施金鈸，李　萍，高增平，閆興麗，王寶華，楊貝貝，陶絲雨，王一程，穆芳園

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京　100029)

?

蜘蛛香的化學(xué)成分研究

施金鈸，李萍，高增平，閆興麗*，王寶華，楊貝貝，陶絲雨，王一程，穆芳園

(北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京100029)

摘要：目的研究蜘蛛香的化學(xué)成分。方法采用大孔吸附樹脂AB-8、硅膠柱層析、葡聚糖凝膠LH-20柱層析等方法進(jìn)行分離純化，利用1H-NMR、13C-NMR等波譜技術(shù)對(duì)化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行解析。結(jié)果分離并鑒定了2個(gè)倍半萜類化合物、1個(gè)環(huán)烯醚萜內(nèi)酯和4個(gè)環(huán)烯醚萜類化合物，分別為：8-acetoxyl-patchouli alcohol(1)、8-hydroxyl-pathouli alcohol(2)、jatamanin A(3)、11-ethoxyviburtinal(4)、baldrinal(5)、11-methoxyviburtinal(6)、deacylbaldrinal(7)。結(jié)論化合物2為首次從蜘蛛香中分離得到。

關(guān)鍵詞：蜘蛛香；化學(xué)成分；環(huán)烯醚萜

蜘蛛香為敗醬科纈草屬植物ValerianajatamansiJones的干燥根莖及根，常見于西南地區(qū)。2010年版《中國藥典》(一部)亦有收載，其性味微苦、辛、溫，歸心、脾、胃經(jīng)；功效為理氣止痛、消食止瀉、祛風(fēng)除濕、鎮(zhèn)驚安神；用于脘腹脹痛、食積不化、腹瀉痢疾、風(fēng)濕痹痛、腰膝酸軟、失眠等癥狀[1]。蜘蛛香主要含有揮發(fā)油、環(huán)烯醚萜類、黃酮類和多糖等化學(xué)成分，其中纈草三酯類成分的含量高于同屬其他植物。課題組前期藥理研究表明，蜘蛛香環(huán)烯醚萜類成分能抑制慢性應(yīng)激所致的腸易激綜合征模型大鼠的胃腸功能亢進(jìn)，降低內(nèi)臟敏感性，改善精神狀態(tài)，具有良好的鎮(zhèn)痛作用[2-3]。

為了進(jìn)一步探索蜘蛛香的化學(xué)成分，深入闡釋蜘蛛香治療腸易激綜合征的物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)通過大孔吸附樹脂AB-8、硅膠柱層析等色譜方法分離得到了7個(gè)化合物，并通過核磁共振等波譜技術(shù)對(duì)分離得到的化學(xué)成分進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，各化合物的鑒定結(jié)果分別為:8-acetoxyl-patchouli alcohol(1)、8-hydroxyl-pathouli alcohol(2)、jatamanin A(3)、11-ethoxyviburtinal(4)、baldrinal(5)、11-methoxyviburtinal(6)、Deacylbaldrinal(7)，其中化合物2為首次從蜘蛛香中分離得到。

1儀器與試藥

1.1儀器RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)； SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長城科工貿(mào)有限公司)；KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；DS電熱三用水浴鍋(北京醫(yī)療設(shè)備廠)；Sartorious BT 25S型1/100000電子分析天平(北京賽多利斯儀器有限公司)；WH-43型電熱恒溫干燥箱(天津市泰斯特儀器有限公司)；LTQ Orbitrap XL型高分辨質(zhì)譜儀(美國，Thermo公司)。Bruker-Avance DRX-500型500M超導(dǎo)核磁共振波譜儀(瑞士，Bruker公司)。1.2試藥AB-8型大孔吸附樹脂(天津南開大學(xué)化工廠)；柱色譜用硅膠(200～300目，青島海洋化工廠)；

Sephadex LH-20凝膠(瑞士，GE公司)；硅膠G預(yù)制薄層板(20 cm× 20 cm)(青島海洋化工廠)；其他試劑均為分析純；實(shí)驗(yàn)用蜘蛛香藥材購自云南，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)石晉麗教授鑒定為敗醬科纈草屬蜘蛛香(Valeriana jatamansi Jones)。

2提取與分離

稱取蜘蛛香藥材32.5 kg，粉碎成粗粉，加12倍量體積分?jǐn)?shù)為80%的乙醇浸泡1 h，加熱回流提取2次，每次3 h，過濾，合并提取液，減壓回收乙醇得濃縮液。取濃縮液，加水稀釋，高速離心除雜，上清液過AB-8大孔吸附樹脂，收集體積分?jǐn)?shù)為90%的乙醇洗脫液，洗脫液減壓回收乙醇，減壓真空干燥，得干膏。干膏加乙酸乙酯溶解，加適量硅膠拌樣，上硅膠柱，采用石油醚-乙酸乙梯度洗脫，收集合并流份，共得到7個(gè)流份V1～V7。V1經(jīng)過反復(fù)硅膠柱色譜及Sephadex LH-20純化得到化合物1、化合物2和化合物4，V2經(jīng)過反復(fù)硅膠柱色譜及Sephadex LH-20純化得到化合物5和化合物6。V4經(jīng)過反復(fù)硅膠柱色譜及Sephadex LH-20純化得到化合物3和化合物7。

3結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1:無色結(jié)晶。1H-NMR (500 MHz, MeOD)δ：4.77 (m, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.10 (s, 3H), 0.90 (s, 3H), 0.83 (d,J=6.7 Hz, 3H)。13C-NMR (126 MHz, MeOD)δ: 76.47 (C-1),32.94 (C-2),29.55 (C-3), 28.80 (C-4),44.09 (C-5), 24.57 (C-6), 44.81 (C-7), 76.09 (C-8), 37.09 (C-9), 40.04 (C-10),41.41 (C-11), 25.48 (C-12), 29.00 (C-13), 20.78 (C-14), 19.17 (C-15),21.48 (C-16), 172.75 (C-17)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的8-acetoxyl-patchouli alcohol一致[4]，鑒定該化合物為8-acetoxyl-patchouli alcohol。

化合物2：無色結(jié)晶。1H-NMR (500 MHz, MeOD)δ：3.88 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.09 (s, 3H), 0.88 (s, 3H), 0.81 (d,J=6.7 Hz, 3H).13C-NMR(126 MHz, MeOD)δ：76.43 (C-1), 33.00 (C-2), 29.63 (C-3), 29.01 (C-4), 44.17 (C-5), 25.19 (C-6), 47.69 (C-7), 73.08 (C-8), 39.88 (C-9), 40.14 (C-10), 41.66 (C-11), 25.94 (C-12), 28.93 (C-13), 20.99 (C-14), 19.26 (C-15)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的8-hydroxyl-pathouli alcohol一致[4]，鑒定該化合物為8-hydroxyl-pathouli alcohol。

化合物3：無色結(jié)晶。1H-NMR (500 MHz, MeOD)δ：5.13, 5.05 (s, 1H),5.09 (d,J=11.4 Hz, 1H), 4.42 (dd,J=11.4, 1.2 Hz, 1H), 3.76 (d,J=3.7 Hz, 1H), 3.32 (dd,J=10.8, 9.6 Hz, 2H,), 2.99 (d,J=10.8 Hz, 1H), 2.17 (ddd,J=13.6, 9.6, 2.4 Hz, 1H), 1.98 (dd, J=13.2, 4.8 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H)。13C-NMR (126 MHz, MeOD)δ：174.94 (C-1), 71.06 (C-3), 144.18 (C-4), 41.02 (C-5), 40.73 (C-6), 81.39 (C-7), 86.15 (C-8), 53.64 (C-9), 21.94 (C-10), 113.56 (C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的jatamanin A一致[5]，鑒定該化合物為jatamanin A。

化合物4：黃色針晶。1H-NMR (500 MHz, MeOD)δ：9.81 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.97 (d,J=3.4 Hz, 1H), 6.69 (dd,J=3.3, 0.7 Hz, 1H), 4.70 (d,J=1.0 Hz, 2H), 3.63 (q,J=7.0 Hz, 2H), 1.25(t,J=7.0 Hz, 3H)。13C-NMR (126 MHz, MeOD)δ：186.46(C-10), 152.04 (C-1), 148.19 (C-7), 143.46 (C-3), 136.69(C-5), 125.39 (C-8), 124.31 (C-9), 123.10(C-4), 110.85(C-6), 67.76(C-1′), 67.29(C-2′), 15.42(C-3′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的11-ethoxyviburtinal一致[6]，鑒定該化合物為11-ethoxyviburtinal。

化合物5：黃色結(jié)晶。1H-NMR (500 MHz, MeOD)δ：9.83 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 8.00 (d,J=3.4 Hz, 1H), 6.70 (d,J=3.4 Hz, 1H),5.31 (s, 3H), 2.10 (s, 3H, -OCOCH3)。13C-NMR (126 MHz, MeOD)δ：186.50(C-10),172.33 (-OCOCH3),152.06(C-1),148.32(C-7),146.03(C-3),136.11(C-5),127.89(C-8),125.72(C-9),121.01(C-4),110.89(C-6),61.57(C-11),20.56(-OCOCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的baldrinal一致[6]，鑒定該化合物為baldrinal。

化合物6：黃色結(jié)晶。1H-NMR (500 MHz, MeOD)δ：9.81 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.97 (d,J=3.4 Hz, 1H), 6.68 (d,J=3.2 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 3.44 (s, 3H,OMe)。13C-NMR (126 MHz, MeOD)δ：186.46(C-10), 152.04(C-1), 148.20(C-7), 143.56(C-3), 136.58(C-5), 125.41(C-8), 124.30(C-9), 122.71(C-4), 110.85(C-6), 69.71(C-11), 58.70(C-OMe)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的11-methoxyviburtinal一致[7]，鑒定該化合物為11-methoxyviburtinal。

化合物7：黃色結(jié)晶。m/z177.0[8]。1H-NMR (500 MHz, MeOD)δ：9.80 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.96 (d,J= 3.4 Hz, 1H), 6.68 (dd,J=3.4, 1.0 Hz, 1H), 4.81 (d,J=1.2 Hz, 3H)。13C-NMR (126 MHz, MeOD)δ：186.42(C-10), 152.00(C-1), 148.09(C-7), 142.91(C-3), 136.57(C-5), 125.80(C-8), 125.31(C-9), 124.28(C-4), 110.46(C-6), 59.56(C-11)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)中報(bào)道的數(shù)據(jù)一致[9]，鑒定該化合物為deacylbaldrinal。

4討論

本文是在課題組前期得到蜘蛛香環(huán)烯醚萜類有效部位純化工藝基礎(chǔ)上，對(duì)蜘蛛香化學(xué)成分進(jìn)行的分離鑒定研究。實(shí)驗(yàn)共得到了2個(gè)倍半萜類化合物、1個(gè)環(huán)烯醚萜內(nèi)酯和4個(gè)環(huán)烯醚萜類化合物，其中主要以環(huán)烯醚萜類成分獲得的量較大，化合物2為首次從蜘蛛香中提取分離得到。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會(huì). 中國藥典2010年版 [S]. 一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社, 2010: 345.

[2]崔亞君, 穆赫塔爾·亞森, 岳松健, 等. 七種纈草屬植物中纈草三酯和乙酰纈草三酯含量考察 [J]. 西北藥學(xué)雜志, 1999, 14(4): 152-153.

[3]樊江波. 蜘蛛香治療腸易激綜合征的作用和機(jī)制研究 [D]. 北京: 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2008.

[4]閆興麗，洪纓，石晉麗，等. 蜘蛛香環(huán)烯醚萜對(duì)腸易激綜合征模型大鼠5-HT和5-HIAA的影響 [J]. 中國中藥雜志, 2011, 36(9): 1235-1238.

[5]張思恒, 劉秋桂. 中草藥毒性淺析 [J]. 西北藥學(xué)雜志, 2010, 25(4): 319-320.

[6]K Nishiya, T Tsujiyama, T Kimura, et al. Sesquiterpenoids fromValerianafauriei[J]. Phytochemistry, 1995, 39(3): 713-714.

[7]Sheng Lin, Tao Chen, Xiao hua Liu, et al. Iridoids and Lignans fromValerianajatamansi[J]. J Nat Prod, 2010, 73(4): 632-638.

[8]宋歌. 蜘蛛香化學(xué)成分分離及腸溶片制劑工藝研究 [D]. 北京: 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2011.

[9]Y G Chen, L L Yu, R Huang, et al. 11-methoxyviburtinal, a new iridoid fromValerianajatamansi[J]. Arch Pharm Res, 2005, 28(10): 1161-1163.

[10]王春國, 劉勇, 劉永剛，等. 高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)氧化條件下纈草素降解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)及氧化動(dòng)力學(xué)研究 [J]. 分析測(cè)試學(xué)報(bào), 2013, 32(4): 442-447.

[11]狄宏曄. 蜘蛛香治療腸易激綜合征(IBS)的物質(zhì)基礎(chǔ)研究 [D]. 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2007.

Study on the chemical constituents ofValerianajatamansiJones

SHI Jinbo, LI Ping, GAO Zengping, YAN Xingli*, WANG Baohua, YANG Beibei, TAO Siyu, WANG Yicheng, MU Fang-yuan

(Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029,China)

Abstract:ObjectiveTo study the chemical constituents of Valeriana jatamansi Jones. MethodsThe chemical compositions were separated and purified by macroporous resin AB-8, silica gels, and sephadex LH-20. NMR spectral analysis was used to identify the constituents. ResultsSeven compounds were isolated and identified as 8-acetoxyl-patchouli alcohol(1), 8-hydroxyl-pathouli alcohol(2), jatamanin A(3), 11-ethoxyviburtinal(4), baldrinal(5), 11-methoxyviburtinal(6), and deacylbaldrinal(7). ConclusionCompounds 2 was separated from Valeriana jatamansi Jones for the first time.

Key words:Valeriana jatamansi Jones.; chemical constituents; iridoid

(收稿日期：2015-11-02)

中圖分類號(hào)：R284

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1004-2407(2016)03-0225-03

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.03.002

*通信作者：閆興麗，女，博士，研究員，碩士研究生導(dǎo)師

作者簡介：施金鈸，男，碩士研究生

基金項(xiàng)目：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào)：81374044);北京中醫(yī)藥大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)自主選題在讀研究生項(xiàng)目(編號(hào)：2015-JYB-XS036)