李卓

【摘要】 目的 探討肺結(jié)核及肺外結(jié)核診斷中采用結(jié)核感染T細(xì)胞（Tsport）檢測(cè)的臨床意義。方法 200例疑似結(jié)核患者， 分別采用結(jié)核菌試驗(yàn)法（TST法）與結(jié)核感染T細(xì)胞（Tsport）檢測(cè)法進(jìn)行檢測(cè)， 對(duì)比兩種檢測(cè)方法對(duì)結(jié)核診斷的特異性、靈敏性、假陰性率以及假陽(yáng)性率。結(jié)果 200例患者共有62例確診， 包括53例肺結(jié)核患者和9例肺外結(jié)核患者；采用兩種檢測(cè)方法后， Tsport法診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核的靈敏性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、約登指數(shù)均明顯高于TST法， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 Tsport檢測(cè)是較靈敏和特異的快速檢測(cè)結(jié)核分枝桿茵感染的方法， 可用于結(jié)核病的快速診斷， 對(duì)控制活動(dòng)性結(jié)核的發(fā)生與再發(fā)生、潛伏性結(jié)核感染的預(yù)防、肺外結(jié)核的輔助診斷等具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)核??；結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)法；結(jié)核菌試驗(yàn)法

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.05.045

據(jù)我國(guó)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示， 因結(jié)核病而死亡的人數(shù)年均高達(dá)13萬(wàn)余人， 主要源于人體感染結(jié)核病菌后， 其會(huì)對(duì)機(jī)體內(nèi)的多器官組織造成較大傷害， 且臨床癥狀較為復(fù)雜， 尤其當(dāng)肺外結(jié)核所導(dǎo)致的臨床癥狀不典型或病情呈隱匿性變化時(shí)， 臨床漏、誤診率極高， 故而有必要加大結(jié)核病陽(yáng)性檢出率。本院在結(jié)核病診斷中， 采用了Tsport法， 其特異性與靈敏性較高， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2012年10月～2013年10月接收的疑似結(jié)核病患者200例， 其中男152例， 女48例， 年齡7～85歲， 平均年齡（48.5±10.4）歲。表現(xiàn)為不明原因發(fā)熱， 但臨床癥狀不明顯， 影像學(xué)檢查顯示正常。其診斷參照患者的臨床表現(xiàn)、病原學(xué)檢查、影像學(xué)檢查、組織病理學(xué)檢查結(jié)果以及抗癆治療反應(yīng)等。

1. 2 方法 患者分別行TST法與Tsport法進(jìn)行檢測(cè)， 具體方法如下。①TST法：選取0.1 ml的PPD（內(nèi)含5 U結(jié)核菌素）行前臂尺側(cè)皮內(nèi)試驗(yàn)， 2～3 d后觀察結(jié)果， 硬結(jié)直徑≥10 mm則視為陽(yáng)性。②Tsport法：結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試劑盒由上海復(fù)興長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供。采集量如下：>10歲， 8 ml靜脈血；2～9歲兒童， 4 ml靜脈血；<2歲兒童， 2 ml靜脈血。分離出外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）， 將陽(yáng)性對(duì)照物、陰性培養(yǎng)液、B抗原濾液培養(yǎng)蛋白10以及A抗原早期分泌性靶抗原6分別加入已包被抗IFN-r抗體微量板的4個(gè)孔中；將濃度為2×105的PBMC加入4個(gè)孔中， 于CO2培養(yǎng)箱內(nèi)放置20 h （37℃環(huán)境下）；PBS溶液經(jīng)處理后將抗r干擾素（堿性磷酸酶標(biāo)記）， 孵育2 h （室溫下）， PBS溶液洗脫處理后顯色， 并以PBS溶液終止反應(yīng)， 而后計(jì)算點(diǎn)數(shù)， 當(dāng)測(cè)量孔點(diǎn)數(shù)比陰性對(duì)照組多出5個(gè)或是陰性對(duì)照組的2倍及以上時(shí)則視為陽(yáng)性。

1. 3 觀察指標(biāo) 觀察并對(duì)比兩種檢測(cè)方法對(duì)結(jié)核診斷的特異性、靈敏性、假陰性率以及假陽(yáng)性率。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 臨床診斷結(jié)果 本組200例患者共有62例患者確診。包括53例肺結(jié)核患者和9例肺外結(jié)核患者。

2. 2 兩種檢測(cè)方法與最終診斷結(jié)果比較 采用兩種檢測(cè)方法后， Tsport法診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核的靈敏性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、約登指數(shù)均明顯高于TST法， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

3 討論

中國(guó)是結(jié)核菌感染高負(fù)擔(dān)國(guó)家， 患者人數(shù)居全球第二位。結(jié)核病是一種慢性傳染性疾病， 病原體具有持久性。具體表現(xiàn)為“五多”， 即感染人數(shù)多、患病人數(shù)多、潛伏感染人數(shù)多、新發(fā)患者多、死亡人數(shù)多。其傳染性、潛伏性、難清除性、再活動(dòng)性、致病復(fù)雜性等防治難點(diǎn)使結(jié)核病防治成為首要任務(wù)。新發(fā)結(jié)核病例來(lái)自潛伏性結(jié)核感染人群， 潛伏性結(jié)核感染人群數(shù)量巨大。新增活動(dòng)性結(jié)核患者每年約145萬(wàn)人?？刂苹顒?dòng)性結(jié)核患者必須通過(guò)鑒別“高危人群”“預(yù)防性治療”， “免疫接種”來(lái)控制潛伏性結(jié)核感染。傳統(tǒng)的診斷結(jié)核病的方法有很多不足， 臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的檢測(cè)手段就是痰標(biāo)本涂片的抗酸染色、BD-960結(jié)核菌的快速培養(yǎng)及傳統(tǒng)L-J羅氏培養(yǎng)（羅培）、結(jié)核抗體檢測(cè)等。痰涂片陽(yáng)性檢出率低， 結(jié)核抗體檢測(cè)特異性低， 敏感度差， BD-960結(jié)核菌的快速培養(yǎng)與傳統(tǒng)培養(yǎng)方法比較雖然縮短了檢測(cè)時(shí)間， 但其陽(yáng)性檢出率受標(biāo)本采集等眾多因素影響仍然不高。應(yīng)用結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)， 可提高結(jié)核分枝桿菌的陽(yáng)性率， 24 h報(bào)告檢測(cè)結(jié)果， 為臨床疾病的準(zhǔn)確快速的診斷提供理論依據(jù)。Tsport試驗(yàn)對(duì)結(jié)核病的早期、快速、準(zhǔn)確診斷明顯優(yōu)于TST， 是特異性和靈敏度高的結(jié)核分枝桿菌輔助診斷試驗(yàn)。其檢測(cè)樣本靈活， 創(chuàng)傷性小， 可對(duì)外周血、胸水、腹水、腦脊液、心包積液等標(biāo)本進(jìn)行結(jié)核感染T檢測(cè)。可根據(jù)樣本類(lèi)型， 進(jìn)一步結(jié)合影像學(xué)檢查可對(duì)肺外結(jié)核進(jìn)行診斷或者是輔助診斷。對(duì)于臨床癥狀不明顯和影像學(xué)檢查顯示正常者， 可通過(guò)結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)對(duì)潛伏性結(jié)核分枝桿菌感染者進(jìn)行預(yù)防性治療或觀察。對(duì)兒童結(jié)核病進(jìn)行輔助診斷， 克服了兒童干咳、無(wú)痰（用其他方法幾乎無(wú)法檢測(cè)）的弊端等對(duì)臨床上痊愈的活動(dòng)性結(jié)核病， 應(yīng)用Tsport技術(shù)控制其發(fā)生與再發(fā)生。本研究結(jié)果顯示， 患者行TST法與Tsport法進(jìn)行檢測(cè)后， Tsport法診斷肺結(jié)核及肺外結(jié)核的靈敏性、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、約登指數(shù)均明顯高于TST法， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述， Tsport檢測(cè)是較靈敏和特異的快速檢測(cè)結(jié)核分枝桿茵感染的方法， 可用于結(jié)核病的快速診斷。對(duì)控制活動(dòng)性結(jié)核的發(fā)生與再發(fā)生、潛伏性結(jié)核感染的預(yù)防、肺外結(jié)核的輔助診斷等具有重要意義。

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[收稿日期：2015-10-14]