劉書敏 蔣 玲? 秦繼寶 黃慧青

219株銅綠假單胞菌臨床分布和耐藥性分析

劉書敏 蔣 玲? 秦繼寶 黃慧青

目的 了解銅綠假單胞菌的臨床分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供依據(jù)。方法 采用Microscan auto SCAN-4 細(xì)菌鑒定分析儀，對(duì)2014年1月至2015年12月檢出的219株銅綠假單胞菌進(jìn)行鑒定及藥敏分析。結(jié)果 219株銅綠假單胞菌主要來源于痰標(biāo)本和膿液標(biāo)本，痰標(biāo)本檢出173株，占79.00%；膿液標(biāo)本檢出19株，占8.68%；219株銅綠假單胞菌主要來自本院各病區(qū)住院患者，科室分布以ICU、呼吸內(nèi)科和老年病科為主，分別占22.37% 、17.35%和13.24%；抗菌藥物中氨曲南的耐藥率最高，耐藥率為51.2%，耐藥率最低的抗菌藥物是阿米卡星，耐藥率13.2%。結(jié)論 銅綠假單胞菌引起的感染以下呼吸道為主，臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理使用抗菌藥物，減少耐菌株的產(chǎn)生。

銅綠假單胞菌 藥敏試驗(yàn) 分布 耐藥性

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aemginasa）是醫(yī)院內(nèi)部感染的重要病原菌之一，是一種需氧或兼性厭氧、氧化酶陽性的非發(fā)酵革蘭氏陰性桿菌。當(dāng)機(jī)體免疫力處于低下狀態(tài)時(shí)，可引起呼吸道、皮膚、血液、泌尿生殖道系統(tǒng)等一系列感染。近年來，由于臨床抗生素的廣泛、不合理使用，使銅綠假單胞菌耐藥性不斷增強(qiáng)，多重耐藥菌株大量出現(xiàn)［1］，給臨床正確的診療帶來較大困難。為了解本院銅綠假單胞菌的臨床分布情況及耐藥性特點(diǎn)，作者回顧性分析了2014年1月至2015年12月本院臨床送檢的各類標(biāo)本分離得到的219株銅綠假單胞菌，為臨床合理使用抗菌藥物提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 分離得到的219株銅綠假單胞菌，來自本院2014年1月至2015年12月期間，臨床各病區(qū)送檢的標(biāo)本，包括痰液、各類分泌物、尿液、咽拭子、穿刺液、膽汁、血液等標(biāo)本分離的非重復(fù)分離菌株（非重復(fù)分離菌株：1周之內(nèi)同一患者、同一部位、同類標(biāo)本相同分離菌株只可以統(tǒng)計(jì)1次）。

1.2 細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定 不同種類的合格標(biāo)本送檢后，根據(jù)標(biāo)本要求進(jìn)行直接接種或增菌后轉(zhuǎn)種于血瓊脂平板、麥康凱平板上（購(gòu)于鄭州安圖生物工程有限公司），置于5%～10%CO2培養(yǎng)箱35℃培養(yǎng)18～24h，觀察菌落生長(zhǎng)情況；血培養(yǎng)使用BACTEC 9050全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀進(jìn)行血液培養(yǎng)，血培養(yǎng)瓶?jī)x器報(bào)陽性后轉(zhuǎn)種于血平板。選取不同單個(gè)可疑菌落進(jìn)行革蘭染色，鏡檢可見革蘭陰性桿菌，并且氧化酶試驗(yàn)為陽性，進(jìn)行鑒定。對(duì)于細(xì)菌培養(yǎng)以及鑒定均嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》執(zhí)行［2］。

1.3 儀器與試劑 Microscan auto SCAN-4 細(xì)菌鑒定分析儀，NC50細(xì)菌鑒定藥敏板以及配套試劑，均購(gòu)于美國(guó)西門子公司。

1.4 細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn) 對(duì)可疑菌落分離出純菌落后進(jìn)行革蘭染色及氧化酶試驗(yàn)。革蘭陰性桿菌接種NC50鑒定藥敏板，置于35℃非CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～24h，滴加相應(yīng)試劑后，放入Microscan auto SCAN-4細(xì)菌鑒定藥敏分析儀判讀結(jié)果。培養(yǎng)鑒定所用到的質(zhì)控菌株為銅綠假單胞菌（ATCC27853），購(gòu)于衛(wèi)生部藥品鑒定所。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用回顧性調(diào)查分析，運(yùn)用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)中心推薦的WHONET5.6軟件，對(duì)銅綠假單胞菌常用的抗菌藥物敏感率和耐藥率進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 銅綠假單胞菌感染的臨床科室分布構(gòu)成比 檢出率最高為ICU病房，高達(dá)22.37%，其次為呼吸內(nèi)科，為17.35%；老年病科為13.24%。見表1。

表1 219株銅綠假單胞菌各臨床科室分布構(gòu)成比

2.2 銅綠假單胞菌標(biāo)本來源分布構(gòu)成比 見表2。

表2 219株銅綠假單胞菌標(biāo)本來源分布構(gòu)成比

2.3 藥敏結(jié)果 219株銅綠假單胞菌對(duì)13種抗菌藥物的耐藥率見表3。

表3 219株銅綠假單胞菌對(duì)抗菌藥物的耐藥分析（%）

3 討論

銅綠假單胞菌為常見條件致病菌，廣泛存在于自然環(huán)境及醫(yī)院環(huán)境中，也是醫(yī)院感染最主要的病原菌之一［3-5］，當(dāng)機(jī)體處于免疫力低下狀態(tài)的時(shí)侯，可引起包括呼吸道感染、傷口感染、泌尿道感染、血液感染以及消化道等多部位感染。從本院分離出的219株銅綠假單胞菌主要來源于呼吸道的痰液標(biāo)本，檢出173株，占79.00%，其次為膿液標(biāo)本，檢出19株，占8.68%，其他標(biāo)本的檢出率相對(duì)較低。分析數(shù)據(jù)表明，從呼吸道痰液標(biāo)本分離得到的銅綠假單胞菌明顯多于其他部位的標(biāo)本，說明現(xiàn)階段本院銅綠假單胞菌引起的感染仍以下呼吸道感染為主。與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的分布情況基本相符［6-7］。

本資料表明，在臨床科室銅綠假單胞菌感染分布中，ICU、呼吸內(nèi)科以及老年病科是銅綠假單胞菌檢出率較高的三個(gè)主要病區(qū)［8-10］，究其原因，因ICU、呼吸內(nèi)科以及老年病科的患者多是住院時(shí)間較長(zhǎng)，且年老體弱、長(zhǎng)期應(yīng)用抗生素的患者，因臨床的一系列操作破壞了機(jī)體的黏膜屏障作用，最易引起銅綠假單胞菌感染。另外該類患者抗菌藥物應(yīng)用時(shí)間較長(zhǎng)，極易使銅綠假單胞菌等菌株產(chǎn)生耐藥性，于是為銅綠假單胞菌的多重耐藥創(chuàng)造了感染條件。因此，必須加強(qiáng)措施，加大對(duì)銅綠假單胞菌醫(yī)院感染的調(diào)查和耐藥性監(jiān)測(cè)等手段，采取綜合性的防治措施，臨床醫(yī)生應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格遵守抗生素使用原則，院感科以及檢驗(yàn)科應(yīng)當(dāng)加大力度對(duì)醫(yī)院環(huán)境微生物學(xué)的監(jiān)測(cè)，尤其是對(duì)高?？剖遥↖CU、呼吸內(nèi)科以及老年病科）的監(jiān)測(cè)，極大的降低銅綠假單胞菌院內(nèi)感染的發(fā)生。

本文藥敏結(jié)果顯示，分離檢出的219株銅綠假單胞菌中，對(duì)氨曲南的耐藥率最高，達(dá)51.2%，另外，對(duì)阿米卡星和妥布霉素也有著較高的敏感性，分別占78.1%和84%，該結(jié)果與周文虹等報(bào)道相符［11］。另外，本文結(jié)果還顯示對(duì)銅綠假單胞菌耐藥率較低的抗菌藥物為美羅培南、亞胺培南、哌拉西林/他唑巴坦、妥布霉素和阿米卡星，含酶抑制劑及碳青霉烯類抗生素仍是臨床治療銅綠假單胞菌感染的首選藥物，其中治療銅綠假單胞菌感染抗菌活性最強(qiáng)的藥物碳青霉烯類抗菌藥，因其對(duì)質(zhì)粒介導(dǎo)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶、染色體及質(zhì)粒介導(dǎo)的頭孢菌素酶均具有高度穩(wěn)定性，具有超強(qiáng)、廣譜的抗菌能力，在臨床治療銅綠假單胞菌感染中使用非常普遍，但隨著碳青霉烯類抗菌藥的在臨床上的廣泛使用，給臨床醫(yī)生日常治療上帶來較大困難。

［1］ 王亞紅,張青鋒,潘立東．2009-2012年銅綠假單胞菌臨床分布及耐藥性分析．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(5):1064-1066．

［2］ 葉應(yīng)嫵,王毓三．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程．第三版．南京:東南大學(xué)出版社, 2006:736-753．

［3］ 倪語星,尚紅．臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)．第五版．北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:137-139．

［4］ 韓靜,沈萍萍,高靈寶．2006-2009年744株銅綠假單胞菌分布特點(diǎn)和耐藥狀況分析．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(7):842-843．

［5］ 巫艷彬,陳一強(qiáng),孔晉亮,等．醫(yī)院常見革蘭陰性桿菌的分布及耐藥性分析．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,24(7):1597-1599．

［6］ 徐準(zhǔn)．88株銅綠假單胞菌耐藥性分析．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2015,36(22):3345-3346．

［7］ 張昭勇,王元元,蔡克濤,等．2003-2009年我院銅綠假單胞菌耐藥性監(jiān)測(cè)分析．湖北醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào),2011,30(1):56-59．

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［9］ 戢運(yùn)超,饒榮．某縣級(jí)醫(yī)院銅綠假單胞菌的分布及耐藥性變遷．中國(guó)感染控制雜志,2014,13(4):246-248．

［10］ 陳強(qiáng)．銅綠假單胞菌耐藥性及其院內(nèi)感染的分布特點(diǎn)分析研究．中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2014,8(17):140-141．

［11］ 周文虹,陳金連,官煜彬．2014能某院銅綠假單胞菌的分布及耐藥情況．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2015,36(18):2730-2732．

Objective To investigate clinical distribution and the drug resistance of Pseudomonas aeruginosa，to provide scientifc evidences for clinical application of antibiotic. Methods We retrospectively surveyed the infection of Pseudomonas aeruginosa in our hospital from January 2014 to December 2015，Microscan auto SCAN-4 was used to identify the separation of 219 strains Pseudomonas aeruginosa drug susceptibility results analyzed. Results 219 strains Pseudomonas aeruginosa were mainly isolated from sputum and pus specimens，173 strains were isolated from sputum specimens，accounted 79.00%；19 strains were isolated from pus specimens，accounted 8.68%，219 strains Pseudomonas aeruginosa were mainly isolated from patients hospitalized in the intensive care unit（ICU）（22.37%），which were mainly from Respiratory Medicine Department of Gastroenterology（17.35%）and Department of geriatrics（13.24%），the most resistance rates was azatreonam（51.2%），the lowest resistance rates was amikasin（13.2%）. Conclusions Pseudomonas aeruginosa mostly come from lower respiratory tract infection specimen，so clinical doctors should select antimicrobials according to drug susceptibility test.

Pseudomonas aeruginosa Susceptibility testing Distribution Drug Resistanc

222042 江蘇省連云港市東方醫(yī)院檢驗(yàn)科

*通信作者