程玉鵬，李天聰，林進(jìn)華，陳琦，馬愛萍，李弘琨

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040;2.哈爾濱師范大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150024)

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內(nèi)生真菌與藥用植物宿主間的交流

程玉鵬1，2，李天聰1，林進(jìn)華1，陳琦1，馬愛萍1，李弘琨1

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040;2.哈爾濱師范大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150024)

在自然界中，內(nèi)生真菌與宿主植物之間的關(guān)系撲朔迷離，縱橫交錯(cuò)。為了能夠在復(fù)雜的自然環(huán)境中生存下來(lái)，內(nèi)生真菌與宿主植物在經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的進(jìn)化之后，二者能夠相互協(xié)作，互利互惠，相互保護(hù)，而它們之間的交流也會(huì)隨著多種因素的改變而變化。簡(jiǎn)要概述近年來(lái)國(guó)內(nèi)外對(duì)內(nèi)生菌與宿主植物交流研究的進(jìn)展，為開發(fā)利用植物內(nèi)生菌資源和深入了解內(nèi)生真菌和宿主植物的交流提供較好的參考。

藥用植物；內(nèi)生真菌；交流

植物內(nèi)生真菌是指在其生活史的部分或全部階段生存在健康植物體的各類組織內(nèi)而不引起明顯感染癥狀的真菌[1]，但隨著宿主植物的衰老，內(nèi)生真菌的感染性也會(huì)表現(xiàn)出來(lái)[2]。盡管首次發(fā)現(xiàn)內(nèi)生菌要追溯到1904年，但直到它的藥用和生態(tài)意義被重新審視，人們才開始廣泛對(duì)其關(guān)注[3]。本文將簡(jiǎn)要概述近年來(lái)國(guó)內(nèi)外內(nèi)生菌與藥用宿主交流研究的進(jìn)展，為開發(fā)利用植物內(nèi)生菌資源和深入了解內(nèi)生真菌和藥用植物的交流提供較好的參考。

1 內(nèi)生真菌在宿主植物中的生物多樣性

內(nèi)生真菌在植物體內(nèi)分布十分廣泛，幾乎所有植物體內(nèi)都有內(nèi)生真菌的存在，可發(fā)現(xiàn)于植物的根、莖、葉、花、果實(shí)等各個(gè)部位[4]。高寧[5]等從狹葉柴胡根、莖、葉中共分離得到13株內(nèi)生真菌，經(jīng)菌落形態(tài)觀察及顯微觀察，鑒定為3目、4科、7屬。李瑾[6]等從金銀花中分離得到38株內(nèi)生真菌，鑒定為5目、5科、8個(gè)屬。

植物體中內(nèi)生菌的種類及數(shù)量與宿主植物的種類、生長(zhǎng)階段、營(yíng)養(yǎng)供給、生存環(huán)境以及兩者的基因型有密切關(guān)系。在不同地區(qū)和不同環(huán)境下生長(zhǎng)的同一種植物，其組織中存在的內(nèi)生菌的種類和數(shù)目會(huì)有較大差異[7]。Arnold and Lutzoni 對(duì)從熱帶低地森林到北方森林6個(gè)不同采樣點(diǎn)，不同植物類群中分離得到的1201株內(nèi)生真菌進(jìn)行分析，結(jié)果表明從熱帶地區(qū)到北方森林地區(qū)內(nèi)生真菌的多樣性呈線性減少，這是由于地理位置的不同導(dǎo)致環(huán)境因素不同，而環(huán)境的差異導(dǎo)致宿主植物內(nèi)生真菌的多樣性[8-9]。

2 內(nèi)生真菌對(duì)宿主植物特異性

在許多情況下，植物與其內(nèi)共生體的系統(tǒng)進(jìn)化是一致的[10]。研究報(bào)道，有些內(nèi)生真菌在宿主科的水平上具有特異性[11]，同時(shí)在宿主種的水平上也具有特異性[12]。然而，內(nèi)生真菌對(duì)宿主植物的特異性需要宿主植物與內(nèi)生真菌有著緊密的相互適應(yīng)的關(guān)系，這就意味著它們從過(guò)去就一直共棲并共同進(jìn)化，最終演變成遺傳性互補(bǔ)體系[13]。在許多宿主體內(nèi)的一個(gè)組織類型中可能寄存有數(shù)百種內(nèi)生真菌，它們中大多是宿主特異性的種類[14]。更有研究表明，內(nèi)生真菌對(duì)宿主的種類表現(xiàn)出特異性的同時(shí)，對(duì)植物的組織及器官也表現(xiàn)出特異性，而表現(xiàn)出這些特異性的原因，可能是由于內(nèi)生真菌在適應(yīng)植物不同生理?xiàng)l件的過(guò)程中產(chǎn)生的[15]。有研究證實(shí)，一些內(nèi)生真菌的種類會(huì)比較頻繁的出現(xiàn)或僅在某些特殊的植物種類中出現(xiàn)，例如，內(nèi)生真菌散斑殼屬Lophodermium spp.會(huì)頻繁的出現(xiàn)在松科植物中，而在同一區(qū)域的其他松柏科或被子植物中則不存在[8,14]。另外一些在樹中常見的內(nèi)生真菌如木霉屬在紫衫樹中普遍存在，而青霉屬則普遍存在于松樹當(dāng)中，但在紫衫樹中卻不常見[16]。

3 內(nèi)生真菌與宿主間的相互作用

在自然界中，內(nèi)生真菌與宿主之間的關(guān)系十分復(fù)雜，在長(zhǎng)期的共存中，二者的關(guān)系在互利共生和寄生之間變化，我們將其稱為共生連續(xù)體(symbiotic continuum)[17]。這表明了內(nèi)生真菌和宿主之間的關(guān)系會(huì)隨某些因素的改變而相互轉(zhuǎn)化，如遺傳背景的差異、周圍環(huán)境的變化以及植物本身生理?xiàng)l件的變化等。因此通常認(rèn)為，與其他植物病原體相比，內(nèi)生真菌與宿主之間的交流達(dá)到了一個(gè)對(duì)抗平衡，并且顯現(xiàn)出極大的表型可塑性(phenotypic plasticity)[18]。有報(bào)道稱，在內(nèi)生真菌與宿主的復(fù)雜交流系統(tǒng)中，二者之間存在交聯(lián)反應(yīng)(cross talk)，它們的相互作用也會(huì)刺激植物中生物與非生物應(yīng)激反應(yīng)的抗性基因的表達(dá)。因此植物與內(nèi)生真菌之間的交流對(duì)二者來(lái)說(shuō)都是有利的[19]。在共同進(jìn)化的過(guò)程中，為了適應(yīng)宿主植物的微環(huán)境，內(nèi)生真菌通過(guò)遺傳變異，攝取一些植物的DNA進(jìn)入到自身的基因組中，從而使某些內(nèi)生真菌能夠合成其宿主植物特有的植物化學(xué)物質(zhì)[20]。

研究表明，內(nèi)生真菌的存在將會(huì)增強(qiáng)宿主植物的抗逆性如抗旱、抗寒、耐熱、耐鹽能力，使植物更好的適應(yīng)生物和非生物的脅迫[4]。如杜永吉[21]等通過(guò)注射菌液法和菌絲塞入法將來(lái)自于高羊茅的內(nèi)生真菌Neotyphodium typhinum回接種至高羊茅宿主中，移栽之后發(fā)現(xiàn)，接有內(nèi)生真菌的植株水分利用率遠(yuǎn)高于不染菌的植株，且染菌植物的葉片含水量相對(duì)較高，具有較強(qiáng)保水、抗旱的能力[22]。

許多研究認(rèn)為，內(nèi)生真菌提高宿主的抗逆性很可能是一種棲息地的適應(yīng)現(xiàn)象，而這些棲息地適應(yīng)的共生體在高逆性環(huán)境下依然能夠使植物生長(zhǎng)并存活下來(lái)，例如一種熱土壤中生長(zhǎng)的植物，其內(nèi)生真菌彎孢屬Curvularia protuberata能夠提高耐熱性，使植物能在熱土壤中生長(zhǎng)，然而當(dāng)溫度超過(guò)38℃，無(wú)論是內(nèi)生真菌或是宿主植物都無(wú)法獨(dú)自生存[23]。另外從非熱土壤植物中分離出來(lái)的內(nèi)生真菌彎孢屬Curvularia protuberata并不具備增加宿主耐熱性的能力。在對(duì)比分別來(lái)自沿海地區(qū)和非沿海地區(qū)植物的內(nèi)生真菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)只有來(lái)之沿海地區(qū)的內(nèi)生真菌才能加強(qiáng)宿主的耐鹽性[24]。

內(nèi)生真菌能保護(hù)宿主，反過(guò)來(lái)，宿主植物也能給內(nèi)生真菌一個(gè)空間結(jié)構(gòu)，保障營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和水分供給，并會(huì)將內(nèi)生真菌垂直的傳入宿主植物的下一代[25]。有些植物會(huì)直接為內(nèi)生真菌提供完成其生命周期和生長(zhǎng)或自衛(wèi)所必要的化合物[26]。

4 內(nèi)生真菌與宿主之間的代謝交流

目前許多報(bào)道推測(cè)，由于內(nèi)生真菌與宿主之間存在長(zhǎng)期的信息交流，內(nèi)生真菌可能通過(guò)基因重組使得其產(chǎn)生與宿主相同的信息傳導(dǎo)通路[27]，從而具有了能夠合成與宿主植物相似或相同活性成分的能力[28]。

有研究表明，內(nèi)生真菌在特定的條件下，能夠促進(jìn)宿主植物次級(jí)代謝產(chǎn)物的合成及累積。Mucciarelli等[29]對(duì)感染了內(nèi)生真菌的薄荷苗進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其揮發(fā)性物質(zhì)的含量與普通薄荷無(wú)菌苗相比有顯著差異，且發(fā)現(xiàn)新的化合物存在。在金釵石斛體外培養(yǎng)條件下，內(nèi)生真菌與金釵石斛共培養(yǎng)能夠增加金釵石斛的生物堿和多糖含量[30]。研究證實(shí)，內(nèi)生菌誘導(dǎo)子多糖和寡糖能提高藥材的有效成分，它們通過(guò)誘導(dǎo)植物特定基因的表達(dá)，激活植物特定的次級(jí)代謝途徑，使特定的有效成分形成并積累[31]，如王劍文[32]等發(fā)現(xiàn),黃花篙內(nèi)生菌細(xì)胞壁寡聚糖提取物可誘導(dǎo)黃花篙發(fā)根細(xì)胞中Ca2+的增加，從而提高青篙素的產(chǎn)量。

5 存在的問(wèn)題及展望

研究人員發(fā)現(xiàn)一個(gè)三方共生體，宿主植物體內(nèi)的內(nèi)生真菌中攜帶了一個(gè)真菌RNA的病毒，它能夠協(xié)助內(nèi)生真菌提高宿主植物的耐熱性[33]。這個(gè)發(fā)現(xiàn)說(shuō)明了植物與微生物共生系統(tǒng)的復(fù)雜性，因此到目前為止我們對(duì)共生系統(tǒng)的認(rèn)識(shí)還是十分有限的，并且它們中許多交流的機(jī)制仍然有待探索。

綜上所述，植物內(nèi)生真菌能夠合成許多具有生物活性的重要次級(jí)代謝產(chǎn)物[34-35]，以內(nèi)生真菌為藥用植物的替代資源更有利于大規(guī)模商業(yè)化的合成藥用植物中的有效成分，只要通過(guò)合理的開發(fā)利用，內(nèi)生真菌將會(huì)成為一個(gè)巨大的藥用資源庫(kù)，從而為藥物的獲取開辟新的途徑，同時(shí)也能夠緩解日益緊張的植物資源短缺問(wèn)題。

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Communication between Endophytic Fungi and Medicinal Plant

CHENG Yu-peng1,2, LI Tian-cong1, LIN Jin-hua1,CHEN Qi1,MA Ai-ping1,LI Hong-kun1

(1.HeilongjiangUniversityofChineseMedicine,Harbin150040,China; 2.HarbinNormalUniversity,Harbin150024,China)

In nature, the relationships between endophytic fungi and host plants are too complicated to be understood. In order to adapt to the natural environmental conditions for survival, long-term co-evolution has been compromised by the endophytic fungi and the host plant. Subsequently, both of them are capable of getting benefits and protection from mutual coordination. However, the communication between endophytes and hosts will be varied with the change of multiple factors. For the exploration and utilization of plant endophytic fungi resource and more deeply understanding the communication between endophytic fungi and host plants, this review briefly summarizes the new development of the research on the communication between endophytic fungi and host plants both in China and abroad.

Medicinal plants; Endophytic fungi; Communication

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81573539)；黑龍江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.H2015042)

程玉鵬(1966-)，男，副教授，碩士研究生導(dǎo)師，主要從事中藥生物技術(shù)的研究工作。

2016-04-12

R28

A

1002-2406(2016)06-0120-03

修回日期：2016-05-01