段慧云(牡丹江市第二人民醫(yī)院,黑龍江 牡丹江 157000)
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腦血栓患者治療前后血小板膜糖蛋白CD62p水平變化的研究
段慧云
(牡丹江市第二人民醫(yī)院,黑龍江 牡丹江 157000)
【摘要】目的 通過對CD62p的觀察研究,判定其對腦血栓疾病的影響。方法 采用流式細(xì)胞儀對CD62p水平進行檢測。結(jié)果 治療后2、4、8周的血漿CD62p水平逐漸下降,且與治療前相比差異顯著(P<0.05)。結(jié)論 腦血栓疾病的發(fā)生與發(fā)展是受到多種因素綜合影響,使得患者腦血管內(nèi)血液變成固狀,血流受到不同程度的阻礙后而形成的一類綜合疾病。
【關(guān)鍵詞】血小板;CD62p;腦血栓
血小板主要功能為參與血栓形成,主要通過其表面糖蛋白的作用來完成的,通常來說,血小板內(nèi)的溶酶體膜糖蛋白與α-顆粒膜糖蛋白為靜息狀態(tài),在各因素作用下,溶酶體膜與Q-顆粒膜和血小板漿膜相互融合,使得血小板表面的CD63與CD62p轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨“?,加強了其聚集、黏附功能?]。因而,在各種因子作用下使得血小板膜糖蛋白的數(shù)量與構(gòu)型重新發(fā)生變化,使得血小板內(nèi)部發(fā)生分泌反應(yīng),形成血栓,主要為CD62p、GPⅡb/Ⅲa、CD42b等。本次研究主要對腦血栓的診療及預(yù)后做出相應(yīng)分析與判斷。
1.1 一般資料:選取我院2013年3月至2014年3月收治的腦血栓患者80例作為本次的額觀察對象,設(shè)為試驗組(男58例,女22例,平均年齡67歲),另取在我院門診檢查為健康人群80例設(shè)為常規(guī)組(男55例,女25例,平均年齡68歲)。
1.2 方法
1.2.1 所需器材:CD42b抗體(藻紅蛋白標(biāo)記)、CD62p抗體(異硫氰酸熒光素標(biāo)記);多聚甲醛、磷酸鹽緩沖液;需用儀器包括:Falocn上樣管、FACSCalibur流式細(xì)胞儀、CTAD真空采血管、血細(xì)胞分析儀等。
1.2.2 樣品的處理:治療前與治療后的2、4、8周取1.8 mL的靜脈血,置于抗凝劑離心管內(nèi)(包含枸緣酸鈉0.2 mL,3.8%濃度),離心5 min,保持800 r/min的速率,后將富血小板血漿分離出來,并置入等量的多聚甲醛(濃度為2%),并固定15 min,后對懸浮的血小板進行洗滌(15 min,1000 r/min),后用緩沖液將血小板懸浮調(diào)節(jié)為1×1010/L的濃度。
1.3 熒光染色:將標(biāo)記的抗體CD62p,20 μL與CD42b,20 μL混合搖勻,置于避光處0.5 h,后進行2次洗滌,并將其轉(zhuǎn)移至流式細(xì)胞儀進行檢測。
1.4 流式細(xì)胞儀的檢測與數(shù)據(jù)分析:前向與側(cè)向角采用對數(shù)放大,每個樣品收集血小板20000個,并將熒光標(biāo)記的抗體陽性百分比記錄下來,分別計算CD42b與CD62p的陽性表達(dá)率。
1.5 統(tǒng)計學(xué)處理:本次數(shù)據(jù)采用SPSS17.0的統(tǒng)計軟件,計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,行t檢驗,當(dāng)P<0.05時表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
治療后的2周血漿CD62p水平為(32.21±8.53)%;4周(24.26± 8.36)%;8周(12.25±6.37)%,與治療前數(shù)據(jù)[(50.24±9.81)%]比較差異顯著(P<0.05),但是與常規(guī)組數(shù)據(jù)[(3.25±0.55)%]比較均較高(P<0.05)。
大量臨床實驗證明,腦梗死疾病的發(fā)生與發(fā)展與多種因素相關(guān),其中起到重要作用的包括活化血小板于腦血栓中的形成、發(fā)展等過程,血漿CD62p指的是其特異性標(biāo)志。
CD62p作為血小板膜糖蛋白中的一種,其分布于靜止血小板與巨核細(xì)胞內(nèi),其中α顆粒(非活化血小板胞質(zhì)內(nèi))包含CD62p,當(dāng)血小板進行活化時,該顆粒將血小板膜進行融合后釋放,CD62p重新在血小板表面排列,且該物質(zhì)僅僅在活化血小板的表面表達(dá),不隨時間變化而消失在血小板表面,CD62p同樣也可將血小板活化狀態(tài)適當(dāng)反映出來。所以說,血小板活化特異性標(biāo)志之一是CD62p的表達(dá)[2]。
CD62p相對于血小板膜而言,介導(dǎo)血小板與淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞間的黏附,因此CD62p屬于活化血小板和白細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等互相作用的紐帶。臨床研究顯示,CD62p也可以歸屬于單核細(xì)胞與中性白細(xì)胞間的一種受體,該物質(zhì)在細(xì)胞黏附過程中,使得中性白細(xì)胞與血小板相互進行黏附、聚集、機化血栓等,除此之外,當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞或者是血小板進行活化時,CD62p可以釋放至血漿內(nèi),其中血漿內(nèi)CD62p的含量可以在一定程度上表現(xiàn)出血小板的活化程度與血栓的形成傾向。近年來相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[3],CD62p可以作為血小板與血管內(nèi)皮細(xì)胞或者是中性粒細(xì)胞間的介導(dǎo)因子,可以使得單核細(xì)胞間互相進行黏附并聚集等,可以有效啟動并放大血栓形成等效用,對栓塞、相關(guān)炎癥等方面起著不可忽視的作用。
通過對CD62p的觀察研究可以對患者體內(nèi)的血小板與內(nèi)皮細(xì)胞的激活狀態(tài)有一定的參考作用,同樣對已血栓性、炎癥損傷等疾病的診療方面意義重大。最初相關(guān)研究通過對CD62p的檢測,并結(jié)合一些自身免疫性的疾病、腎臟疾病、糖尿病等進行觀察,研究發(fā)現(xiàn)CD62p水平同樣會出現(xiàn)不同程度的升高,后來經(jīng)過更深層次的研究后得出,健康人體的血漿內(nèi)同樣存在可溶性的CD62p,但是其濃度較低。
所以說,腦血栓疾病是受各種因素影響,并使得患者腦血管內(nèi)血液變成固狀,促使血流受到不同程度的阻礙后而形成的一類綜合疾病。
參考文獻
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中圖分類號:R743
文獻標(biāo)識碼:B
文章編號:1671-8194(2016)13-0176-01