柳沙源 徐賽群 李永勝 彭 燦 劉 豐 胡 杰

(長(zhǎng)沙醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院，長(zhǎng)沙市 410219，E-mail：sha_1991@126.com)

論著·基礎(chǔ)研究

姜辣素對(duì)小鼠醉酒預(yù)防作用的研究▲

柳沙源1徐賽群2李永勝1彭 燦1劉 豐1胡 杰1

(長(zhǎng)沙醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院，長(zhǎng)沙市 410219，E-mail：sha_1991@126.com)

目的 探討姜辣素對(duì)小鼠醉酒的預(yù)防作用。方法 (1)醉酒實(shí)驗(yàn)：40只昆明小鼠分為5組，各組分別以0.30、0.31、0.32、0.33、0.34 ml/20 g 52°瀘州老窖二曲酒灌胃，觀察各組醉酒潛伏時(shí)間、維持時(shí)間等，篩選小鼠的醉酒劑量。(2)防醉試驗(yàn)：另選昆明小鼠30只分為生理鹽水對(duì)照組、熱姜水組、姜辣素組，分別給各組小鼠以同劑量的生理鹽水、熱姜水和姜辣素液灌胃，30 min后分別以52°瀘州老窖二曲酒(0.32 ml/20 g)灌胃，測(cè)定各組小鼠醉酒率、醉酒維持時(shí)間。(3)另選昆明小鼠75只，按防醉試驗(yàn)分組、灌胃，在灌酒后30 min、1 h、1.5 h及2.0 h測(cè)定各組小鼠的血清乙醇濃度。結(jié)果 0.32 ml/20 g為小鼠醉酒的最佳劑量。姜辣素組的醉酒率最低，醉酒維持時(shí)間、各時(shí)間點(diǎn)血液乙醇濃度均低于生理鹽水對(duì)照組和熱姜水組(P<0.05)。結(jié)論 姜辣素對(duì)小鼠醉酒具有較顯著的預(yù)防作用。

姜辣素；醉酒；乙醇；小鼠；預(yù)防

生姜是一種香辛調(diào)味料，也是亞洲傳統(tǒng)藥食兩用植物。姜辣素是姜中一些具有辣味物質(zhì)的總稱，為多種物質(zhì)組成的混合物。姜辣素是生姜特征性辛辣風(fēng)味的主要呈味物質(zhì)，在調(diào)味品、保健食品、藥品、化妝品等的制造中應(yīng)用廣泛，具有良好的應(yīng)用前景和社會(huì)效益[1]。姜辣素具有多種藥用價(jià)值，如健胃與抗胃潰瘍、保肝利膽、抗氧化等[2-6]。在中藥偏方中生姜被認(rèn)為具有良好的解酒效果，以熱姜水代茶飲用，可加速血液流通，消化體內(nèi)酒精，還可在熱姜水里加適量蜜糖，可緩解或消除醉酒[7]。但生姜的解酒功效僅出現(xiàn)在中藥偏方里，未見有相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)其解酒功效。姜辣素是生姜的辣味物質(zhì)，也是主要的生物活性成分及功能成分，提示姜辣素可能是生姜解酒功效的關(guān)鍵成分。本實(shí)驗(yàn)觀察姜辣素對(duì)小鼠醉酒預(yù)防作用，探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要材料及儀器 昆明小鼠145只，無特定病原體級(jí)，體重(20±2)g，雌雄各半，由長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)：SCXK(湘)-2014-0011。昆明小鼠灌胃用酒為市售瀘州老窖二曲酒(52度)。生姜配方顆粒由華潤(rùn)三九醫(yī)藥股份有限公司提供(批號(hào)1308002H)。姜辣素為5%的黃棕色粉末，由西安小草植物科技有限公司提供(批號(hào)XC140510)。全自動(dòng)生化分析儀(BS-320)為深圳邁瑞生產(chǎn)；臺(tái)式離心機(jī)(TDZ4A-WS)為湖南湘儀實(shí)驗(yàn)室儀器開發(fā)有限公司生產(chǎn)；自動(dòng)內(nèi)校電子分析天平(FB224)為上海瞬宇恒平科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；渦旋儀(SK-1)為常德澳華儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 昆明小鼠醉酒實(shí)驗(yàn)：取40只雌雄各半的昆明小鼠，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為模型1組、模型2組、模型3組、模型4組、模型5組，每組8只。試驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水。試驗(yàn)時(shí)各模型組小鼠分別給以0.30 ml/20 g、0.31 ml/20 g、0.32 ml/20 g、0.33 ml/20 g、0.34 ml/20 g的瀘州老窖二曲酒灌胃，記錄各模型組醉酒小鼠只數(shù)、死亡小鼠只數(shù)；計(jì)算各模型組醉酒潛伏時(shí)間及醉酒維持時(shí)間，最后根據(jù)結(jié)果篩選出合理的小鼠醉酒劑量。昆明小鼠醉酒標(biāo)準(zhǔn)：昆明小鼠用酒灌胃后，將其背向下放置鼠籠內(nèi)，若其背向下姿勢(shì)保持30 s以上，即為醉酒。醉酒潛伏時(shí)間：灌胃完成后至醉酒的時(shí)間。醉酒維持時(shí)間：翻正反射消失至恢復(fù)的時(shí)間。

1.2.2 姜辣素液、熱姜水溶液配置：將姜辣素粉末按每只小鼠1 600 mg/kg溶于雙蒸水，配置成容積為0.2 ml的姜辣素溶液；將生姜配方顆粒按每只小鼠1 600 mg/kg，置于熱開水中沖泡，調(diào)配成容積為0.2 ml的熱姜水溶液，待水溫適度時(shí)(22℃～25℃)即可灌胃。

1.2.3 姜辣素對(duì)昆明小鼠醉酒的影響：選取昆明小鼠30只，雌雄各半，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組、熱姜水組、姜辣素組，每組10只。試驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水。各組小鼠分別灌胃生理鹽水0.2 ml、熱姜水溶液0.2 ml、姜辣素溶液0.2 ml，30 min后，各組均給予52度瀘州老窖二曲酒0.32 ml/20 g灌胃。觀察記錄小鼠10 h內(nèi)醉酒率及醉酒維持時(shí)間。

1.2.4 昆明小鼠血清乙醇含量測(cè)定：選取昆明小鼠75只，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為3大組，即A組、B組、C組，每組25只。將各大組再分別分為5小組，每小組5只。試驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水。首先將A、B、C組分別灌胃生理鹽水0.2 ml、熱姜水溶液0.2 ml、姜辣素溶液0.2 ml，30 min后各組再分別灌胃52度瀘州老窖二曲酒0.32 ml/20 g。灌酒后30 min，將各大組第1小組的5只昆明小鼠摘眼球取血，置入含肝素抗凝的1.5 ml離心管中，37℃水浴靜置15 min，3 000 r/min離心15 min，取血清。然后分別在灌酒后1 h、1.5 h、2 h、3 h后，再分別將各大組的第2小組、第3小組、第4小組、第5小組的小鼠按以上同樣方法取小鼠血清，使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定小鼠血清乙醇含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，計(jì)量資料以(x±s)表示，多組均數(shù)比較采用方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各模型組小鼠醉酒標(biāo)準(zhǔn)的確定 模型3組、4組、5組小鼠全部醉酒，模型3組無小鼠死亡，模型4組、5組小鼠分別死亡1只、2只小鼠；模型3組的潛伏時(shí)間、醉酒維持時(shí)間在5組中居中，因此小鼠醉酒劑量選擇0.32 ml/20 g 最佳。見表1。

表1 不同給酒劑量致小鼠醉酒試驗(yàn)結(jié)果(x±s)

2.2 姜辣素對(duì)昆明小鼠醉酒的影響 對(duì)照組、熱姜水組小鼠全部醉酒，醉酒率均為100%，而姜辣素組10只小鼠中有8只醉酒，醉酒率為80.0%，3組醉酒率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.286，P=0.117)。對(duì)照組、熱姜水組和姜辣素組的醉酒維持時(shí)間分別為(140.05±1.80)min、(109.69±2.51)min、(84.24±1.51)min；3組醉酒維持時(shí)間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1 981.411，P<0.05)；對(duì)照組的醉酒維持時(shí)間最長(zhǎng)、姜辣素組的醉酒維持時(shí)間最短(P<0.05)。

2.3 各組小鼠血清乙醇濃度比較 在各時(shí)間點(diǎn)，C組的血清乙醇濃度均低于B組、A組(P<0.05)，B組血清乙醇濃度低于A組(P<0.001)；見表2。

表2 各組小鼠血清乙醇濃度比較(x±s，g/L)

注：與A組比較，*P<0.05，與B組比較，#P<0.05。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)采用相同劑量的生理鹽水、熱姜水、姜辣素預(yù)防小鼠醉酒，觀察小鼠醉酒率、醉酒維持時(shí)間以及小鼠血清中乙醇濃度，結(jié)果顯示，姜辣素組醉酒維持時(shí)間和灌酒后各時(shí)間點(diǎn)血清乙醇濃度均低于熱姜水組、生理鹽水對(duì)照組(P<0.05)，并且熱姜水組低于生理鹽水組(P<0.05)，說明姜辣素與熱姜水都能降低醉酒維持時(shí)間和小鼠血清乙醇濃度，但姜辣素的功效更顯著。

目前，研究防治急性酒精中毒的核心是降低醉酒者血液中的乙醇及其代謝產(chǎn)物的濃度、減輕各器官受到的損傷。乙醇在機(jī)體被吸收后，通過乙醇脫氫酶的催化將其脫氫后氧化為乙醛。乙醛具有較強(qiáng)毒性，是導(dǎo)致肝損傷的直接作用因素[8]，它能使肝細(xì)胞內(nèi)線粒體受損，在黃嘌呤氧化酶作用下形成超氧化物，引起脂質(zhì)的過氧化，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷。另外，乙醛還與蛋白質(zhì)結(jié)合形成乙醛復(fù)合體，導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能紊亂，進(jìn)而使肝細(xì)胞再次受損[9]。乙醛在肝臟內(nèi)經(jīng)乙醛脫氫酶繼續(xù)被氧化成乙酸，最后以乙酰輔酶A的形式進(jìn)入三羧酸循環(huán)。乙醇代謝的整個(gè)過程中有大量活性氧生成，使得肝細(xì)胞脂質(zhì)氧化反應(yīng)而引起肝細(xì)胞損傷[10]。根據(jù)乙醇在機(jī)體內(nèi)的代謝特點(diǎn)，解酒藥物主要從兩方面發(fā)揮作用：(1)抑制酒精的胃腸吸收，加強(qiáng)乙醇在胃腸道的首過效應(yīng)；(2)藥物直接作用于肝代謝酶系統(tǒng)，加快乙醇及其代謝產(chǎn)物的清除速率，減輕其對(duì)組織細(xì)胞的損害[11]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示姜辣素能有效縮短小鼠醉酒率及醉酒維持時(shí)間并降低血清乙醇濃度，提示姜辣素能促進(jìn)乙醇在小鼠體內(nèi)的代謝，具有明顯的防醉和解酒效果。

目前國(guó)內(nèi)外對(duì)姜辣素藥用價(jià)值的研究已經(jīng)較為透徹，姜辣素的主要作用有：(1)健胃、防醉功效。姜辣素中的姜酚和姜烯對(duì)80%乙醇造成的胃細(xì)胞損害有明顯保護(hù)作用[2]，并且可明顯抑制乙醇引起的胃損害。提示姜辣素可能通過保護(hù)胃細(xì)胞的功能從而抑制酒精在胃腸道的吸收，降低血液中乙醇濃度，加強(qiáng)乙醇在胃腸道的首過效應(yīng)而起到一定的防醉效果；(2)抗氧化功效。超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶均為機(jī)體重要的抗氧化酶，其中，超氧化物歧化酶專一性地清除超氧陰離子自由基，有明顯的抗脂質(zhì)過氧化物作用。過氧化氫酶能阻止H2O2轉(zhuǎn)變?yōu)椤H，并使之分解為H2O和O2。谷胱甘肽過氧化物酶也能催化H2O2的分解，降低機(jī)體內(nèi)·OH的水平，從而保護(hù)生物膜[12]。姜辣素的主要活性物質(zhì)為姜酚，由于姜酚分子包含創(chuàng)木酚基結(jié)構(gòu)，使其具有很強(qiáng)的抗氧化性，其抗氧化效果強(qiáng)于維生素E和丁基羥基茴香醚，能明顯地清除生物體中羥基自由基和超氧自由基，并降低肝腦組織中的脂質(zhì)過氧化物[7]。這提示姜辣素可能促進(jìn)乙醇代謝過程中大量活性氧的清除，從而降低肝細(xì)胞的脂質(zhì)過氧化程度，進(jìn)而起到保護(hù)肝臟的作用。

綜上所述，姜辣素具解酒功效，對(duì)酒精性肝損傷可能具有保護(hù)作用，其解酒功效可能是由其活性成分姜辣素發(fā)揮作用。

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Preventive effect of gingerol on temulentia mice

LIUSha-yuan1,XUSai-qun2,LIYong-sheng1,PENGCan1,LIUFeng1,HUJie1

(ClinicalCollege,ChangshaMedicalUniversity,Changsha410219,China)

Objective To explore the preventive effect of gingerol on temulentia mice.Methods ① Temulentia experiment:Forty Kunming mice were divided into five groups,and the five groups were intragastric administrated 52° Luzhou Laojiao Erqu Liquor with the dosages of 0.30,0.31,0.32,0.33 and 0.34 ml/20 g,respectively.The latent time and duration of temulentia were observed,and then the optimal dosage for temulentia in mice was determined.② Temulentia prevention experiment:Another thirty Kunming mice were divided into normal saline control group,hot ginger aqueous group and gingerol group,and the mice in these three groups were intragastric administrated the same dosages of normal saline,hot ginger aqueous and gingerol,respectively,and were intragastric administrated 52° Luzhou Laojiao Erqu Liquor(0.32 ml/20 g) 30 minutes later.Then the incidence of temulentia and temulentia duration were determined in each group.③ Another 75 Kunming mice were selected,and were grouped and accepted intragastric administration using the same method as the temulentia prevention experiment.The serum ethanol concentration was detected among the rats in each group at 30 minutes,and 1,1.5 and 2 hours after administration of liquor.Results The optimal dosage for temulentia was 0.32 ml/20 g in mice.Gingerol group gained the lowest incidence of temulentia as well as lower temulentia duration and lower serum ethanol concentration at each time point compared to normal saline control group and hot ginger aqueous group(P<0.05).Conclusion Gingerol has significnant preventive effects on temulentia mice.

Gingerol,Temulentia,Ethanol,Mouse,Prevention

2013年湖南省大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)和創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目(湘教通〔2013〕191號(hào)-427)

柳沙源(1992～)，男，本科，研究方向：臨床用藥。

徐賽群(1983～)，女，本科，講師，研究方向：臨床呼吸內(nèi)科疾病，E-mail：1091153194@qq.com。

R 282.71

A

0253-4304(2016)01-0014-03

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.01.04

2015-09-11

2015-12-08)