楊瑞琦 王鐘焰

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院肛腸外科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

結(jié)腸腺癌組織Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白表達(dá)及意義

楊瑞琦 王鐘焰

(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第三醫(yī)院肛腸外科，黑龍江 齊齊哈爾 161000)

目的 檢測(cè)結(jié)腸腺癌中絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員Aurora-B和靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)的表達(dá)，分析其臨床意義。方法 85例結(jié)腸腺癌患者術(shù)后的蠟塊組織作為觀察組，30例結(jié)腸黏膜上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組，非腫瘤性的結(jié)腸黏膜組織30例作為正常對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)三組中Aurora-B和TPX-2的表達(dá)。結(jié)果 三組中Aurora-B和TPX-2陽(yáng)性率差異顯著。觀察組中Aurora-B和TPX-2的陽(yáng)性率與腫瘤的分化程度密切相關(guān)，Aurora-B的陽(yáng)性率與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，TPX-2的陽(yáng)性率與腫瘤的Ki67增殖指數(shù)密切相關(guān)。結(jié)論 Aurora-B和TPX-2在結(jié)腸腺癌中高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤形成的重要因素，二者異常表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。

結(jié)腸腺癌；Aurora-B；靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)

結(jié)腸腺癌為黏膜腺體異型增生(上皮內(nèi)瘤變)后的繼發(fā)性病變，病變以侵襲肌層為特征，在此過(guò)程中，相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)失調(diào)，對(duì)促進(jìn)腫瘤形成有重要影響〔1,2〕。絲氨酸/蘇氨酸激酶家族被認(rèn)為與腫瘤性病變有關(guān)，其共包括3個(gè)成員，Aurora-B是家族中的經(jīng)典成員，參與多種生物學(xué)過(guò)程，在調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂的中心體調(diào)節(jié)、紡錘體形成、染色體分離等過(guò)程中發(fā)揮重要作用〔3,4〕。靶向Xklp2靶蛋白(TPX-2)是一個(gè)受細(xì)胞周期嚴(yán)格調(diào)控的細(xì)胞核增殖蛋白，參與細(xì)胞有絲分裂的紡錘體微管功能，近年研究認(rèn)為Aurora-B和TPX-2可能在腫瘤形成和進(jìn)展中有重要促進(jìn)作用〔5,6〕。本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)腸腺癌組織Aurora-B和TPX-2的表達(dá)，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年1～12月我院結(jié)腸腺癌住院患者85例為觀察組，均行根治手術(shù)，術(shù)后經(jīng)病理醫(yī)師確診及明確分型，同時(shí)符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中男44例，女41例；年齡36～83歲，平均(57.2±9.0)歲。30例結(jié)腸黏膜上皮內(nèi)瘤變組織作為對(duì)照組，其中男15例，女15例；年齡34～75歲，平均(53.6±8.6)歲。非腫瘤性的結(jié)腸黏膜組織30例作為正常對(duì)照組，其中男15例，女15例；年齡38～78歲，平均(56.4±8.5)歲。三組常規(guī)資料無(wú)明顯差異。

1.2 Aurora-B和TPX-2的檢測(cè)方法 術(shù)后組織均常規(guī)取材，并應(yīng)用甲醛溶液固定，石蠟包埋后切取4 μm切片，烤片20 min后，行Aurora-B和TPX-2蛋白的檢測(cè)。Aurora-B和TPX-2的檢測(cè)均采用免疫組化二步法，應(yīng)用二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色。

1.3 Aurora-B和TPX-2結(jié)果的判讀 Aurora-B和TPX-2均以細(xì)胞核中出現(xiàn)淺黃色到深棕色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，選擇上皮細(xì)胞染色集中的區(qū)域進(jìn)行觀察，選擇400倍的視野共3個(gè)分別計(jì)數(shù)，計(jì)算陽(yáng)性率，取平均值。以陽(yáng)性率<5%為陰性，以陽(yáng)性率≥5%為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或線性相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 3組Aurora-B和TPX-2陽(yáng)性率的比較 3組Aurora-B和TPX-2陽(yáng)性率差別顯著(P<0.001)。見表1。

表1 各組Aurora-B和TPX-2陽(yáng)性表達(dá)比較〔n(%)〕

組別nAurora?BTPX?2觀察組8536(42 4)46(54 1)對(duì)照組306(20 0)8(26 7)正常對(duì)照組302(6 7)3(10 0)χ2/P值11 25/<0 00110 24/<0 001

2.2 觀察組Aurora-B和TPX-2 在不同臨床病理特征中比較 觀察組Aurora-B和TPX-2陽(yáng)性率與腫瘤分化程度密切相關(guān)，觀察組Aurora-B陽(yáng)性率與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，TPX-2陽(yáng)性率與腫瘤Ki67增殖指數(shù)密切相關(guān)。見表2。

表2 不同臨床病理特征的觀察組Aurora-B和TPX-2表達(dá)〔n(%)〕

臨床特征nAurora?BTPX?2分化程度 高399(23 1)13(33 3) 中3419(55 9)23(67 6) 低128(66 7)10(83 3) χ2值 P值8 2680 0048 9870 002淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 無(wú)6020(33 3)30(50 0) 有2516(64 0)16(64 0) χ2值 P值6 7970 0091 3930 340Ki67增殖指數(shù) <25%2412(50 0)8(33 3) ≥25%6124(39 3)38(62 3) χ2值 P值0 8010 4665 8180 028

3 討 論

結(jié)腸腺癌是高增殖性腫瘤，病變形成時(shí)腺管異型，在肌層出現(xiàn)明顯的浸潤(rùn)性生長(zhǎng)，腫瘤是高增殖性病變，在增殖過(guò)程中，有絲分裂過(guò)程中的偏差也可以導(dǎo)致基因組的不穩(wěn)定，從而引發(fā)腫瘤性的失控性增生〔7,8〕。本實(shí)驗(yàn)提示Aurora-B和TPX-2異常表達(dá)可以促進(jìn)結(jié)腸黏膜腺上皮的異型增生、癌變。二者參與腫瘤由幼稚到成熟的形成過(guò)程，二者高表達(dá)時(shí)提示腫瘤處于幼稚狀態(tài)，此時(shí)幼稚的細(xì)胞異型性大，細(xì)胞核染色深，細(xì)胞出現(xiàn)明顯的分化失成熟的現(xiàn)象。Aurora-B高表達(dá)可能提示或預(yù)示著淋巴道播散，此時(shí)腫瘤細(xì)胞播散的潛能升高，手術(shù)不易切除干凈，臨床預(yù)后可能較差。TPX-2高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的分裂和繁殖過(guò)程，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增生，腫瘤體積增大。Aurora-B是有絲分裂中組蛋白H3的10位絲氨酸化所必需的激酶，對(duì)染色體的濃縮非常重要。Aurora-B有調(diào)節(jié)動(dòng)力的功能，是糾正染色體排列和分離、調(diào)整紡錘體檢查點(diǎn)功能和胞質(zhì)分裂所必需的〔9,10〕。Aurora-B被認(rèn)為是染色體的過(guò)客蛋白，其主要定位于有絲分裂早期的染色體著絲粒的相關(guān)分布區(qū)域，在細(xì)胞分裂的后期則從著絲粒移至紡錘體赤道板的微管的位置，隨著紡錘體的有效延伸，細(xì)胞開始出現(xiàn)分裂〔11,12〕。有研究認(rèn)為Aurora-B可以聚集于紡錘體中央裂溝的部位，并可以向內(nèi)移動(dòng)，最終在中間體處形成聚集〔13〕。有研究認(rèn)為Aurora-B可以與3個(gè)染色體過(guò)客蛋白-INCENP、survivin和Borealin進(jìn)行結(jié)合發(fā)揮作用〔14〕，因此Aurora-B可能發(fā)揮相關(guān)蛋白的協(xié)同作用，共同促進(jìn)腫瘤性病變的形成。TPX-2基因是一個(gè)分子量為100 kD的核增殖相關(guān)蛋白，位于染色體20q11.2，其表達(dá)狀態(tài)受細(xì)胞周期的嚴(yán)格調(diào)控，有研究認(rèn)為TPX-2只在G1-S期交界期被檢測(cè)到，在細(xì)胞分裂完成后則消失〔15〕。而在S期和G2期，TPX-2分布在細(xì)胞核，在分裂期細(xì)胞可以與有絲分裂的紡錘體密切結(jié)合，動(dòng)力蛋白XkIp2靶向附著于紡錘體的微管，從而保證正常的紡錘體極性〔16〕。TPX-2在人體組織，特別是腫瘤中的過(guò)度表達(dá)可以引起中心體擴(kuò)增，異倍體形成，促進(jìn)腺上皮組織的癌變和惡性腫瘤的進(jìn)展〔17〕。劉紅春等〔18〕觀察TPX-2在食管鱗癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)TPX-2在正常黏膜、癌旁不典型增生和癌組織中的表達(dá)率依次增加，認(rèn)為TPX-2蛋白異常表達(dá)可能是食管鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)因素，TPX-2的檢測(cè)可望成為食管鱗癌早期診斷指標(biāo)。因此Aurora-B和TPX-2高表達(dá)對(duì)腫瘤的形成和進(jìn)展可能有一定的提示作用〔17，19，20〕。

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〔2015-04-18修回〕

(編輯 苑云杰)

齊齊哈爾市科技局社會(huì)發(fā)展計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(No.SFGG-201313)

楊瑞琦(1983-)，男，主治醫(yī)師，碩士，主要從事肛腸疾病研究。

R735

A

1005-9202(2016)24-6169-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.24.059