原發(fā)性膜性腎病患者血清BAFF水平變化及其臨床意義

馬東紅，劉云，許清玉，張璐，崔艷，郭明好

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院一附院，河南新鄉(xiāng)453100)

摘要：目的觀察原發(fā)性膜性腎病(PMN)患者血清B淋巴細(xì)胞活化因子(BAFF)水平變化，并探討其臨床意義。方法 選擇PMN患者30例(觀察組)、查體健康者10例(對(duì)照組)，采用ELISA法檢測(cè)血清BAFF水平，對(duì)BAFF水平與尿蛋白定量、血漿白蛋白、CD20計(jì)數(shù)進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析。結(jié)果觀察組與對(duì)照組血清BAFF水平分別為(1 663.73±548.72)、(894.60±206.83)pg/mL，兩組比較，P<0.05。BAFF水平與24 h尿蛋白定量、CD20計(jì)數(shù)呈正相關(guān)(r分別為0.781、0.678，P均<0.05)，與血漿白蛋白水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.755，P<0.05)。結(jié)論 PMN患者血清BAFF水平明顯升高，BAFF在PMN發(fā)病中可能起重要作用。

關(guān)鍵詞：原發(fā)性膜性腎病；B淋巴細(xì)胞活化因子；腎病綜合征

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.45.029

中圖分類號(hào)：R692文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

收稿日期：(2015-06-16)

有研究證實(shí)，PMN患者體內(nèi)的B淋巴細(xì)胞在Th2細(xì)胞所分泌的IL-4和IL-10等細(xì)胞因子的作用下，分泌IgG4亞型的功能明顯增強(qiáng)[1]；B淋巴細(xì)胞的激活參與PMN發(fā)病[2～4]。B淋巴細(xì)胞活化因子(BAFF)參與調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞發(fā)育、分化及抗體的產(chǎn)生，而且還參與T淋巴細(xì)胞的活化和應(yīng)答過(guò)程，在體液免疫和細(xì)胞免疫中有重要作用[5]；IgA腎病患者外周血BAFF明顯升高，其水平與腎臟病理改變呈明顯正相關(guān)[6,7]。但PMN患者體內(nèi)血清BAFF水平與其臨床特征的關(guān)系國(guó)內(nèi)外鮮有報(bào)道。2013年6月～2014年12月，我們觀察了PMN患者外周血BAFF水平變化，并探討其臨床意義。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇本院腎內(nèi)科住院的PMN患者30例(觀察組)，男18例、女12例，年齡(42.5±15.12)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18歲；②經(jīng)腎活檢診斷為膜性腎?。虎劢?個(gè)月內(nèi)未使用過(guò)糖皮質(zhì)激素及環(huán)磷酰胺、他克莫司、霉酚酸酯、環(huán)孢素等免疫抑制劑；④血肌酐<133 μmol/L。排除標(biāo)準(zhǔn)：自身免疫性疾病；乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、結(jié)核、肺炎等急慢性感染性疾?。粣盒阅[瘤；糖尿病、高血壓及妊娠期。選取同期查體健康者10例(對(duì)照組)，男6例、女4例，年齡(39.8±11.7)歲。兩組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2血清BAFF、尿蛋白定量、肝腎功能、血糖及CD20檢測(cè)兩組研究對(duì)象晨起空腹采集靜脈血4 mL，室溫放置2 h，1 000 r/min離心20 min，取上清液，-80 ℃保存，采用ELISA法(試劑盒購(gòu)自CUSABIO公司)檢測(cè)血清BAFF。研究對(duì)象入院時(shí)即留取尿、血標(biāo)本送檢，采用鄰苯三酚紅比色法檢測(cè)24 h尿蛋白定量，酶法檢測(cè)血肌酐(Cr)、尿酸(UA)、空腹血糖(GLU)、膽固醇(CHO)、甘油三酯(TG)，溴甲酚綠法檢測(cè)血漿白蛋白(ALB)，速率法檢測(cè)血尿素氮(BUN),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血CD20。

2結(jié)果

2.1兩組血清BAFF、尿蛋白定量、肝腎功能、血糖及CD20水平比較結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2PMN患者血清BAFF水平與24 h尿蛋白定量、血漿ALB水平及CD20計(jì)數(shù)的關(guān)系Spearman相關(guān)性分析顯示，血清BAFF水平與尿蛋白定量呈正相關(guān)(r=0.781，P=0.000)，與血漿白蛋白水平呈負(fù)相關(guān)(r=-0.755，P=0.000)，與CD20計(jì)數(shù)呈正相關(guān)(r=0.678，P=0.000)。

3討論

盡管PMN具體發(fā)病機(jī)制尚不明確，但既往國(guó)內(nèi)外多項(xiàng)研究均發(fā)現(xiàn)PMN患者體內(nèi)存在明顯淋巴細(xì)胞異常，主要表現(xiàn)為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞水平降低，B淋巴細(xì)胞水平上調(diào)，且病情緩解后上述異常得以糾正[2,8]。另有學(xué)者應(yīng)用抗B細(xì)胞的單克隆抗體治療PMN，病情迅速緩解。因此，目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為B淋巴細(xì)胞功能異常在PMN的發(fā)病中起重要作用。B淋巴細(xì)胞被異常活化后，可介導(dǎo)機(jī)體體液免疫，識(shí)別呈遞抗原，足細(xì)胞靶抗原成分與相應(yīng)抗體形成原位免疫復(fù)合物，激活補(bǔ)體導(dǎo)致局部組織損傷，從而發(fā)生PMN。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，PMN患者外周血CD19+細(xì)胞計(jì)數(shù)占總淋巴細(xì)胞的比例顯著升高，表現(xiàn)出明顯的B淋巴細(xì)胞異常激活，且CD19+細(xì)胞計(jì)數(shù)與蛋白尿定量有關(guān)[9]，與國(guó)內(nèi)外多數(shù)學(xué)者的研究結(jié)果一致。

表1　兩組血清BAFF、24 h尿蛋白定量、肝腎功能、血糖及CD20水平比較

組別nUA(μmol/L)CHO(mmol/L) TG(mmol/L) GLU(mmol/L) CD20(%) 觀察組30316.50±88.578.12±2.21*2.57±1.68*5.99±3.3021.10±6.79*對(duì)照組10331.13±114.834.16±1.031.41±1.405.25±2.2215.10±5.13

注：與對(duì)照組比較，*P<0.05。

BAFF是腫瘤壞死因子配體超家族的一個(gè)重要成員，1999年最先由Mukhopadhyay等克隆成功。BAFF主要表達(dá)于髓樣單核細(xì)胞系，有很強(qiáng)的B細(xì)胞趨向性，作為一種淋巴細(xì)胞的共刺激因子，BAFF對(duì)活化B細(xì)胞有強(qiáng)烈的促進(jìn)增殖和分化的刺激作用，還參與了T細(xì)胞的活化與應(yīng)答[5]。BAFF主要通過(guò)與其受體BAFF-R結(jié)合發(fā)揮上述作用[10]。近年來(lái)，越來(lái)越多研究證實(shí)，BAFF參與多種自身免疫性疾病的發(fā)生[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，PMN患者體內(nèi)BAFF水平明顯升高，與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；且BAFF水平與CD20計(jì)數(shù)呈正相關(guān)，說(shuō)明BAFF可激活B淋巴細(xì)胞的活性；BAFF水平與24 h尿蛋白定量呈正相關(guān)，與血漿ALB水平呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明B淋巴細(xì)胞活性越強(qiáng)，PMN患者的腎臟損害越明顯，臨床表現(xiàn)越重。

長(zhǎng)期以來(lái)，糖皮質(zhì)激素和烷化劑是治療PMN的首選藥物。盡管當(dāng)前針對(duì)PMN的治療方案能有效減少或控制蛋白尿，甚至有部分患者可自行緩解，但仍有多數(shù)患者對(duì)上述藥物不敏感[12]。其他針對(duì)B細(xì)胞如BAFF融合蛋白片段、B淋巴細(xì)胞激活因子抑制劑如BAFFR-Ig和TACI-Ig、抗CD22單抗等用于治療SLE、ANCA相關(guān)性血管炎的臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中[13]，上述新藥是否對(duì)PMN患者有效，需大量基礎(chǔ)研究支持。

綜上所述，PMN患者血清BAFF水平明顯升高，血清BAFF水平與24 h尿蛋白定量、CD20計(jì)數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系，與血漿白蛋白水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。推測(cè)BAFF在PMN發(fā)病中起重要作用；BAFF抑制劑或單克隆抗體有望為PMN患者提供新的治療方法。

參考文獻(xiàn)：

[1] Kuroki A, Iyoda M, Shibata T, et al. Th2 cytokines increase and stimulate B cells to produce IgG4 in idiopathic membranous nephropathy[J]. Kidney Int, 2005,68(1):302-310.

[2] 王波,劉志紅,吳燕,等.特發(fā)性膜性腎病患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的變化及其臨床意義[J].腎臟病與透析腎移植雜志,2009,18(4):322-328.

[3] Busch M, Rüster C, Schink?the C, et al. Rituximab for the second- and third-line therapy of idiopathic membranous nephropathy: a prospective single center study using a new treatment strategy[J]. Clin Nephrol, 2013,80(2):105-113.

[4] Cravedi P, Remuzzi G, Ruggenenti P. Rituximab in primary membranous nephropathy: first-line therapy, why not[J]. Nephron Clin Pract, 2014,128(3-4):261-269.

[5] Moisini I, Davidson A. BAFF: a local and systemic target in autoimmune diseases[J]. Clin Exp Immunol, 2009,158(2):155-163.

[6] Shao J, Peng Y, He L, et al. Capsaicin induces high expression of BAFF and aberrantly glycosylated IgA1 of tonsillar mononuclear cells in IgA nephropathy patients[J]. Hum Immunol, 2014,75(10):1034-1039.

[7] Li W, Peng X, Liu Y, et al. TLR9 and BAFF: their expression in patients with IgA nephropathy[J]. Mol Med Rep, 2014,10(3):1469-1474.

[8] Wang B, Zuo K, Wu Y, et al. Correlation between B lymphocyte abnormality and disease activity in patients with idiopathic membranous nephropathy[J]. J Int Med Res, 2011,39(1):86-95.

[9] 馬東紅,郭明好,許清玉,等.原發(fā)性膜性腎病患者外周血淋巴細(xì)胞亞群的變化及其與蛋白尿的關(guān)系[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2015,12(1):55-57.

[10] Liu Z, Davidson A. BAFF inhibition: a new class of drugs for the treatment of autoimmunity[J]. Exp Cell Res, 2011,317(9):1270-1277.

[11] Davidson A. Targeting BAFF in autoimmunity[J]. Curr Opin Immunol, 2010,22(6):732-739.

[12] Ardalan M. Triggers, bullets and targets, puzzle of membranous nephropathy[J]. Nephrourol Mon, 2012,4(4):599-602.

[13] Lenert A, Lenert P. Current and emerging treatment options for ANCA-associated vasculitis: potential role of belimumab and other BAFF/APRIL targeting agents[J]. Drug Des Devel Ther, 2015,(9):333-347.