尚月軍

（青海省鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)技術推廣站，青海 西寧 810008）

豬藍耳病的癥狀及ELISA診斷

尚月軍

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豬藍耳病，即豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS），是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）感染所致，傳播方式為接觸傳染，對我國乃至全球養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴重的經濟損失。自1987年首次在美國發(fā)現(xiàn)至今，僅在美國每年造成的直接經濟損失估計可達6.64億美元。我國1996年首次出現(xiàn)PRRS相關報道，陸續(xù)也出現(xiàn)大規(guī)模暴發(fā)，并造成較大損失。因此，早期識別病癥盡早診斷并采取措施，是控制藍耳病發(fā)病，減少損失的有力措施。本文就PRRS臨床癥狀、解剖及病理特征、ELISA檢測方法做一介紹。

1　臨床癥狀

妊娠母豬、仔豬是PRRS高發(fā)群體，其發(fā)病因地域、季節(jié)、群體不同有很大差異。待產母豬主要表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減退并伴有發(fā)熱現(xiàn)象，出現(xiàn)輕度呼吸窘迫，妊娠晚期出現(xiàn)早產、流產、死胎等癥狀。仔豬表現(xiàn)為皮膚蒼白或黃疸，繼續(xù)發(fā)展皮膚變?yōu)榍嘧仙?，出現(xiàn)呼吸困難，有時呈腹式呼吸，體溫升高，食欲減退，消瘦，咳嗽等病癥，其耳朵為藍紫色，疾病持續(xù)發(fā)展會出現(xiàn)腹瀉，最終死亡。根據臨床癥狀診斷PRRS指標包括：（1）流產、早產率在80%以上；（2）死胎率在20%以上；（3）新生仔豬1周內死亡率在25%以上。

2　解剖及病理診斷

PRRSV感染豬群病理學特征主要為：皮膚發(fā)黃；胸腔、腹腔積水；肺部出現(xiàn)彌漫性間質肺炎，伴少量纖維素滲出，觸感硬實，肺泡間隔增厚，肺泡腔內有壞死細胞碎片；心內膜充血，心冠脂肪有浸潤現(xiàn)象；腎臟腫大，有灰白色斑點，部分伴有針尖狀出血點；肝臟出現(xiàn)空泡樣病變；鼻孔、氣管、喉頭等有泡沫；淋巴結腫大、多汁；腸內容物稀薄，有充血現(xiàn)象。

3　ELISA診斷

酶聯(lián)免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）是PRRS的常用免疫學檢測方法之一，其特異性可高達99.9%，敏感性可高達98.8%。目前常用ELISA檢測試劑盒主要原理為將特定的抗原包被于微孔板，加入待測樣本血清，抗原可捕獲血清中抗豬藍耳病病毒抗體，隨后使用辣根過氧化物酶標記的二抗捕獲抗豬藍耳病病毒抗體，最后顯色鑒定陽性樣本。

用于包被的抗原主要有兩類，分別是核衣殼蛋白（N蛋白）和膜蛋白（GP5、M蛋白）。前者主要用于早期自然或人工感染PRRSV的免疫學診斷，不適于免疫后已攜帶抗體的豬群；后者可用于疫苗免疫后豬群保護性抗體的檢測以及仔豬母源抗體檢測。N蛋白在PRRSV中含量高，最高能占到病毒總蛋白的40%。此外其具有多個抗原表位，免疫原性強，因此試劑盒中選擇N蛋白作為ELISA檢測的包被抗原。病毒感染早期機體主要針對N蛋白產生免疫應答，分泌非中和性抗體。盡管N蛋白抗體產生最早，但其持續(xù)時間很短，僅有2個月左右，且與機體抗病毒感染能力無關。M蛋白和GP5蛋白誘導機體產生抗體時間較N蛋白晚，M蛋白保守性較高，屬非糖基化蛋白，GP5為囊膜糖蛋白，兩種蛋白均含有主要中和表位，可刺激機體分泌中和抗體。雖然其出現(xiàn)時間較N蛋白晚，但維持時間久，在體內可持續(xù)存在4～5個月，為機體提供抗病毒能力。因此，在PRRSV檢測中應根據需要選擇適宜的ELISA種類，例如疫情監(jiān)測，早期感染的診斷宜采取N蛋白包被的ELISA檢測試劑盒，而用于疫苗免疫效果及豬群抗體變化情況的檢測宜選用膜蛋白包被的ELISA檢測試劑盒。

ELISA方便、快捷，特異性及敏感度較高，適合定性分析，但其用于定量分析準確性較差，且受環(huán)境及人工操作影響較大，如飼料、水源等抗體污染也會導致假陽性產生，從而干擾檢測結果。

4　小　結

在PRRS疫情來臨時，控制PRRS的有效方法是早發(fā)現(xiàn)，早隔離，并采取積極的治療手段。因此常規(guī)監(jiān)測、臨床癥狀觀察及疾病診斷是基層獸醫(yī)工作者需掌握的必要知識及手段。雖然診斷技術、剖檢及病理特征、臨床特征檢查等已較為成熟，但其檢測率仍不能達到100%，對高致病性PRRSV，還需獸醫(yī)工作者在實際中積累更加豐富的臨床經驗，提高管理和監(jiān)控水平，預防疫情的發(fā)生并能在疫情發(fā)生時快速應對。此外，不斷引入新的檢測和治療手段也是預防和控制疾病的必要工作。

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10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.09.073

尚月軍（1984～），本科，助理獸醫(yī)師，主要從事青海省鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)技術推廣工作