劉 鴿 張培生 于會(huì)舉 張 倩 楊慧敏 屈勇剛*(石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832003）

豬偽狂犬病的診斷與凈化方法

劉 鴿 張培生 于會(huì)舉 張 倩 楊慧敏 屈勇剛*
(石河子大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，新疆石河子 832003）

豬偽狂犬病具有急性、熱性和高度接觸性的特點(diǎn)，且可引起多種動(dòng)物共患，豬是自然界中PRV的唯一宿主。該病對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大，嚴(yán)重制約養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。西方發(fā)達(dá)國(guó)家，主要用基因缺失標(biāo)記苗配合對(duì)應(yīng)的血清學(xué)鑒別方法對(duì)豬場(chǎng)內(nèi)PRV進(jìn)行根除。本文從豬偽狂犬病的診斷方法和凈化方法著手，對(duì)PR進(jìn)行闡述，希望本文能給養(yǎng)豬業(yè)提供一定的參考與幫助。

PRV；診斷；癥狀；凈化方法

偽狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）是引起偽狂犬病（Pseudorabies, PR）的病原。PR具有急性、熱性和高度接觸性的特點(diǎn)，且可引起多種動(dòng)物共患，豬是自然界中PRV的唯一宿主[1,2]。PRV可引起母豬流產(chǎn)，仔豬神經(jīng)癥狀、高死亡率，育肥豬發(fā)熱、呼吸道癥狀、神經(jīng)癥狀、采食量下降，還可引起公豬睪丸炎[3]，并且可使感染豬產(chǎn)生免疫抑制，給豬群造成多種傳染病的原發(fā)和繼發(fā)感染。PR的流行具有全球性，將其根除的難度非常大，給養(yǎng)豬事業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[4]，僅次于口蹄疫和豬瘟[5]。國(guó)際獸醫(yī)局〈OIE〉將PR列為B類動(dòng)物傳染病，我國(guó)將之列為二類動(dòng)物傳染病[6,7]。20 世紀(jì)90 年代，根除PR的計(jì)劃已經(jīng)在西方發(fā)達(dá)國(guó)家啟動(dòng)，并取得了較好的效果，其中豬偽狂犬病病毒gE蛋白抗體ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）的檢測(cè)方法、基因缺失苗和經(jīng)人工篩選的自然弱毒苗的應(yīng)用發(fā)揮了十分明顯的作用[8,9]。

我國(guó)已將PR列為《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃》（2012-2020年）重點(diǎn)優(yōu)先防治的動(dòng)物疫病，預(yù)計(jì)目標(biāo)為：在2020年之前將全國(guó)種豬場(chǎng)達(dá)到凈化PR的標(biāo)準(zhǔn)。近年，一些現(xiàn)代規(guī)模豬場(chǎng)已經(jīng)出現(xiàn)PRV陰性的情況，PRV的凈化取到積極效果[10,11]。西方發(fā)達(dá)國(guó)家，主要用基因缺失標(biāo)記苗配合對(duì)應(yīng)的血清學(xué)鑒別方法對(duì)豬場(chǎng)內(nèi)PRV進(jìn)行根除[12]。開啟PRV根除計(jì)劃的國(guó)家多采用gG、gE和gC三種糖蛋白鑒別診斷方法，其中的gE-ELISA鑒別方法是最常用方法。本文從豬偽狂犬病的診斷方法和凈化方法著手，對(duì)PR進(jìn)行闡述，希望本文能給養(yǎng)豬業(yè)提供一定的參考與幫助。

1　豬偽狂犬病的診斷

1.1臨床診斷方法

1.1.1流行病學(xué)方面

感染PRV發(fā)病的豬、隱性感染者、感染PRV的其他動(dòng)物都是PR的傳染源。PR沒(méi)有明顯季節(jié)性的特點(diǎn)，四季均可發(fā)生，但低溫季節(jié)更易發(fā)。PRV可感染包括豬、牛、綿羊、狗、鼠在內(nèi)的35 種常見動(dòng)物。感染PRV后的動(dòng)物會(huì)伴有發(fā)熱、奇癢（豬除外）和脊髓炎。各階段的豬都易感，仔豬高發(fā)，有同窩繼發(fā)感染的現(xiàn)象，且感染仔豬有極高死亡率。母豬感染PRV后，易流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎或死胎。有接觸傳染的途徑方式，PRV存在于豬的分泌物中（如唾液、尿液、乳汁、鼻液等），健康豬接觸了感染PRV豬的分泌物污染的環(huán)境，就會(huì)易感。PRV可水平傳播，通過(guò)呼吸道、破損的皮膚、消化道、黏膜等途徑造成感染；也可經(jīng)過(guò)公豬的精液和母豬的血液進(jìn)行垂直傳播。

1.1.2臨床癥狀

一般情況下，潛伏期為3～6 天。

新生仔豬發(fā)病較突然，體質(zhì)較弱，體溫可高達(dá)41℃～42℃，伴有拉稀、嘔吐、流涎、精神沉郁，身體發(fā)抖，共濟(jì)失調(diào)，加速呼吸。有的還伴有轉(zhuǎn)圈、肢體痙攣、抽搐、角弓反張等神經(jīng)癥狀。發(fā)病仔豬昏倒后，衰竭死亡，病程1～2 天，死亡率100%。初生仔豬極高的死亡率嚴(yán)重影響了規(guī)模豬場(chǎng)的健康快速發(fā)展，應(yīng)引起養(yǎng)殖企業(yè)的高度重視。

斷奶前后的仔豬有咳嗽、流鼻涕、呼吸障礙等癥狀，發(fā)病率較新生仔豬有下降趨勢(shì)，但也應(yīng)高度重視。

經(jīng)產(chǎn)母豬比初產(chǎn)母豬更易感，感染PRV后易出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)、產(chǎn)木乃伊胎或死胎（居多)、受胎率下降、返情率升高的現(xiàn)象，也會(huì)伴有厭食、精神沉郁、呼吸癥狀和產(chǎn)前7天左右發(fā)熱。感染PRV后的母豬多可自愈。公豬易出現(xiàn)睪丸炎，表現(xiàn)出睪丸“一側(cè)大、一側(cè)小”（這一特點(diǎn)與布病類似，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行更為準(zhǔn)確的鑒別診斷）或兩側(cè)都腫脹的現(xiàn)象，明顯降低了種公豬的種用價(jià)值。

1.1.3病例解剖特點(diǎn)

流產(chǎn)胎兒、死胎、新生弱仔和發(fā)病豬的共同特點(diǎn)是肺、腦水腫，腦膜表面充血、水腫、有輕度炎癥，腦顱腔、脊髓腔內(nèi)積液，腸系膜淋巴結(jié)有不同程度的水腫。腎臟有不同程度的土黃色，表面有較小出血點(diǎn)。感染的新生仔豬的扁桃體壞死、出血，肝臟有白色的壞死灶。斷奶仔豬有的發(fā)生腦膜出血，肺輕度水腫，腸系膜淋巴結(jié)發(fā)生輕度水腫，是平常的4 倍左右大小。感染PRV的豬有明顯呼吸道炎癥，喉頭會(huì)發(fā)生點(diǎn)狀出血，脾臟水腫變大、背面邊緣有類似鋸齒狀的血梗壞死灶，心內(nèi)膜伴有點(diǎn)狀出血，眼瞼發(fā)生明顯水腫、潮紅、眼球突出的現(xiàn)象，膀胱的黏膜發(fā)生充血或點(diǎn)狀出血，小腸和胃有炎癥發(fā)生。

1.1.4鑒別診斷方法

相似的呼吸道癥狀可見于豬肺疫、豬鏈球菌病、傳染性胸膜肺炎，且應(yīng)與豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病等進(jìn)行區(qū)分；相似度較大的神經(jīng)癥狀，要特別注意與豬瘟、仔豬水腫病、鏈球菌性腦膜炎等區(qū)分開來(lái)；流產(chǎn)、木乃伊胎、產(chǎn)死胎癥狀，應(yīng)與豬細(xì)小病毒病、藍(lán)耳病、布病、乙型腦炎等進(jìn)行區(qū)分?，F(xiàn)在豬病有混合感染的特點(diǎn)，平時(shí)應(yīng)多觀察、多總結(jié)，及時(shí)采取更為有效的鑒別方法。

1.2實(shí)驗(yàn)室診斷

實(shí)驗(yàn)室常用于PR診斷的方法有病毒分離鑒定、血清學(xué)試驗(yàn)、分子生物學(xué)方法和動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)等[13]。動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)常為兔體接種實(shí)驗(yàn)，而酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、乳膠凝集試驗(yàn)（LAT）是多數(shù)豬場(chǎng)常選用的方式。PCR檢測(cè)方法快速、準(zhǔn)確、特異性強(qiáng)，也被廣泛應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)室診斷，一般需要精密儀器或試劑，但有準(zhǔn)確的特點(diǎn)，是傳染病研究中不可缺少的重要環(huán)節(jié)。

2　豬偽狂犬病的凈化措施

PRV是高度潛伏感染的病毒，在應(yīng)激環(huán)境下易在豬群中暴發(fā)。豬偽狂犬病是危害養(yǎng)豬業(yè)最為嚴(yán)重的豬病之一，使養(yǎng)豬業(yè)遭受很大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，根除、凈化豬偽狂犬病是一項(xiàng)非常有意義的工作，但也有一定的難度，需要國(guó)家層面和養(yǎng)殖單位共同努力，才能將豬偽狂犬病控制好，甚至接近或達(dá)到根除凈化的目標(biāo)。

2.1建立健全行之有效的生物安全體系

生物安全體系對(duì)豬場(chǎng)疾病的防控意義重大。

外出和外來(lái)人員、車輛做好嚴(yán)格消毒后才可進(jìn)去本場(chǎng)，禁止將非本豬場(chǎng)的豬肉帶入，禁止在豬場(chǎng)飼養(yǎng)其他動(dòng)物。嚴(yán)格管理好出豬臺(tái)，分臟區(qū)和凈區(qū)操作。對(duì)豬場(chǎng)人、畜飲用水都要嚴(yán)格定期消毒，每年對(duì)水質(zhì)至少檢測(cè)4 次，主要檢測(cè)細(xì)菌數(shù)。堅(jiān)持自繁自養(yǎng)和全進(jìn)全出的原則。自繁自養(yǎng)對(duì)控制豬偽狂犬病的效果十分明顯，也是預(yù)防多種動(dòng)物傳染病的最為有效的措施之一。嚴(yán)禁從疫區(qū)引用新豬或精液，必須來(lái)自陰性豬場(chǎng)，且及時(shí)有效的進(jìn)行檢疫和適當(dāng)時(shí)間的隔離，并嚴(yán)格做好消毒工作，在引進(jìn)前、后兩周分別做好血清學(xué)檢查，確定無(wú)PRV 后才可在豬場(chǎng)使用。及時(shí)有效的控制豬場(chǎng)內(nèi)諸如老鼠、蚊子、蒼蠅等有害生物，且應(yīng)采取有效措施禁止鳥類進(jìn)入豬場(chǎng)。制定科學(xué)嚴(yán)格的消毒程序，并嚴(yán)格執(zhí)行。及時(shí)有效處理病死豬，采用無(wú)害化處理的方法，如深埋。

2.2凈化原則和方法

用基因缺失苗對(duì)豬群進(jìn)行免疫，定期檢測(cè)gE抗體，及時(shí)發(fā)現(xiàn)被野毒感染的豬，并將其淘汰。逐漸用無(wú)PRV感染的豬群進(jìn)行擴(kuò)群?？刂坪蛢艋i偽狂犬病可用以下“三段法”。

準(zhǔn)備階段：先對(duì)待凈化的豬群進(jìn)行抗體檢測(cè)和鑒別診斷，徹底了解該豬群的免疫情況和疾病流行特點(diǎn)。采用豬偽狂犬gE基因缺失苗進(jìn)行全免。

控制階段：至少每半年對(duì)豬群進(jìn)行抽樣檢查，確定并淘汰感染PRV的豬。

強(qiáng)化措施：對(duì)檢出的陰性健康豬群再次進(jìn)行抽樣檢查，淘汰不合格的豬。及時(shí)淘汰陽(yáng)性個(gè)體。

也可采取以下“四法凈化措施”。

“淘汰擴(kuò)群法”：在溫暖季節(jié)（PR發(fā)病率較低）或豬價(jià)較低的階段，對(duì)豬場(chǎng)的設(shè)備、豬舍、道路進(jìn)行徹底消毒，空一段時(shí)間后再進(jìn)行二次消毒。最后再引進(jìn)無(wú)PRV感染的豬群。該方法簡(jiǎn)便，成功率高，但付出的成本很高。

“隔離后代法”：對(duì)早期斷奶的仔豬進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)，將無(wú)PRV感染的仔豬隔離到確定無(wú)PRV的清潔區(qū)進(jìn)行飼養(yǎng)。此種方法，對(duì)凈化多種疾病都是比較有效的。使用此法的前提是，產(chǎn)仔母豬沒(méi)有感染PRV，所以應(yīng)及時(shí)對(duì)母豬進(jìn)行檢測(cè)。

“檢測(cè)淘汰法”：多次對(duì)豬場(chǎng)的所有豬進(jìn)行PRV野毒抗體檢測(cè)，及時(shí)淘汰陽(yáng)性個(gè)體，再引用PRV野毒陰性的種豬進(jìn)行擴(kuò)群。該種方法簡(jiǎn)便，但不適合于PRV野毒陽(yáng)性率高的豬場(chǎng)，檢測(cè)費(fèi)用較高。

“管理檢測(cè)法”：加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，改善環(huán)境衛(wèi)生，減少飼養(yǎng)過(guò)程中的應(yīng)激（如可根據(jù)各豬場(chǎng)的具體情況降低飼養(yǎng)密度），科學(xué)合理地應(yīng)用生物安全措施，及時(shí)開展基因缺失弱毒苗的接種工作。還可根據(jù)豬場(chǎng)具體情況，采用改良模式，對(duì)留用的后備豬注射1頭份偽狂靜。對(duì)引種的豬在3周后進(jìn)行加強(qiáng)免疫。此種方法簡(jiǎn)單、成本低，更適合中國(guó)的實(shí)際情況，且效果較好。

2.3種豬和種豬場(chǎng)根除PRV的措施

（1）對(duì)沒(méi)有進(jìn)行免疫接種豬場(chǎng)的豬群進(jìn)行血清學(xué)檢查，及時(shí)發(fā)現(xiàn)PRV抗體陽(yáng)性的個(gè)體，并與陰性個(gè)體分群飼養(yǎng)。然后使用基因缺失苗對(duì)各豬群進(jìn)行免疫接種，間隔5周后，再免疫一次。以后，陰性個(gè)體半年免疫一次，陽(yáng)性個(gè)體每4個(gè)月免疫一次，每半年進(jìn)行一次血清學(xué)鑒別檢查。逐漸減少PRV野毒感染的豬群，最后徹底根除PR。

（2）對(duì)已經(jīng)免疫過(guò)的豬場(chǎng)，強(qiáng)調(diào)要使用基因缺失苗。每4個(gè)月免疫一次，每半年進(jìn)行一次血清學(xué)檢測(cè)，一步步地淘汰PRV野毒感染的豬群。

（3）經(jīng)免疫的種豬產(chǎn)下的欲留作種用的仔豬，在100 天時(shí)做一次血清學(xué)檢測(cè)，抗體陰性個(gè)體留作種用。

（4）對(duì)正在暴發(fā)PR的豬場(chǎng)來(lái)說(shuō)，應(yīng)對(duì)種豬進(jìn)行兩次間隔4～6個(gè)月的基礎(chǔ)免疫外，配種前、產(chǎn)前1個(gè)月各應(yīng)使用單基因缺失苗進(jìn)行加強(qiáng)免疫一次。其中，對(duì)仔豬使用基因缺失苗進(jìn)行免疫的效果顯著。

（5）對(duì)新引入的種豬必須進(jìn)行科學(xué)合理的檢疫，且應(yīng)引進(jìn)PRV抗體陰性的個(gè)體。進(jìn)入本場(chǎng)前，應(yīng)進(jìn)行2 個(gè)月左右的隔離，最后經(jīng)檢查安全后，方可合群。

（6）應(yīng)對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，如使用2%左右的氫氧化鈉溶液對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行消毒。消毒時(shí)間，最好選擇天氣較好、日照較好的時(shí)候進(jìn)行。

3　小結(jié)

豬偽狂犬病是制約養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要因素，及時(shí)對(duì)豬群進(jìn)行免疫并采取及時(shí)有效的綜合防治措施是預(yù)防該病的重要手段。對(duì)檢出的PRV野毒感染的豬群進(jìn)行隔離、淘汰，可起到凈化PR的作用。豬偽狂犬病的凈化需要國(guó)家和各養(yǎng)殖企業(yè)共同努力，才能起到較好效果，獲得令人可喜的成績(jī)。

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S858.28

A

1673-4645（2016）08-0024-04

2016-06-21

劉鴿（1986-），男，山東淄博人，碩士研究生，主要從事動(dòng)物傳染病診斷與防治工作，E-mail:1539881644@qq.com

屈勇剛（1971-），男，陜西渭南人，副教授，主要從事動(dòng)物傳染病診斷與防治工作，E-mail:quyonggang@shzu.edu.cn