◎ 姚志波
(惠州市食品藥品檢驗(yàn)所,廣東 惠州 516000)
液相色譜在食品檢測(cè)中的應(yīng)用
◎ 姚志波
(惠州市食品藥品檢驗(yàn)所,廣東 惠州 516000)
在食品分析中應(yīng)用高效液相色譜法,能有效檢測(cè)食品營養(yǎng)成分、食品添加劑情況、食品是否含有有毒物質(zhì)或違禁物質(zhì)。本文概述高效液相色譜法及其分析原理,并著重論述高效液相色譜法在食品檢測(cè)中的應(yīng)用情況,說明液相色譜的使用方法在食品檢測(cè)方面具有重大作用。
液相色譜;食品檢測(cè);應(yīng)用
在物資豐富、食物品種繁雜的現(xiàn)代社會(huì),食品的質(zhì)量安全已成為全民關(guān)注的重中之重,地溝油、會(huì)發(fā)光的豬肉、毒豆芽一度成為時(shí)事熱點(diǎn)。盡管近年來食品安全法不斷完善,但類似事件仍層出不窮,人民群眾的“智慧”在這些方面被放大到了極致。如何在有效的途徑上阻止不符合食品安全的事件發(fā)生,這就需要高效液相色譜法發(fā)揮作用。
液相色譜法(Liquid chromatography,LC)是用液體作為流動(dòng)相的色譜法,應(yīng)用十分廣泛,但大多數(shù)金屬鹽類和熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)還無法分析,此缺點(diǎn)可通過高效液相色譜法克服。高效液相色譜法(High Performance Liquid chromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,與氣相色譜法相結(jié)合的一種新型分離分析技術(shù)由于填料顆粒小而均勻而具有高阻力,需要高壓輸送流動(dòng)相,因此又稱高壓液相色譜法(High Pressure Liquid Chromatography),又因分離速度快被稱為高速液相色譜法(High Speed Liquid Chromatography),也稱現(xiàn)代液相色譜。HPLC是一項(xiàng)發(fā)展前景很好的檢測(cè)技術(shù),在食品安全指標(biāo)快速檢測(cè)中的表現(xiàn)尤為出色,它融合了液相和氣相兩種色譜分析方法的優(yōu)勢(shì),功效更明顯,正越來越廣泛地應(yīng)用于食品檢測(cè)工作中。
檢測(cè)器是高效液相色譜儀的重要組成部分,主要是用于監(jiān)測(cè)經(jīng)色譜柱分離后的組分隨淋洗液流出的濃度變化,所描記的圖形用于定性和定量分析,因此,它直接決定分析數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度、靈敏度和對(duì)流量和溫度的敏感度。在使用前,要充分地認(rèn)識(shí)和了解檢測(cè)器,才能更好地利用儀器得到精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)[1]。按性質(zhì)分類,檢測(cè)器可分為兩大類:①測(cè)量物質(zhì)濃度變化的檢測(cè)器,如電導(dǎo)檢測(cè)器、傳送絲氫焰檢測(cè)器等。②按需要和結(jié)合各種檢測(cè)器的特點(diǎn)進(jìn)行選擇應(yīng)用的檢測(cè)器,如紫外檢測(cè)器(UV)、差示析光檢測(cè)器(RI)等。
高效液相色譜法是在高壓的條件下,溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相間連續(xù)多次交換的過程,通過選擇流動(dòng)相配比、檢測(cè)波長和流速定量、定性由溶質(zhì)在兩相的分配系數(shù)、吸附力、親和力或分子大小不同而引起排阻作用的差別使不同溶質(zhì)達(dá)到分離的結(jié)果[2]。
(1) HPLC在乳品分析中的應(yīng)用。奶制品中富含糖、蛋白質(zhì)、脂類物質(zhì)等大量營養(yǎng)物質(zhì),在奶制品中應(yīng)用HPLC技術(shù)可有效地檢測(cè)奶制品中所含營養(yǎng)物質(zhì)的成分和含量,常用帶梯度的高效液相色譜儀、C18/C8液相色譜柱分離。
(2)HPLC在食品添加劑檢測(cè)中的應(yīng)用。食品添加劑是為改善食品品質(zhì)和色、香、味及保鮮、防腐而加入食品的人工合成或天然的物質(zhì)。主要分為防腐劑、甜味劑、色素、抗氧化劑等。目前市場(chǎng)上常用的食品添加劑大部分是人工合成的,對(duì)人體有一定的傷害性,HPLC在食品添加劑中的應(yīng)用具有重要的意義。食品添加劑分析一般采用IPC、RHPLC、HPICE的方法;檢測(cè)器一般使用紫外-可見光檢測(cè)器或電導(dǎo)檢測(cè)器和折光示差檢測(cè)器;色譜柱主要C18液相色譜柱。檢測(cè)甜味劑,常用RHPLC-UVD法、陰離子交換色譜法或離子對(duì)色譜法檢測(cè)食品中是否含有甜味素、甜蜜素、安賽蜜、甘草苷等多種甜味劑。檢測(cè)防腐劑,常用RHPLC法檢測(cè)BA、CA、脫氧乙酸、對(duì)羥基苯甲酸乙酯,UVD-RID串聯(lián)可以同時(shí)檢測(cè)食品中是否含有甜蜜素、BA和CA。檢測(cè)有機(jī)酸,一般采用UVD或者RID檢測(cè)器,C18液相色譜柱的RHPLC法可檢測(cè)食物中的乳酸、酒石酸、蘋果酸、醋酸和檸檬酸等,也可采用電導(dǎo)檢測(cè)器測(cè)定醬油、啤酒中的甲酸、乙酸、乙酰丙酸、焦谷氨酸等。利用HPLC法也可直接測(cè)定多種天然色素和人工色素,如檸檬黃、胭脂紅、日落黃、亮藍(lán)等。檢測(cè)抗氧化劑,采用RHPLC的梯度洗脫法可同時(shí)測(cè)定油脂中的9種抗氧化劑。檢測(cè)食品中農(nóng)藥、獸藥殘余,可用HPLC柱后衍生熒光檢測(cè)法測(cè)定水果中的涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、三羥基克百威、涕滅威、克百威和甲萘威7種農(nóng)藥殘留量。
(3)HPLC在食品微生物及微生物代謝物檢測(cè)分析中的應(yīng)用。日常生活中,因食用微生物或微生物的代謝物超標(biāo)而引發(fā)生病住院的情況時(shí)有發(fā)生。而高效液相色譜法可根據(jù)不同微生物的化學(xué)組成和其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,直接分析確定被測(cè)食品中是否存在微生物超標(biāo)的情況。國外學(xué)者利用高效液相色譜法檢測(cè)葡萄牙多種酸奶中的黃曲霉素的含量,結(jié)果顯示其中有19種樣品中的黃曲霉素超標(biāo),對(duì)人們的健康構(gòu)成威脅。
現(xiàn)代食品安全問題層出不窮,利用液相色譜法可保障食品質(zhì)量,讓人們能夠放心適用食品。隨著這項(xiàng)技術(shù)的逐漸完善與成熟,會(huì)被越來越多的專業(yè)技術(shù)人員掌握,在各領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。
[1]李海飛,李 靜,徐國鋒,等.HPLC快速分析水果中氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量[J]分析試驗(yàn)室,2009(B5):72-75.
[2]楊大進(jìn),趙 凱,方從容,等.防腐劑和甜味劑檢測(cè)技術(shù)進(jìn)展[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2008(7):1460-1463.
The application of HPLC in Food Detection
Yao Zhibo
(Huizhou Institute for Food and Drug Control, Huizhou 516000, China)
Applying of high performance liquid chromatography (HPLC) in to food analysis can efectively detect whether the food nutrition, food additive and food containing toxic substances or banned substances. This paper analyses the overview and analysis principle of HPLC, and emphatically discusses the application of HPLC in food detection, illustrates the use of liquid chromatography method in the aspect of food testing has a signifcant contribution.
Performance liquid chromatography (HPLC); Food detection; Application
TS207.3
10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.24.013