王　芳，　張　軍，　徐唯傑，　樂　軍，　陳曉燕，　陳　晉

(同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院檢驗科,上海 200433)

SYSMEX CS 5100全自動血凝分析儀的性能評價

王芳，張軍，徐唯傑，樂軍，陳曉燕，陳晉

(同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院檢驗科,上海 200433)

摘要：目的對Sysmex CS 5100(下簡稱CS 5100)全自動血凝儀進(jìn)行性能評價。方法對CS 5100血凝儀的準(zhǔn)確性、不精密度、Fg線性(可報告范圍)、參考范圍、攜帶污染率進(jìn)行評價，并與Sysmex公司生產(chǎn)的CA 7000全自動血凝分析儀進(jìn)行相關(guān)性試驗，所測指標(biāo)為PT、PT(INR)、APTT、Fbg、TT、AT、D二聚體(DD)和FDP。 結(jié)果準(zhǔn)確性試驗測定結(jié)果在質(zhì)控說明書給定的范圍內(nèi)。批內(nèi)最大變異系數(shù)(CV)與日間最大CV均符合符合相關(guān)行業(yè)文件要求。Fbg線性驗證試驗結(jié)果顯示Fbg線性范圍為1.071~5.355，相關(guān)系數(shù)(r)值為0.995 0，符合規(guī)定要求(r≥0.975)。參考范圍驗證試驗結(jié)果顯示各項檢測指標(biāo)R值均>0.9，實驗室預(yù)設(shè)參考范圍可適用于該儀器。CS 5100與CA 7000的各項檢測項目r值均>0.95，兩儀器結(jié)果有很好的對比性。 結(jié)論CS 5100有優(yōu)異的準(zhǔn)確性、精密度良好、Fbg檢測范圍寬、抗生物干擾能力強，完全可滿足臨床實驗室要求。

關(guān)鍵詞：CS 5100；全自動血凝儀； 性能評估

中圖分類號：

文章編號：1673-8640(2015)02-0177-04R446.11

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：碼：A

DOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2015.02.018

Abstract:ObjectiveTo evaluate the performance of Sysmex CS 5100 automatic blood coagulation analyzer. MethodsPT, PT(INR), APTT, Fbg, TT, AT, D-dimer (DD) and FDP were measured by Sysmex CS 5100 automatic blood coagulation analyzer. The accuracy, imprecision, Fg linearity (reportable range), reference range, carry-over rate were evaluated, and the correlation with Sysmex CA 7000 automatic blood coagulation analyzer was analyzed. ResultsThe accuracy was in the range provided by quality control instructions. The maximum within-run and inter-day coefficients of variation met the requirements of Clia′88. Fbg linear validation test showed that the linearity of Fbg was from 1.071 to 5.355, and the correlation coefficient (r) was 0.9950, which met the specified requirements (r≥0.975).The reference range verification tests showed that the R values of all the tests were >0.9, which proved that the laboratory preset reference range can be applied to the analyzer. The r for several items between CS 5100 and CA 7000 were >0.95, which showed good correlation between the 2 analyzers. ConclusionsCS 5100 has an excellent accuracy, a good precision, a wide range of Fbg detection as well as a strong anti-interference ability. CS 5100 can totally meet the requirements of clinical laboratories.

基金項目：上海市肺科醫(yī)院結(jié)核診療中心項目(檢驗科)

作者簡介：王芳，女，1976年生，主管技師，主要從事臨床檢驗及血庫管理工作。

通訊作者：陳晉：聯(lián)系電話：021-65115006-3027。

收稿日期：(2014-07-02)

Evaluation on the performance of Sysmex CS 5100 automatic blood coagulation analyzerWANGFang,ZHANGJun,XUWeijie,YUEJun,CHENXiaoyan,CHENJin.(DepartmentofClinicalLaboratory,ShanghaiPulmonaryHospital,TongjiUniversity,Shanghai200433,China)

Key words: CS 5100; Automatic blood coagulation analyzer; Performance evaluation

Sysmex公司研制生產(chǎn)的CS 5100型全自動血凝儀(以下簡稱CS 5100)自動化程度高，操作簡便且功能多樣，通過凝固法、發(fā)色底物法及免疫比濁法，實現(xiàn)測試項目的高速處理及隨機(jī)分析，為實驗室從出血性疾病輔助檢測走向凝血相關(guān)疾病診療提供完整的解決方案。儀器的分析性能達(dá)到臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)后才可用于患者的檢測[1]。我們在CS 5100上進(jìn)行了準(zhǔn)確性試驗、不精密度試驗、Fbg線性(可報告范圍)驗證、參考范圍驗證試驗及攜帶污染率試驗，并與Sysmex公司的CA 7000血凝儀的檢測結(jié)果進(jìn)行了相關(guān)性分析，確保檢驗結(jié)果成為各種疾病的診療及預(yù)防的有效、可靠的實驗室指標(biāo)。

材料和方法

一、儀器

日本Sysmex CS 5100全自動血凝儀。

二、試劑

CS 5100血凝儀所用試劑為配套(Bade Behring)試劑。PT檢測試劑批號為545527，APTT檢測試劑批號為547175，TT檢測試劑批號為42949，F(xiàn)ib檢測試劑批號為538068A，AT檢測試劑批號為42980，DD檢測試劑批號為42934，F(xiàn)DP檢測試劑批號為823RDK。

三、樣本

正常和異常質(zhì)控血漿為Dade Ci-Trol 1和Dade Ci-Trol 2；準(zhǔn)確性試驗所用血漿為Dade Ci-Trol Dade Ci-Trol Innovance DD質(zhì)控品、FDP質(zhì)控品；Fbg線性(可報告范圍)驗證試驗血漿為高值血漿樣本；參考范圍驗證試驗用血漿為同濟(jì)大學(xué)附屬上海市肺科醫(yī)院體檢健康人群樣本；攜帶污染率試驗血漿為高值樣本、低值樣本；血漿樣本處理為本院門診或住院患者的靜脈血(真空采血管0.109mol/L枸櫞酸鈉1∶9抗凝)，3 500×g離心10min，收集含血小板血漿備用。

四、方法

試驗方法均按照Sysmex公司提供的儀器評估文件進(jìn)行。

1. 準(zhǔn)確性試驗取2個水平的定值質(zhì)控品，重復(fù)測定3次，驗證其準(zhǔn)確性。PT、APTT、Fbg、AT使用Control Plasma N和Control Plasma P，DD使用Innovance DD質(zhì)控品，F(xiàn)DP使用FDP質(zhì)控品。TT無高值質(zhì)控，僅檢驗正常范圍。結(jié)果應(yīng)在可控范圍內(nèi)，根據(jù)行標(biāo)總誤差的規(guī)定，本實驗結(jié)果應(yīng)在質(zhì)控品說明書給定范圍的1/3內(nèi)。

2. 不精密度試驗(1)批內(nèi)不精密度：選取正常值的血漿20份制成混合血漿，連續(xù)測定10次，計算變異系數(shù)(CV)值，CV值必須在行標(biāo)總誤差要求范圍內(nèi)(PT≤3.75%，APTT≤3.75%，TT≤7.5%，F(xiàn)bg≤5%，DD≤5%，AT≤7.5%)；(2)天間不精密度:每日同時測定高、低水平質(zhì)控血漿2次，連續(xù)5日，測定的CV必須在行相總誤差要求的范圍內(nèi)(PT≤5%，APTT≤5%，TT≤10%，F(xiàn)bg≤6.67%，DD≤6.67%，AT≤10%)。

3. Fbg線性(可報告范圍)試驗選取1份接近預(yù)期上限的高值全血樣本，分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例進(jìn)行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定2次，將實測值與理論值作比較(偏離應(yīng)<10%)。線性范圍必須符合廠家文件要求(a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)(r)值≥0.975)。

4. 參考范圍驗證選取體檢健康人20名，進(jìn)行PT、PT(INR)、APTT、Fbg、TT、AT、DD和FDP檢測，對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計算R值(落在參考范圍內(nèi)的樣本數(shù)/總的試驗樣本數(shù))，要求R>0.9。

5. 攜帶污染率試驗(1)高值樣本對低值樣本的污染：將低值樣本置樣本架1和3位置，高值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次，記錄結(jié)果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。計算 k1=[N4-Mean(N1，N2，N3)]/Mean(N1，N2，N3)；(2)低值樣本對高值樣本的污染：將高值樣本置樣本架1和3位置，低值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次，記錄結(jié)果：A1、A2、A3、N1、N2、N3、A4、A5、A6。計算 k2=[A4-Mean(A1，A2，A3)]/Mean(A1，A2，A3)。PT、APTT、FIB、DD、FDP和ATIII結(jié)果CV值均應(yīng)符合儀器標(biāo)定范圍，符合廠家要求(CV≤10%)。

6. 與CA 7000全自動血凝儀的對比試驗CA 7000和CS 5100使用相同試劑。根據(jù)美國國家臨床檢驗標(biāo)準(zhǔn)化委員為制定的“用樣本進(jìn)行方法對比和偏差評估”的指南[1],選取覆蓋有黃疸、脂血和溶血樣本的正常和異常樣本20例，對PT、APTT、 Fbg、TT、AT、DD、FDP同時進(jìn)行檢測，要求r>0.975，回歸斜率范圍在1±0.05內(nèi)。

五、統(tǒng)計學(xué)方法

按各項試驗方案對試驗結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，要求符合儀器廠商和相關(guān)文件的要求。

結(jié)果

一、準(zhǔn)確性試驗

PT、APTT、TT、Fbg、DD和FDP的檢測數(shù)據(jù)結(jié)果均在質(zhì)控說明書所給定的范圍內(nèi)，均符合準(zhǔn)確性實驗要求。結(jié)果見表1。

二、不精密度試驗

批內(nèi)不精密度及天間不精密度試驗所測得的各組結(jié)果均在廠家文件給定的標(biāo)定靶值要求范圍內(nèi)，儀器批內(nèi)不精密度良好。結(jié)果見表2。

表1　PT、APTT、TT、Fbg、DD、FDP準(zhǔn)確性試驗結(jié)果

表2　不精密度批內(nèi)及天間試驗結(jié)果

三、Fbg線性試驗

Fbg線性驗證試驗理論值和實測值的回歸方程為Y=0.991 7X+0.042 4，r=0.995。結(jié)果顯示r≥0.975，切斜率(a)在1±0.05內(nèi)，測得的Fbg值在1.071~5.355的范圍內(nèi)呈線性分布。儀器測定Fbg設(shè)有1∶5、1∶10、1∶20 3種不同的稀釋比例，分別可針對低值血漿、正常血漿和高值血漿，因此Fbg可報告范圍為0.535~10.71。結(jié)果見表3、圖1。

表3　Fbg線性驗證測試結(jié)果

圖1　Fbg線性試驗回歸方程

四、參考范圍驗證試驗

參考范圍驗證試驗所得各組結(jié)果均符合實驗室預(yù)設(shè)參考范圍。見表4。

表4　參考范圍驗證試驗

五、攜帶污染率試驗

樣本攜帶污染率試驗(高值樣本對低值樣本的污染、低值樣本對高值樣本的污染)結(jié)果均在儀器標(biāo)定范圍內(nèi)，符合廠家要求(≤10%)?？梢宰C明儀器攜帶污染率符合要求，樣本間攜帶污染率不影響檢測準(zhǔn)確性。結(jié)果見表5。

表5　樣本攜帶污染率試驗結(jié)果(%)

六、CS 5100血凝儀和CA 7000血凝儀的相關(guān)性

根據(jù)試劑說明書要求批內(nèi)不精密度CV%<5%(±2s)，可推算出總誤差為20%，要求偏倚為1/4總誤差即±5%，符合率應(yīng)>80%。PT、APTT、Fbg、TT、AT、DD、FDP的r均>0.975，表明兩種儀器的測定結(jié)果有很好的可比性，見表6。

表6　CS 5100血凝儀和CA 7000血凝儀的相關(guān)性試驗結(jié)果

討論

各級醫(yī)院均開始采用血凝儀對相關(guān)疾病進(jìn)行診療和檢測。國內(nèi)針對多種血凝儀進(jìn)行了性能評價[2-3]。CS 5100通過樣本質(zhì)量智能監(jiān)測HIL檢測和多波長檢測樣本質(zhì)量智能監(jiān)測HIL檢測技術(shù)，測定前對樣本進(jìn)行監(jiān)測，客觀判斷溶血、黃疸以及乳糜信息并自動選擇合適波長進(jìn)行檢測；在反應(yīng)過程中采用5個波長進(jìn)行監(jiān)測，自動選擇最佳的波長進(jìn)行測定，從而自動提高了樣本檢測靈敏度及抗干擾能力。CS 5100也具有卓越的檢測效率，每小時檢測試驗數(shù)可達(dá)約400項次，并具備自動再檢、自動連鎖篩選及凝血因子抑制物分析等優(yōu)異的試劑管理功能；所用試劑在試劑艙內(nèi)均為傾斜放置減小了試劑瓶內(nèi)死腔量，節(jié)約試劑與檢測成本；自動預(yù)測測試完成時間便于操作人員合理安排工作時間；有專用急診位，便于急診患者的優(yōu)先檢測和報告；配備閉蓋穿刺功能可檢測開閉蓋試管，減少分析前樣本處理時間，提高操作人員生物安全；可實現(xiàn)與實驗室自動化軌道系統(tǒng)(LAS)連接，提高整體檢測效率。CS 5100每1 000項次檢測試驗需要20L蒸餾水對檢測進(jìn)行支持，以保證檢測準(zhǔn)確性，并且無全自動超純水機(jī)外接設(shè)備支持，增加了不必要的工作量與人為污染的可能性。

在準(zhǔn)確性實驗中，TT無高值水平質(zhì)控，僅進(jìn)行一個水平的檢測；由于DD異常質(zhì)控品較難獲得，DD標(biāo)準(zhǔn)品作為標(biāo)準(zhǔn)值[4]。CS 5100具有優(yōu)良的不精密度，對及時復(fù)查的樣本結(jié)果有良好的保障。CS 5100凝血儀有較寬的檢測限及良好的線性范圍[5]，相關(guān)性實驗可以證實，CS 5100和CA 7000的測定結(jié)果有很好的可比性。因此，在日常檢測工作中，兩儀器可以在檢測異常值樣本時互相印證，保證檢測準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。各實驗室均應(yīng)根據(jù)自己實驗條件的不同建立自己的實驗室參考值[3]，參考范圍驗證試驗證明，本實驗室CA 7000預(yù)設(shè)參考范圍可適用于CS 5100，使兩種檢測系統(tǒng)得到統(tǒng)一，確保了檢測的準(zhǔn)確性與精密度。

在進(jìn)行CS 5100的天間不精密度試驗過程中，我們分別使用Dade Ci-Trol 2 和Control Plasma P(批號為528107)作為異常值進(jìn)行比對。Dade Ci-Trol 2 和Control Plasma P的區(qū)別在于前者無AT靶值，且其Fbg值接近正常，不能作為異常質(zhì)控。由于在之前的準(zhǔn)確性試驗中已證明CS 5100具有良好的準(zhǔn)確性，因此，可用其測試Dade Ci-Trol 2的AT與Fbg值，AT測得均值為89.50%，F(xiàn)bg均值為2.23g/L；對比Control Plasma P測得AT均值為34.75%，F(xiàn)bg均值為0.75g/L。因此，使用Siemens OV Buffer與Dade Ci-Trol 2 進(jìn)行1∶3稀釋后，再次進(jìn)行天間不精密度試驗。稀釋后所得AT均值為30.10%，CV值為4.24%；Fbg均值為0.71g/L，CV值為2.94%。因此，我們認(rèn)為，Dade Ci-Trol 2可以在處理后替代Control Plasma P作為異常值質(zhì)控品。然而，鑒于Dade Ci-Trol 2 相較Control Plasma P，CV值均有增大，可能是因為在試驗過程中的一些未被發(fā)現(xiàn)的偏差或兩種試劑本身的區(qū)別所致。

以上實驗中，已經(jīng)證明CS 5100具有良好的準(zhǔn)確性、精密度、測試范圍寬且攜帶污染率低的特點，是實現(xiàn)實驗室自動化、系統(tǒng)化的優(yōu)秀凝血項目檢測儀器。

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(本文編輯：范基農(nóng))