楊云芝胡俊武（ 南充市中醫(yī)醫(yī)院，四川 南充 637000； 太極集團(tuán)四川南充制藥有限公司，四川 南充 637000）

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厚樸有效成分厚樸酚及和厚樸酚最佳提取溫度的研究

楊云芝1胡俊武2
（1 南充市中醫(yī)醫(yī)院，四川 南充 637000；2 太極集團(tuán)四川南充制藥有限公司，四川 南充 637000）

目的 探索厚樸飲片中有效成分厚樸酚及和厚樸酚的最佳提取溫度。方法 通過不同溫度的乙醇水溶液滲濾厚樸粗顆粒，測定厚樸酚及和厚樸酚含量并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。結(jié)果 在45～50 ℃范圍的厚樸酚及和厚樸酚含量最高。結(jié)論 45～50 ℃是厚樸酚及和厚樸酚的最佳提取溫度。

厚樸酚；和厚樸酚；提取溫度

厚樸主要含有木脂素類成分厚樸酚及其異構(gòu)體和厚樸酚等有效成分［1］，兩種成分均溶于常用的有機(jī)溶劑及苛性堿［2］。在含厚樸乙醇制劑配制時(shí)發(fā)現(xiàn)，氣溫較高的夏秋季測定厚樸酚及和厚樸酚的含量明顯高于冬春季，可見環(huán)境溫度對提取的影響較大。本文探索厚樸有效成分厚樸酚及和厚樸酚的乙醇提取最佳溫度，為含厚樸制劑質(zhì)量控制提供參考依據(jù)，現(xiàn)將實(shí)驗(yàn)結(jié)果予以報(bào)道。

1　材料與儀器

厚樸飲片，厚樸酚、和厚樸酚對照品；60%乙醇；高效液相色譜儀；化學(xué)試劑為分析純、色譜純。

2　方法與結(jié)果

2.1滲濾液制備：實(shí)驗(yàn)地秋冬季節(jié)，環(huán)境溫度約12～16 ℃。取厚樸飲片粉碎為10目粗顆粒150 g，置改良后可升溫的滲濾筒進(jìn)行滲濾，加入60%乙醇150 mL，然后用經(jīng)洗凈消毒的薄膜蓋嚴(yán)浸潤24 h，再將浸潤后的厚樸分別裝進(jìn)5個(gè)滲漉筒，裝筒時(shí)松緊適宜，防止堵筒。向滲漉筒內(nèi)加入60%乙醇約300 mL淹過藥面。打開放濾液的螺旋夾，待藥液流出適量無氣泡排除為止，夾緊管口，倒回藥液，加蓋。按照40 ℃、45 ℃、50 ℃、55 ℃、60 ℃分別恒溫加熱，浸漬24 h后滲漉。按0.7～0.8 mL/min的滲漉速度進(jìn)行滲漉，收集不同溫度的滲濾液［3］。

2.2含量測定

2.2.1供試品制備：精密量取滲濾液5 mL，蒸干，用聚酰胺柱層析，依次用0.5%NaOH、0.8% NaOH、1.0% NaOH洗脫，收集0.8% NaOH 和1.0% NaOH洗脫液，合并，加鹽酸調(diào)pH值至酸性，析出結(jié)晶［2］，棄去NaOH液，結(jié)晶加甲醇轉(zhuǎn)移至10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.2對照品制備：取厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每1 mL含厚樸酚40 μg、和厚樸酚24 μg的溶液，即得［4］。

2.2.3測定波長選擇：參照《中國藥典》2010年版一部“厚樸”標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下選用294 nm作為檢測波長。

2.2.4色譜條件的選擇：參照《中國藥典》2010年版一部“厚樸”標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)下，選擇十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（78∶22）為流動(dòng)相。理論板數(shù)按厚樸酚峰計(jì)算應(yīng)不低于3800。

2.3方法學(xué)驗(yàn)證

2.3.1專屬性試驗(yàn)：取厚樸酚和和厚樸酚對照品，加甲醇分別制成每1 mL含厚樸酚40 μg、和厚樸酚24 μg的溶液，作為對照品溶液；取60%乙醇作為的陰性溶液；再去40 ℃滲濾液按供試品制備方法制成供試品。精密吸取以上三種溶液10 μL注入色譜儀，記錄譜圖，由圖可見，陰性樣品供試液色譜圖中，在厚樸酚、和厚樸酚對照品色譜峰相應(yīng)保留時(shí)間處無干擾峰；對照品溶液色譜圖中，在厚樸酚、和厚樸酚對照品色譜峰相應(yīng)保留時(shí)間處檢出相應(yīng)的色譜峰。

2.3.2加樣回收試驗(yàn)：精密量取厚樸滲濾液（40 ℃）（測得樣品含厚樸酚、和厚樸酚總量為0.58 mg/mL），分別置具塞錐形瓶中，分別精密加入5 mL、10 mL、15 mL混合對照品溶液（每1 mL含厚樸酚40 μg、和厚樸酚24 μg），平行兩份，按照供試品制備方法制得供試品。精密吸取10 μL，注入色譜儀，記錄圖譜。以厚樸酚、和厚樸酚總量計(jì)算回收率，結(jié)果平均回收率為99.48%。RSD（%）=0.58，表明回收率符合要求。

2.3.3重復(fù)性試驗(yàn)：取40 ℃滲濾液按供試品制備方法制成供試品，連續(xù)測定其厚樸酚、和厚樸酚的總量5次，計(jì)算其RSD值為1.8%，結(jié)果表明該方法重復(fù)性良好。

2.4測定法：分別精密吸取上述溶液3～5 μL，注入液相色譜儀，測定，以每1 mL含其厚樸酚、和厚樸酚的總量計(jì)算并統(tǒng)計(jì)［4］。

2.5結(jié)果：在環(huán)境溫度為12～16 ℃的情況下，通過加熱60%乙醇的方法可以提高厚樸中厚樸酚和和厚樸酚的溶出含量。且在45～50 ℃含量最高。

2.6乙醇量測定：取每種滲濾液，按照2010年版《中國藥典》附錄規(guī)定乙醇量測定方法（2）蒸餾法測定乙醇量［4］，作為控制質(zhì)量參考依據(jù)。

3　討 論

3.1厚樸藥材中除含有厚樸酚、和厚樸酚、揮發(fā)油及生物堿類有效成分外，還含有大量樹脂類成分，在制劑提取過程中極易發(fā)生揮發(fā)、氧化等物理化學(xué)變化。因此，探索合適的提取工藝是確保厚樸內(nèi)有效成分被充分提取的關(guān)鍵。

3.2因多數(shù)厚樸含醇制劑的乙醇量不會(huì)高于60%，所以本次實(shí)驗(yàn)選取60%乙醇作為的滲濾溶劑，實(shí)驗(yàn)結(jié)果只針對60%乙醇作為滲濾溶劑的情況下，其余濃度乙醇的滲濾情況有待進(jìn)一步研究。

3.3因乙醇量的測定僅為有效成分提取效果的參考依據(jù)，因此本次實(shí)驗(yàn)內(nèi)容不再具體闡述

3.4本次實(shí)驗(yàn)材料只選用單味厚樸藥材，復(fù)方制劑含厚樸有效成分的測定有待進(jìn)一步研究。

3.5本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以給含厚樸制劑的提取工藝做參考，有效的節(jié)約提取成本，增加藥材的提取效率，提高含厚樸制劑的療效。

［1］ 李家實(shí).中藥鑒定學(xué)［M］.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1995：297.

［2］ 楊云.天然藥物化學(xué)成分提取分離手冊［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社,2003：540-541.

［3］ 范碧亭.中藥藥劑學(xué)［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社,1997：101-104.

［4］ 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：一部［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010：235-附錄54.

R282.710.2

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1671-8194（2016）20-0039-01