相 輝，鄭紅星，2，杜林杉，劉 影，楊 慧，魯 光，程姣姣，張志健，2*

(1.陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西漢中 723000；2.陜西省黑色有機(jī)食品工程技術(shù)研究中心，陜西漢中 723000)

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杜仲葉中活性成分積累變化規(guī)律

相 輝1，鄭紅星1，2，杜林杉1，劉 影1，楊 慧1，魯 光1，程姣姣1，張志健1，2*

(1.陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西漢中 723000；2.陜西省黑色有機(jī)食品工程技術(shù)研究中心，陜西漢中 723000)

杜仲(EucommiaulmoidesOliver)為杜仲科杜仲屬植物，是我國(guó)特有的名貴藥用經(jīng)濟(jì)樹(shù)種[1]。利用杜仲治療疾病在我國(guó)已有悠久的歷史，從漢朝的《神農(nóng)本草經(jīng)》到明朝的《本草綱目》都有較為詳細(xì)的記載。漢朝的《神農(nóng)本草經(jīng)》，將杜仲列為上品，具有治腰膝、堅(jiān)筋骨、強(qiáng)志、補(bǔ)中益氣、安胎等功效?！吨兴幋筠o典》中記載[2]，杜仲具有降壓、利尿、改善頭暈和失眠等功效。鑒于其起源古老，在科學(xué)上具有重要的研究?jī)r(jià)值及其重要的藥用價(jià)值，杜仲已經(jīng)被列為國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)的稀有植物[3]。

傳統(tǒng)中醫(yī)都是利用杜仲皮作為藥材，但由于杜仲皮資源有限、價(jià)格昂貴，限制了杜仲的開(kāi)發(fā)利用。隨著對(duì)杜仲研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)杜仲葉也含有與杜仲皮相同的活性成分[4-6]，且杜仲葉具有資源豐富、便于采集的優(yōu)點(diǎn)[7]。因此，現(xiàn)在人們對(duì)杜仲資源的開(kāi)發(fā)利用研究主要集中在杜仲葉上。苯丙素類、黃酮類、木脂素類、環(huán)烯醚萜類是杜仲葉中4大類主要活性成分[8]，但這些成分的含量會(huì)隨著葉片的生長(zhǎng)發(fā)育和衰老而有所變化[9]。為了更科學(xué)、合理、有效地開(kāi)發(fā)利用杜仲葉，該研究對(duì)不同生長(zhǎng)時(shí)期杜仲葉中4類活性成分的含量進(jìn)行分析檢測(cè)，找到每種成分含量隨生長(zhǎng)時(shí)間的變化規(guī)律，為選擇適宜采收期、保證所采杜仲葉質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料杜仲葉樣品采自陜西省漢中市市區(qū)陜西理工學(xué)院南校區(qū)內(nèi)道路兩旁生長(zhǎng)狀態(tài)良好、樹(shù)齡20年左右的杜仲樹(shù)。

1.2試驗(yàn)地概況漢中市位于陜西省西南部，北依秦嶺，南屏巴山(106°51′～107°10′ E、33°02′～33°22′ N，海拔500～600 m)，屬于亞熱帶氣候區(qū)，年平均氣溫14.5 ℃，無(wú)霜期年平均234 d，年平均日照時(shí)數(shù)1 478.4 h，年平均降水量855.3 mm。

1.3試驗(yàn)方法試驗(yàn)于2014年4月15日～11月15日進(jìn)行，每隔15 d在固定的幾株杜仲樹(shù)上采樣，每次隨機(jī)采集不同方位樹(shù)冠外圍中上部葉片，當(dāng)次所采葉片混勻后用微波殺青3 min，于50 ℃條件下烘干后粉碎、過(guò)60目篩備用。精確稱取上述杜仲葉粉10 g，用200 mL 75%乙醇在75 ℃浸提1 h后，過(guò)濾，濃縮得試液；然后采用紫外分光光度法分別測(cè)定木脂素、綠原酸、總黃酮、環(huán)烯醚萜含量[10-13]。

2結(jié)果與分析

2.1杜仲葉中綠原酸含量從圖1可以看出，杜仲葉中綠原酸含量4月中旬～6月中上旬含量快速增加，以6月15日所采集樣品綠原酸含量達(dá)全年最高值(39.0 mg/g)，從6月份以后綠原酸含量逐步下降。因此，考慮葉片產(chǎn)量和綠原酸含量，建議在5月底～10月初采收杜仲葉為宜，此期間所采杜仲葉中綠原酸含量在27.0 mg/g以上。

圖1　不同生長(zhǎng)時(shí)期杜仲葉中綠原酸的含量變化Fig.1　The variation of chlorogenic acid contents in Eucommia ulmoides leaves in different periods

2.2杜仲葉中木脂素含量從圖2可以看出，杜仲葉中木脂素含量在6月中旬之前快速增加，以6月15日所采集樣品中木脂素含量最高(2.5 mg/g)，從6月份以后木脂素含量逐步下降。因此，考慮葉片產(chǎn)量和木脂素含量，建議在5月底～8月底采收杜仲葉為宜，此期間所采杜仲葉中木脂素含量在1.7 mg/g以上。

圖2　不同生長(zhǎng)時(shí)期杜仲葉中木脂素的含量變化Fig.2　The variation of liganas contents in Eucommia ulmoides leaves in different periods

2.3杜仲葉中總黃酮含量從圖3可以看出，杜仲葉中總黃酮含量在4月快速增加，10月份之后又快速減少，5～9月處于小幅波動(dòng)狀態(tài)。因此，考慮葉片產(chǎn)量和總黃酮含量，建議在5月底～10月初采收杜仲葉為宜，此期間所采杜仲葉中總黃酮含量在7.0 mg/g以上。

圖3　不同生長(zhǎng)時(shí)期杜仲葉中總黃酮的含量變化Fig.3　The variation of total flavonoids contents in Eucommia ulmoides leaves in different periods

2.4杜仲葉中環(huán)烯醚萜含量從圖4可以看出，杜仲葉中環(huán)烯醚萜含量4月中旬～5月下旬快速增加，5月30日所采集樣品中環(huán)烯醚萜含量達(dá)全年最高峰(47.6 mg/g)，從6月份以后環(huán)烯醚萜含量逐步下降。因此，考慮葉片產(chǎn)量和環(huán)烯醚萜含量，建議在5月初～8月底采收杜仲葉為宜，此期間所采杜仲葉中環(huán)烯醚萜含量在24.7 mg/g以上。

圖4　不同生長(zhǎng)時(shí)期杜仲葉中環(huán)烯醚萜的含量變化Fig.4　The variation of iridoids contents in Eucommia ulmoides leaves in different periods

3結(jié)論與討論

采用乙醇浸提和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)杜仲葉生長(zhǎng)過(guò)程中綠原酸、木脂素、總黃酮、環(huán)烯醚萜的含量，找出每種成分含量隨生長(zhǎng)時(shí)間的變化規(guī)律。杜仲葉中活性成分的合成積累呈較為明顯的季節(jié)性，從3月份葉子發(fā)芽到6月份葉子成熟各種成分含量均在增加，基本上到6月份含量達(dá)到頂峰，從6月份以后，其中的綠原酸類、木脂素類、環(huán)烯醚萜類均開(kāi)始逐漸下降，且以環(huán)烯醚萜類下降速度最快；而黃酮類4～9月份一直穩(wěn)中有升，從9月份往后才開(kāi)始下降。因此，對(duì)杜仲葉的利用應(yīng)根據(jù)使用目的(即所利用的主要活性成分)不同采用不同生長(zhǎng)季節(jié)的葉片，其中以應(yīng)用黃酮類和綠原酸為主時(shí)可用葉片的采收期較長(zhǎng)(5～10月份)，而以應(yīng)用環(huán)烯醚萜類和木脂素為主時(shí)可用葉片的采收期較短(5～8月份)。如果綜合考慮各種活性成分的含量，建議采用5～8月份的葉片為宜。

參考文獻(xiàn)

[1] 張康健.中國(guó)杜仲研究[M].西安：陜西科技出版社，1992：1-2.

[2] 南京中醫(yī)藥大學(xué).中藥大辭典[M].2版.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，2006：21-22.

[3] 傅主國(guó)．中國(guó)植物紅皮書(shū)：稀有瀕危植物：第一冊(cè)[M]．北京：科學(xué)出版社，1991．

[4] 龔桂珍，宮本紅，張學(xué)俊，等．杜仲葉和杜仲皮中化學(xué)成分的比較[J]．西南大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，32(7)：167-172．

[5] 杜紅巖.杜仲活性成分與藥理研究的新進(jìn)展[J]．經(jīng)濟(jì)林研究，2003，21(2)：58．

[6] 程光麗．杜仲有效成分分析及藥理學(xué)研究進(jìn)展[J]．中成藥，2006，28(5)：723-725．

[7] 吉慶森．我國(guó)杜仲資源發(fā)展的策略[J]．西北林學(xué)院學(xué)報(bào)，1996，11(2)：80-83．

[8] 王文明，龐曉萍，成軍，等.杜仲化學(xué)成分研究概況[J]．西北藥學(xué)雜志，1998，13(2)：60-62．

[9] 茹建永，喬孝偉.HPLC法測(cè)定不同采收時(shí)期杜仲葉中綠原酸的含量[J].中國(guó)藥房，2008，19(27)：2112-2113．

[10] 鄧翀，顏永剛，楊乖利，等.正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化杜仲總木脂素提取工藝[J].中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志，2011(8)：45-46.

[11] 張吉波，孔麗，于海輝.杜仲葉中綠原酸水提工藝的優(yōu)化及其防腐效果研究[J].食品科技，2013(4)：232-236.

[12] 鄧翀，馮改利，楊乖利，等.正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化杜仲總黃酮提取工藝[J].中華中醫(yī)藥雜志，2011(11)：2695-2697.

[13] 張倩茹，高穎，李群芳，等.杜仲葉環(huán)烯醚萜類化合物提取工藝研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010(8)：4051-4052.

摘要[目的]為選擇適宜采收期、保證所采杜仲葉質(zhì)量提供科學(xué)依據(jù)。[方法]采用乙醇浸提和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)杜仲葉生長(zhǎng)過(guò)程中綠原酸、木脂素、總黃酮、環(huán)烯醚萜的含量，找出每種成分含量隨生長(zhǎng)時(shí)間的變化規(guī)律。[結(jié)果]杜仲葉活性成分的合成積累呈較為明顯的季節(jié)性，4種成分含量在6月份之前均快速增加，而6月份之后綠原酸、木脂素和環(huán)烯醚萜含量又逐漸減小，特別是環(huán)烯醚萜含量減小速率較快，但總黃酮含量到9月份后才開(kāi)始減小。[結(jié)論]同時(shí)考慮活性成分含量和杜仲葉產(chǎn)量，建議以應(yīng)用黃酮類和綠原酸為主時(shí)，葉片的采收宜在5～10月份進(jìn)行；而以應(yīng)用環(huán)烯醚萜類和木脂素為主時(shí)，葉片的采收宜在5～8月份進(jìn)行。如果綜合考慮各種活性成分的含量，建議采用5～8月份的葉片為宜。

關(guān)鍵詞杜仲葉；綠原酸；木脂素；總黃酮；環(huán)烯醚萜

The Accumulated Variation of the Active Ingredient inEucommiaulmoidesLeaves

XIANG Hui1, ZHENG Hong-xing1,2, DU Lin-shan1, ZHANG Zhi-jian1,2*et al(1.School of Biological Science and Engineering,Shaanxi University of Technology,Hanzhong,Shaanxi 723000;2. Shaanxi Province Black Organic Food Engineering Technology Research Center,Hanzhong,Shaanxi 723000)

Abstract[Objective]To provide a scientific basis for the selection of suitable harvesting period and quality assurance ofEucommiaulmoidesleaves.[Method]The contents of chlorogenic acid, lignans, total flavonoids and iridoids fromEucommiaulmoidesleaves in different growth periods were detected by ethanol extraction and UV spectrophotometer,each component content changing with the growth time was found out.[Result]The synthesis accumulation of active ingredients fromEucommiaulmoidesleaves was more obvious seasonal,the contents of the four major components were rapidly increasing before June,the contents of chlorogenic acid, lignans and iridoid content were gradually decreased after June, especially the decrease rate of iridoid content was faster.But the total flavonoids content was reduced until after September.[Conclusion]Considering the total contents of four active components and the output ofEucommiaulmoidesleaves, when the chlorogenic acid and the total flavonoids are taken as main source, the suitable harvesting time of leaves is range from May to October. In contrast, the suitable harvesting period is range from May to August when liganas and iridoids are the main source.If considering the content of each active ingredient,the suitable harvesting period is range from May to August.

Key wordsEucommiaulmoidesleaf; Chlorogenic acid; Liganas; Total flavonoids; Iridoids

收稿日期2015-12-02

作者簡(jiǎn)介相輝(1990-)，男，陜西渭南人，碩士研究生，研究方向：生物資源開(kāi)發(fā)與利用。*通訊作者，教授，碩士，碩士生導(dǎo)師，從事食品科學(xué)與資源開(kāi)發(fā)研究。

中圖分類號(hào)S 567

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

文章編號(hào)0517-6611(2016)01-182-02