交界、G2或M期表現(xiàn)為開(kāi)始升高至持續(xù)性升高，已成為一種評(píng)價(jià)腫瘤進(jìn)展的新的標(biāo)志物[5]，在某些惡性腫瘤和癌前病變中呈現(xiàn)高表達(dá)，是早期篩查癌風(fēng)險(xiǎn)的敏感性指標(biāo)[6]。本次研究探討CD24、TK1水平與大腸息肉臨床病理的關(guān)系，研究結(jié)果顯示：CD24、TK1水平的陽(yáng)性表達(dá)與大腸息肉病理類(lèi)型密切相關(guān)(P＜0.05)；而CD24、TK1水平在腺瘤與腺癌、正常黏膜與腺瘤中差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；CD24、TK1水平的陽(yáng)性表達(dá)率與異性增生程度和單發(fā)、多發(fā)息肉直徑均具有相關(guān)性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。故CD24與息肉惡變的重要因素密切相關(guān)，可以作為評(píng)價(jià)息肉組織惡變傾向的指標(biāo)之一，為結(jié)直腸癌的預(yù)防和治療提供有效的幫助。但CD24在大腸息肉惡變中的機(jī)制尚不明確，需進(jìn)一步研究。

綜上所述，CD24、TK1在大腸息肉中呈高表達(dá)，而增生程度不一、大小不一、數(shù)量不同、病理類(lèi)型不同的腺瘤，其表達(dá)的程度也不同。

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Correlation of serum CD24 and TK1 expression levels with clinicopathological features in patients with colorectal polyps.

PANG Nian-de,HUANG Wen-cai,QU Yan-ming,RAO Ze-zhen.Department of Gastroenterology,People's Hospital of Yantian District of Shenzhen,Shenzhen 518083,Guangdong,CHINA

Objective To study the correlation of serum CD24 and TK1 expression levels with clinicopathological features in patients with colorectal polyps.MethodsA total of 88 patients with colorectal polyps(including inflammation polyp,tubular adenoma,tubular villous adenoma,and villous adenoma,with 22 cases in each type),who admitted to Department of Gastroenterology of our hospital from January 2014 to September 2015,were selected as the research objects.At the same time,22 cases of normal colorectal mucosa and 22 cases of adenocarcinoma were chosen as the control group.The correlation of serum CD24 and TK1 expression levels with types of polyps,polyp dysplasia,polyp size and number of polyps were observed and compared.ResultsThe expression levels of CD24 and TK1 increased gradually with tissue type(P＜0.05);CD24 positive rates,in normal mucosa,inflammatory polyp,tubular villous adenoma, villous adenoma,adenoma were respectively 0(0/22),0(0/22),27.3%(6/22),40.9%(9/22),45.5%(10/22),90.9% (20/22),and TK1 positive rates in normal mucosa,inflammatory polyp,tubular villous adenoma,villous adenoma, adenoma were respectively 0(0/22),0(0/22),9.1%(2/22),18.2%(4/22),27.3%(6/22),50.0%(11/22).With the increase of the degree of dysplasia,the positive expression levels of CD24 and TK1 gradually increased(P＜0.05);CD24 positive rates in non-hyperplasia,mild hyperplasia,moderate hyperplasia and severe hyperplasia were respectively 0(2/22),50.0% (11/22),72.7%(16/22),90.9%(20/22),and TK1 positive rates in these were respectively 0(2/22),45.5%(10/22),59.1% (13/22),90.9%(16/22).With the increase of the diameter of polyps,the positive expression levels rate of CD24 and TK1 increased gradually(P＜0.05);CD24 level positive rate of＜1.0 cm in diameter,1.1～1.9 cm,≥2.0 cm were respectively 18.2%(4/22),50.0%(11/22),81.8%(18/22),and TK1 level positive rates of these diameter were respectively 22.7%(5/22),45.5%(10/22),90.9%(16/22).There was significant difference between the single polyps(4.5%(1/22) vs 9.1%(2/22))and polyposis(68.2%(15/22)vs 63.6%(14/22))in the level positive rate of CD24 and TK1(P＜0.05).ConclusionThe expression levels of TK1 and CD24 were high in colorectal polyps,but with the differences in the degree of hyperplasia,pathological types,number and size of the tumors,the expression levels were different.

CD24 level;TK1 level;Colorectal polyps;Pathological relationship;Clinical value

R574.6

A

1003—6350（2016）19—3109—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.19.004

2016-04-06)

廣東省深圳市鹽田區(qū)2014年度科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(編號(hào)：20140001)

龐念德。E-mail：pangniande@163.com