周丹丹 李潔華

(鹽城市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科 江蘇 鹽城 224000)

卵巢癌患者在病情得到確診后，其5年的死亡率約為70%-80%。在卵巢癌患者中，上皮性卵巢癌（EOC）患者占85%-90%[1]。上皮源性腫瘤包括乳腺癌、肺癌、食管鱗狀細(xì)胞癌、胃癌、胰臟癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌和前列腺癌等。E盒結(jié)合鋅指蛋白1（ZEB1）是上皮源性腫瘤EMT的轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)因子之一[2]。鈣粘蛋白E（E-cadherin）的基因定位于人類染色體16q22.1附近，其異常的表達(dá)與乳腺癌、上皮性卵巢癌、鼻咽癌等惡性腫瘤發(fā)生侵襲轉(zhuǎn)移有關(guān)[3]。波形蛋白（Vimentin）的基因定位于人類染色體10p13的附近，其表達(dá)的水平與腫瘤細(xì)胞的惡性程度有密切的關(guān)系[4]。在本文中，我們采用免疫組化法檢測ZEB1、E-cadherin和Vimentin在50例上皮性卵巢癌組織和12例正常卵巢組織中表達(dá)的情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究的對象為2011～2014年鹽城市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科采集的62例卵巢組織標(biāo)本，其中有50例上皮性卵巢癌患者腫瘤原發(fā)灶的組織標(biāo)本，12例子宮肌瘤患者正常的卵巢組織標(biāo)本。提供上皮性卵巢癌組織標(biāo)本的50例患者其年齡在24～75歲之間，其中位年齡為55歲，其中卵巢癌的FIGO分期為Ⅰ期的患者有16 例 (32.00%)，為Ⅱ期的患者有6例(12.00%) ，為III期的患者有23例(46.00%)，為Ⅳ期的患者有5例(10.00%)，卵巢癌的分化程度為低分化的患者有11例 (22.00%)、為中分化的患者有19例（38.00%)、為高分化的患者有20例(40.00%)，卵巢癌的病理類型為漿液性腺癌的患者有31例(62.00%)，為黏液性腺癌的患者有13例(26.00%)，為其他類型的患者有6例（卵巢透明細(xì)胞癌患者1例、卵巢子宮內(nèi)膜樣腺癌患者5例,共占12.00%）。

1.2 方法 采用免疫組化法檢測本組組織標(biāo)本中ZEB1、E-cadherin和Vimentin表達(dá)的情況，檢測方法是：將本組標(biāo)本用福爾馬林進(jìn)行固定，用石蠟進(jìn)行包埋(應(yīng)選取癌巢中心的組織進(jìn)行石蠟包埋)，對組織蠟塊進(jìn)行連續(xù)切片，將其切成4-5張3μm厚的組織切片，置于60℃的烤箱中保存30min左右。對這些組織切片采用常規(guī)的蘇木素-伊紅（HE）法與免疫組織化學(xué)SP法進(jìn)行染色。由鹽城市第一人民醫(yī)院病理科的兩名病理醫(yī)師共同分析并判定檢測結(jié)果，判定方法是：將本組組織切片置于400倍的顯微鏡下，隨機(jī)選取5個不同的視野，采用半定量計(jì)分法進(jìn)行分析。組織切片中細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)若出現(xiàn)淡黃色、棕黃色或棕褐色的顆?？膳卸ㄆ渲衂EB1的表達(dá)呈陽性。組織切片中細(xì)胞的細(xì)胞膜若呈黃色或棕黃色，可判定其中E-cadherin的表達(dá)呈陽性。組織切片中細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)若出現(xiàn)淡黃色、棕黃色或棕褐色的顆粒，可判定其中Vimentin的表達(dá)呈陽性。計(jì)算本組組織切片中ZEB1、E-cadherin和Vimentin呈陽性的細(xì)胞所占的百分比。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件對本研究中的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 在本組組織標(biāo)本中ZEB1表達(dá)情況的分析 上皮性卵巢癌組織標(biāo)本中ZEB1表達(dá)的陽性率高于正常的卵巢組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。詳情見表1。

表1 在本組組織標(biāo)本中ZEB1表達(dá)情況的分析[例（%）]

2.2 在本組組織標(biāo)本中E-cadherin表達(dá)情況的分析上皮性卵巢癌組織標(biāo)本中E-cadherin表達(dá)的陽性率高于正常的卵巢組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。詳情見表2。

表2 在本組組織標(biāo)本中E-cadherin表達(dá)情況的分析[例（%）]

正常卵巢組織120（0.0）12（100.0）8.775 0.003上皮性卵巢癌組織5023（46.0）27（54.0）

2.3 對本組組織標(biāo)本中Vimentin表達(dá)情況的分析 上皮性卵巢癌組織標(biāo)本中Vimentin表達(dá)的陽性率高于正常的卵巢組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。詳情見表3。

表3 對本組組織標(biāo)本中Vimentin表達(dá)情況的分析[例（%）]

3 討論

上皮性卵巢癌的致死率位居?jì)D科惡性腫瘤致死率的第五位。上皮性卵巢癌起源于卵巢表面的生發(fā)上皮、卵巢皮質(zhì)的包涵囊腫或鄰近的遠(yuǎn)端輸卵管上皮[5]。由于缺乏有效的診斷及治療方法，全球每年死于上皮性卵巢癌的患者約有125000例[6]。上皮性卵巢癌患者的五年生存率與其腫瘤的臨床分期密切相關(guān)。此病患者若在腫瘤的臨床分期為I期或II期時得到診斷和治療，其5年存活率可達(dá)到90%以上[7]。然而，大多數(shù)上皮性卵巢癌患者的病情在得到確診時已進(jìn)入晚期（臨床分期為III期和IV期），其5年存活率僅為30%～40%[8]。目前，臨床上尚無可精確診斷早期上皮性卵巢癌的非侵入性檢測方法。

ZEB家族屬于鋅指蛋白類的轉(zhuǎn)錄因子，其家族成員包含ZEB1和ZEB2等。研究證實(shí)，ZEB1和ZEB2可抑制E-cadherin的表達(dá)，誘導(dǎo)EMT的發(fā)生，促進(jìn)腫瘤的發(fā)展、轉(zhuǎn)移及擴(kuò)散[9]。在卵巢癌等惡性腫瘤組織中，ZEB1和ZEB2的表達(dá)水平均較高[10]。我們的研究結(jié)果顯示，ZEB1在正常卵巢組織中無表達(dá)，在上皮性卵巢癌組織中的表達(dá)增多。ZEB1主要分布在腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核中，可能具有促進(jìn)上皮性卵巢癌發(fā)生發(fā)展的作用。E-cadherin是鈣粘蛋白家族的重要成員，具有維持上皮細(xì)胞的極性和正常結(jié)構(gòu)等作用。在大多數(shù)腫瘤發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化和進(jìn)展的過程中，E-cadherin的表達(dá)下調(diào)均可介導(dǎo)細(xì)胞間粘附性的丟失[11,12]。我們的研究結(jié)果顯示，E-cadherin在正常的卵巢組織中無表達(dá)，在上皮性卵巢癌中的表達(dá)增多。E-cadherin主要分布在腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜中。Vimentin的表達(dá)與前列腺癌、胃腸道腫瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤、乳腺癌、惡性黑色素瘤及肺癌等腫瘤細(xì)胞的惡性程度密切相關(guān)，其在腫瘤中的過表達(dá)與腫瘤的生長、對正常組織的侵襲及腫瘤患者的預(yù)后均有關(guān)[13]。我們的研究結(jié)果顯示，Vimentin在正常的卵巢組織中無表達(dá)，在上皮性卵巢癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)呈陽性。

綜上所述，檢測ZEB1、E-cadherin和Vimentin表達(dá)的情況在診斷上皮性卵巢癌方面具有重要的意義。

[1]De Craene B and Berx G. Regulatory networks defining EMT during cancer initiation and progression. Nat Rev Cancer,2013, 13: 97-110.

[2]Davidson B,Tropé CG,Reich R. Epithelial-mesenchymal tr ansition in ovarian carcinoma.Front Oncol,2012,2: 33.

[3]Yokobori T, Suzuki S, Tanaka N, Inose T, Sohda M, et al .MiR-150 is associated with poor prognosis in esophageal squamous cell carcinoma via targeting the EMT inducer ZEB1.Cancer Sci,2013,104: 48–54.

[4]Roche J, Nasarre P, Gemmill R, Baldys A, Pontis J, et al.G lobal Decrease of Histone H3K27 Acetylation in ZEB1-In duced Epithelial to Mesenchymal Transition in Lung Can cer Cells. Cancers (Basel),2013,5: 334–56.

[5]Yang Y, Ahn YH, Chen Y, Tan X, Guo L, et al. ZEB1 sensiti zes lung adenocarcinoma to metastasis suppression by PI 3K antagonism. J Clin Invest,2014,In press.

[6]Lobert S, Graichen ME, Morris K .Coordinated regulation of b-tubulin isotypes and epithelial-to-mesenchymal tr ansition protein ZEB1 in breast cancer cells.Biochemist ry,2013,52: 5482–90.

[7]羅愛華,高嵋,謝樂,等.鼻咽癌組織中上皮-間葉轉(zhuǎn)換的檢測及與其轉(zhuǎn)移的相關(guān)性. 實(shí)用癌癥雜志,2012,27:449-452.

[8]徐文清,胡衛(wèi),肖戈,等.E-cadherin及Vimentin在腎上腺皮質(zhì)癌中的表達(dá)及其意義.實(shí)用癌癥雜志,2013,28(3):243-245.

[9]張麗娜,張淑敏.Vimentin、Ki-67在透明細(xì)胞性腎細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其與MVD的相關(guān)性研究.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2012,16(03):457-459.

[10]謝建中,魏嘉,梁佳,等.肝細(xì)胞癌組織中E-cadherin、N-cad herin、Vimentin的表達(dá)變化及意義.山東醫(yī)藥,2010,50(22):90-91.

[11]Geminill RM, Roche J,Potiron VA,et al. ZEBl-responsive genes in non-small cell lung cancer. Cancer Lett, 2011,300(1):66-78.

[12]Sivertsen S, Berner A, Michael C W, et al. Cadherin expre ssion in ovarian carcinoma and malignant mesothelioma cell effusions.Acta Cytol, 2006, 50(6): 603.

[13]Cheng JC,Auersperg N,Leung PC.TGF-beta induces serous borderline ovarian tumor cell invasion by activating EM T but triggers apoptosis in low-grade serous ovarian ca rcinoma cells. PloS One,2012,7(8):e42436.