林 波

江蘇護理職業(yè)學(xué)院 江蘇省淮安市 223300

肉桂酸鍺對小鼠S180瘤Ki-67表達的影響

林 波

江蘇護理職業(yè)學(xué)院 江蘇省淮安市 223300

目的：探討肉桂酸鍺對小鼠S180瘤細胞增值活性的影響。方法：建立小鼠S180移植瘤模型，應(yīng)用肉桂酸鍺灌胃給藥后，通過免疫組織化學(xué)觀察腫瘤細胞的Ki-67的表達情況。結(jié)果：觀察肉桂酸鍺各劑量組瘤細胞較NS組變化明顯，肉桂酸鍺高、中、低劑量組陽性表達率分別為70%、60%、70%，CTX組為60%，均低于NS組（90%）與NS組比較明顯降低（P＜0.05）。結(jié)論：肉桂酸鍺能明顯抑制S180移植瘤的Ki-67的表達。

肉桂酸鍺；增值活性；Ki-67

1 實驗材料和方法

荷瘤小鼠模型的建立 取傳代接種后7-8天生長良好的S180腹水瘤源小鼠,無菌條件下從腹腔抽出瘤液（經(jīng)臺盼藍染色法檢驗瘤細胞活性>95%）,用滅菌生理鹽水調(diào)整瘤細胞數(shù)至4.0X107/ml,每鼠右前腋皮下接種0.2ml瘤細胞懸液，形成實體瘤。將接種了S180瘤的小鼠隨機分為5組，每組10只，分別為生理鹽水陰性對照組（NS組）、環(huán)磷酰胺陽性對照組（CTX組)（2.5mg/ ml）和肉桂酸鍺實驗組（低、中、高劑量組），其中低劑量組為0.1 mg/ml、中劑量組為0.2 mg/ml、高劑量組為0.4 mg/ml。接種次日同時灌胃給藥，給藥量 0.2ml/20g，每日給藥一次，連續(xù)10日，停藥次日斷椎處死，解剖剝離皮下瘤體。

2 實驗結(jié)果判定

2.1 染色結(jié)果評定標準

Ki-67陽性表達定位于腫瘤細胞的細胞核。對免疫組化結(jié)果，采用半定量計分法判定，即根據(jù)陽性腫瘤細胞所占比例和染色強度進行綜合評分。雙人雙盲法觀察切片，拍照留取典型免疫組化照片。每個標本切片中選高倍（40×10）視野5個，以該視野內(nèi)陽性細胞百分數(shù)的均值作為該標本的陽性細胞百分數(shù)。

2.2 染色評定結(jié)果

Ki-67免疫組化標記結(jié)果顯示，NS組陽性率最高，達90%，CTX組60%，肉桂酸鍺實驗組陽性表達率分別為70%、60%、70%，與NS組比較明顯降低（P<0.05）。（見表1）。

表1：各組瘤組織中Ki-67表達的比較

3 討論

1983年，Gerdes等發(fā)現(xiàn)在增殖細胞中有一種特殊的核抗原表達,且此種抗原在細胞分裂期表達增加,于M期達高峰, 而度過分裂周期后迅速下降，這就是Ki-67。研究表明,Ki-67 能夠可靠而迅速地反映惡性腫瘤細胞的增殖率, 其表達的高低對評價多種惡性腫瘤細胞的增殖狀態(tài)、生物學(xué)行為都具有重要意義 。邱胡越等[1]在對ER陽性且HER-2陰性乳腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，Ki-67在該種腫瘤復(fù)發(fā)組的陽性率較高，預(yù)后差。而非復(fù)發(fā)組的陽性率較低，說明Ki-67的表達與腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān)。龐旭峰[2]報道肝細胞癌P53和Ki-67蛋白表達與肝切除術(shù)后預(yù)后關(guān)系密切，有助于肝癌術(shù)后預(yù)后的判斷。癌基因的檢測及增殖細胞核抗原的檢測對判斷該腫瘤生物學(xué)行為有意義。目前已成為評價細胞增殖活性的特異性指標。

本實驗應(yīng)用免疫組化S-P法，對Ki-67蛋白進行免疫組化標記，檢測其與各實驗組腫瘤組織細胞增殖情況的關(guān)系。結(jié)果顯示，肉桂酸鍺高、中、低劑量組Ki-67表達率分別為70%，60%，70%，與NS組比較，具有顯著性差異（P<0.05）。說明肉桂酸鍺可能通過抑制腫瘤細胞的分裂而起到抑制腫瘤生長的作用。

[1]胡越，賈衛(wèi)娟，譚翠，顧然，楊雅平，劉鳳桃，蘇逢錫.Ki-67、PgR在ER陽性且HER-2陰性乳腺癌Luminal分型中的意義[J].嶺南現(xiàn)代臨床外科,2016(02).

[2]龐旭峰.肝細胞癌P53和Ki-67蛋白表達與肝切除術(shù)后預(yù)后的關(guān)系[D].青島：青島大學(xué),2012.

[3]高紹儀.氯基酸堵氧化物的藥物活性[J].世界醫(yī)學(xué)信息(有機鍺專輯),1990:47-54.