芪靈扶正片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

劉丹靜1，朱莊松1，溫海濤1，王志梅2

(1.梅州市人民醫(yī)院藥劑科，廣東 梅州 514000;2.梅州市食品藥品監(jiān)督檢驗所，廣東 梅州 514000)

摘要：目的建立芪靈扶正片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用薄層層析法及顯微鑒別對制劑中代表藥物進(jìn)行鑒別。結(jié)果建立了本制劑中黃芪、麥冬、三七的薄層層析鑒別方法，建立了本制劑中三七的顯微鑒別方法。結(jié)論建立的薄層層析法及顯微鑒別，具有專屬性強(qiáng)特點，可用以芪靈扶正片的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：芪靈扶正片；薄層鑒別；顯微鑒別；質(zhì)量控制；研究

作者簡介：劉丹靜，女，主管藥師，研究方向：藥物制劑，E-mail:13823830020@139.com

中圖分類號：R927.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

Study on the quality stand of Qiling Fuzheng Tablets

LIUDan-jing1,ZHUZhuang-song2,WENHai-tao1,WANGZhi-mei2

(1.MeizhouMunicipalPeople′sHospital,Meizhou514000,China;2.MeizhouMunicipal

InstituteforFoodandDrugControl,Meizhou514000,China)

Abstract：ObjectiveTo establish the quality standard of Qiling Fuzheng Tablets.MethodsThe representative drugs in Qiling Fuzheng Tablets were identified by TLC and microscopic identified.ResultsThe TLC method for identification of astragail radix,ophiopogonis radix,notoginseng radix and the microscopic identification method for determination of notoginseng radix were established.ConclusionThe established identification methods were specific,and it can be used for the quality control of Qiling Fuzheng Tablets.

Key words:Qiling Fuzheng Tablets;TLC;Microscopic identification;Quality control;Study

芪靈扶正片是由黃芪、靈芝、太子參、麥冬、女貞子、三七、雞血藤、炙甘草等8味藥材組成的中藥復(fù)方制劑，具有益氣養(yǎng)陰，扶正固本的作用，用于治療免疫功能低下所致的各種疾病及腫瘤病人的輔助治療[1～3]。為了控制其制劑的內(nèi)在質(zhì)量，確保臨床用藥安全有效，參考相關(guān)文獻(xiàn)[4～7],本實驗進(jìn)行芪靈扶正片質(zhì)量控制方法的研究，建立了該制劑貴重藥材三七的顯微鑒別和薄層鑒別；君藥黃芪、臣藥麥冬的薄層鑒別及片劑項下的有關(guān)的各項規(guī)定，為其質(zhì)量控制提供科學(xué)方法和實驗數(shù)據(jù)。

1儀器及試藥

1.1儀器顯微鏡、超聲波清洗儀(上海躍進(jìn)醫(yī)用光學(xué)器械廠);薄層用硅膠G(青島海洋化工廠分廠，批號:20140108);電子天平(北京賽多利斯天平有限公司);離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);超凈工作臺(上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠);生化培養(yǎng)箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠);霉菌培養(yǎng)箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠);崩解儀(上海黃海藥檢儀器廠)。

1.2試劑與藥材芪靈扶正片(梅州市人民醫(yī)院藥劑科，批號：20130618、20130808、20131108);麥冬對照藥材、黃芪對照藥材(中國藥品生物制品檢定所);人參皂苷Rb1對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rg1對照品、三七皂苷R1對照品、黃芪甲苷對照品(中國藥品生物制品檢定所);其他試劑為分析純，水為重蒸餾水。

2試驗方法與結(jié)果

2.1顯微鑒別三七：樹脂道碎片含黃色分泌物(見圖1)。

圖1　三七樹脂道碎片

2.2薄層鑒別

2.2.1三七的TLC鑒別取本品10片，除去糖衣，研細(xì)，加水2 mL，攪勻，再加以水飽和的正丁醇15 mL，密塞，振搖10 min，放置2 h，離心，取上清液，加3倍量以正丁醇飽和的水，搖勻，放置使分層或離心分層，取正丁醇層，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rb1對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rg1對照品及三七皂苷R1 對照品，加甲醇制成每1 mL各含0.5 mg的溶液，作為對照品溶液。陰性對照液的制備：取空白樣品按照供試品溶液制備項下方法制成陰性對照液。照薄層色譜法[《中國藥典》2010年版(一部)附錄Ⅵ B]試驗，吸取上述5種溶液各1 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10 ℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以硫酸乙醇溶液(1→10),在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點[8]。

圖2　三七TLC鑒別圖

2.2.2麥冬的TLC鑒別取本品10片，除去糖衣，研細(xì)，加3.6%鹽酸溶液20 mL,加熱回流1 h，放冷，濾過，濾液加二氯甲烷振搖提取2次，每次10 mL，合并二氯甲烷，蒸干，殘渣加無水乙醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取麥冬對照藥材1 g，加水煎煮1 h，濾過，濾液濃縮成稠膏，同法制成對照藥材溶液。陰性對照液的制備：取空白樣品按照供試品溶液制備項下方法制成陰性對照液。照薄層色譜法[《中國藥典》2010年版(一部)附錄Ⅵ B]試驗，吸取上述各種溶液各5～10 μL，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以甲苯-甲醇-冰醋酸(12∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈(254 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點[7]。

圖3　麥冬TLC鑒別圖

2.2.3黃芪的TLC鑒別①供試品溶液的制備：取本品10片，除去糖衣，研細(xì)，加甲醇20 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL溶解，移入分液漏斗，用水飽和的正丁醇溶液萃取3次每次20 mL，合并正丁醇液，用1%的氫氧化鈉洗滌2次。每次20 mL，再用水洗滌3次，每次20 mL，將正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇2 mL溶解，作為供試品溶液;②陰性對照液的制備：取空白樣品按照供試品溶液制備項下方法制成陰性對照液;③黃芪對照藥材的制備：取黃芪對照藥材5 g，加甲醇15 mL，超聲處理30 min，濾過，作為對照藥材供試品溶液；④黃芪甲苷對照品的制備：取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液作為對照品溶液。吸取上述4種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10 ℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃加熱5～7 min 。日光下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點[9]。

圖4　黃芪TLC鑒別圖

2.3檢查

2.3.1崩解時限參照《中國藥典》2010年版(一部)附錄Ⅹ A。取藥片6片，分別置崩解儀吊籃的玻璃管中，調(diào)節(jié)并保持崩解儀內(nèi)水溫和燒杯內(nèi)水溫為(37±1)℃，啟動崩解儀進(jìn)行檢查，各片均應(yīng)在1 h內(nèi)全部崩解。如有1片崩解不完全，應(yīng)另取6片，按上述方法復(fù)試，均應(yīng)符合規(guī)定。

2.3.2片重差異標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定平均片重在0.3 g以下的，其片重差異限度為±7.5%。

包糖衣前取供試品20片，精密稱定總重量，求得平均片重后，再分別精密稱定每片的重量，每片重量與標(biāo)示片重相比較(凡無標(biāo)示片重的片劑，每片重量應(yīng)與平均片重比較)，超過重量差異限度的藥片不多于2片，并不得有1片超過限度 1倍。

2.3.3微生物限度檢查參照《中國藥典》2010年版(一部)附錄Ⅹ C 微生物限度檢查法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。

3討論

3.1三七顯微特征與現(xiàn)行版藥典相比，藥典規(guī)定“淀粉粒甚多，單粒圓形、半圓形或圓多角形，直徑4～30 μm;復(fù)粒由2～10余分粒組成。樹脂道碎片含黃色分泌物。梯紋導(dǎo)管、網(wǎng)紋導(dǎo)管及螺紋導(dǎo)管直徑15～55 μm。草酸鈣簇晶少見，直徑50～80 μm?！钡咴谥苿┲械牧枯^小，導(dǎo)管與草酸鈣簇晶不易觀察到，所以僅保留三七的樹脂道的鑒別。

3.2三七為貴重藥材，主要成分為人參皂苷Rb1、人參皂苷Re、人參皂苷Rg1及三七皂苷R1等，參考《中國藥典》2010年版(一部)三七項下的方法，除展開劑三氯甲烷更換為二氯甲烷外(考慮到二氯甲烷的毒性比三氯甲烷小)，保留其他的操作方法，結(jié)果，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。

3.3黃芪主要成分為黃芪甲苷。參考《中國藥典》2010年版(一部)黃芪項下的鑒別來設(shè)計方法，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，應(yīng)顯相同顏色的斑點。結(jié)果，斑點對應(yīng)性差?？紤]到其為方中君藥，起主要作用，在質(zhì)量控制方面具有重要的意義，再次查找資料，重新設(shè)計方案，經(jīng)多次試驗，上述的方法分離效果良好，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。

3.4太子參為方中臣藥，參考《中國藥典》2010年版(一部)太子參項下的方法來設(shè)計方案，結(jié)果，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，不顯斑點,故未將其列入標(biāo)準(zhǔn)中。有待繼續(xù)研究方中其他藥材TCL鑒別專屬性強(qiáng)的方法，將現(xiàn)有的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)一步提升。

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