■陳國旺 黃大鵬

（黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)，黑龍江大慶 163319）

抗生素作為畜禽抗病促長添加劑所帶來的畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全問題一直為消費者所詬病，替代抗生素的安全低毒飼料添加劑研究正成為動物營養(yǎng)研究的熱點問題。谷氨酰胺(Gln)和功能性寡糖均因具有促進動物腸道免疫細胞的增殖，以及維持腸道結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定和家畜腸道菌群平衡作用而被認為是抗生素的較好替代品。肖英平等[1]研究發(fā)現(xiàn)，在28日齡斷奶仔豬飼糧中添加Gln(10 g/kg)能顯著提高仔豬生長性能和腸道健康因子的表達量。車向榮等[2]報道，異麥芽低聚糖能增強斷奶仔豬的免疫功能，促進營養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收效率。而Gln和IMO的互作效應(yīng)對斷奶仔豬的影響未見報道，本試驗通過在斷奶仔豬日糧中添加不同劑量的Gln和IMO，研究二者的互作效應(yīng)對斷奶仔豬生長性能及腸道微生物的影響，為其能否替代抗生素提供理論依據(jù)。

1 材料方法

1.1 試驗動物及試驗設(shè)計

試驗采用兩因素三水平析因設(shè)計，選擇日齡相近，體重在(8.12±0.47)kg健康的杜大長三元斷奶仔豬81頭，隨機分為9個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)3頭，1個對照組不添加Gln和 IMO，8個試驗組分別飼喂含不同劑量Gln和IMO的日糧。試驗設(shè)計與分組見表1。試驗預(yù)飼期7 d，試驗期28 d。

表1 試驗設(shè)計與分組

1.2 試驗動物飼養(yǎng)管理與試驗日糧

試驗仔豬采用高床網(wǎng)上飼養(yǎng)，每個處理一欄。試驗前對豬舍進行徹底清洗消毒，試驗豬采用自動料槽給料，自動飲水供水。保證豬舍清潔，按時消毒和嚴格執(zhí)行豬場免疫程序。每天觀察豬群的采食和健康狀況。

試驗豬日糧參照中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 65—2004）需要配制，制成顆粒料飼喂，基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平見表2。

表2 基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平

1.3 測定指標(biāo)及測定方法

1.3.1 生長性能的測定

分別于試驗開始后第0、第14 d和第28 d，仔豬空腹稱重，詳細記錄各處理組采食量，計算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)以及料重比(F/G)。

1.3.2 腸道微生物的測定

在試驗期開始后第7 d，每組選取體重相近的3頭仔豬屠宰，分別取空腸、回腸和盲腸內(nèi)容物，分別裝入相應(yīng)的塑封袋中，放到4℃冰箱中，短時間保存，待屠宰完后，帶回實驗室立即進行微生物的測定，分別測定斷奶仔豬回腸、空腸和盲腸中大腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌的數(shù)量。采用平板涂布法計數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)經(jīng)過Excel 2007整理后，采用SPSS 21.0軟件中ANOVA模塊進行兩因素有重復(fù)方差分析，用Duncan's法進行多重比較。試驗結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”。

2 結(jié)果

2.1 IMO和Gln的互作效應(yīng)對斷奶仔豬生長性能的影響（見表3）

從表3可以看出，試驗0～14 d，試驗Ⅰ～Ⅳ組平均日增重與對照組差異不顯著(P＞0.05)，而試驗Ⅴ～Ⅷ組顯著高于對照組和其它四組(P＜0.05)，添加Gln和IMO能顯著提高斷奶仔豬的日增重水平(P＜0.05)；日糧添加Gln和IMO均極顯著提高豬只日采食量(P＜0.01)，且試驗Ⅴ～Ⅷ組顯著高于試驗Ⅰ～Ⅳ組(P＜0.05)，添加Gln與IMO的互作效應(yīng)極顯著影響平均日采食量(P＜0.01)；添加Gln和IMO或其互作效應(yīng)均對料重比沒有顯著差異(P＞0.05)；試驗Ⅴ組平均日采食量和平均日增重最高。試驗15～28日齡，各試驗組平均日增重差異不顯著(P＞0.05)，試驗Ⅴ～Ⅶ組日采食量差異不顯著(P＞0.05)，Gln×IMO平均日增重差異不顯著(P＞0.05)。

2.2 IMO和Gln互作效應(yīng)對斷奶仔豬腸道微生物的影響（見表4）

2.2.1 IMO和Gln互作效應(yīng)對斷奶仔豬盲腸微生物的影響

由表4可見，大腸桿菌方面，試驗Ⅰ～Ⅱ組、試驗Ⅲ～Ⅴ組和試驗Ⅵ～Ⅷ組之間差異顯著(P＜0.05)，且均顯著低于對照組(P＜0.05)，單獨添加 IMO和Gln均能降低斷奶后仔豬盲腸中大腸桿菌數(shù)量(P＜0.05)，其互作效應(yīng)明顯(P＜0.05)；乳酸菌方面，試驗Ⅴ組與其他各組相比差異顯著(P＜0.05)，其他試驗組之間差異均不顯著(P＞0.05)，且均顯著高于對照組(P＜0.05)；雙歧桿菌方面，試驗Ⅳ～Ⅷ組與試驗Ⅰ～Ⅲ組相比差異顯著(P＜0.05)，且均顯著高于對照組(P＜0.05)；單獨添加IMO對乳酸桿菌影響不顯著(P＞0.05)，二者互作效應(yīng)對其影響顯著(P＜0.05)。

表3 日糧中不同添加量Gln和IMO對斷奶仔豬生長性能的影響

表4 日糧添加Gln和IMO對斷奶仔豬各腸段微生物的影響(log cfu)

2.2.2 IMO和Gln互作效應(yīng)對斷奶仔豬空腸微生物的影響

表4結(jié)果顯示，大腸桿菌方面，試驗Ⅱ組和試驗Ⅰ組與其他組相比差異顯著(P＜0.05)，其他各試驗組之間差異均不顯著(P＞0.05)，單獨添加Gln和IMO對抑制大腸桿菌繁殖均有作用(P＜0.05)，添加Gln的抑制作用更明顯；乳酸桿菌方面，各試驗組顯著高于對照組(P＜0.05)，試驗Ⅲ～Ⅷ組間差異均不顯著(P＞0.05)，單獨添加 Gln 達 15 g/kg的效果顯著(P＜0.05)，Gln和IMO的互作效應(yīng)對其影響顯著(P＜0.05)；雙歧桿菌方面，試驗Ⅲ～Ⅴ組與試驗Ⅵ組和試驗Ⅶ組相比差異顯著(P＜0.05)，單獨添加Gln對雙歧桿菌的增值有極顯著的促進作用(P＜0.01)，二者的互作效應(yīng)影響極顯著(P＜0.01)。

2.2.3 IMO和Gln互作效應(yīng)對斷奶仔豬回腸微生物的影響

由表4可知，大腸桿菌方面，各試驗組與對照組相比差異顯著(P＜0.05)，試驗Ⅲ～Ⅷ組之間差異不顯著(P＞0.05)，單獨添加Gln和IMO對抑制大腸桿菌繁殖均有作用(P＜0.05)，二者的互作效應(yīng)影響不顯著(P＞0.05)；乳酸桿菌方面，試驗Ⅵ～Ⅶ組與試驗Ⅲ～Ⅴ組相比差異顯著(P＜0.05)，試驗Ⅵ～Ⅶ組之間差異不顯著(P＞0.05)，單獨添加Gln組乳酸桿菌差異不顯著(P＞0.05)；雙歧桿菌方面，試驗Ⅵ組和試驗Ⅷ組與其他各組相比差異顯著，且均顯著高于對照組(P＜0.05)，單獨添加Gln和IMO均有顯著效果(P＜0.05)，二者的互作效應(yīng)影響顯著(P＜0.05)。

3 討論

3.1 IMO和Gln互作效應(yīng)對仔豬生長性能影響

仔豬早期斷奶時，由于仔豬胃腸功能發(fā)育不健全，機體會產(chǎn)生明顯應(yīng)激現(xiàn)象，在此過程中，仔豬會出現(xiàn)腹瀉和采食量下降等反應(yīng)，此時，則需要仔豬通過分解自身的貯存營養(yǎng)轉(zhuǎn)化來維持機體的營養(yǎng)平衡。而隨著仔豬對環(huán)境的逐漸適應(yīng)，會使仔豬的平均日采食量和平均日增重均增加[1]。

本試驗結(jié)果表明，仔豬在斷奶早期時，平均日增重和平均日采食量較低，而隨著日齡的不斷增加，其平均日增重和平均日采食量也顯著提高，這與肖英平[1]提出的觀點一致。添加不同水平的Gln會提高斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量，徐衛(wèi)丹等[3]試驗結(jié)果表明，21～35日齡的仔豬日糧中添加1%Gln能顯著提高日采食量和平均日增重。本試驗表明，在日糧中添加1%和1.5%的Gln會提高仔豬的生長性能，這與徐衛(wèi)丹等(2005)[3]報道一致。低聚異麥芽糖作為低聚寡糖被添加到飼糧中，因為它能提高飼糧的適口性，從而間接的提高斷奶仔豬的采食量。羅麗萍等[4]研究表明，在斷奶仔豬日糧中添加0.2%、0.4%和0.8%IMO，保育豬的日增重變化是0.4%IMO＞0.2%IMO＞0.8%IMO。在日采食量方面，保育豬的日采食量的變化0.2%IMO＞0.4%IMO＞0.8%IMO。在保育豬日糧中添加0.2%IMO和0.4%IMO可以提高仔豬的日采食量和日增重。本試驗結(jié)果表明，在飼糧中添加6 g/kg和10 g/kg的低聚異麥芽糖可以提高斷奶仔豬的生長性能，本試驗結(jié)果與羅麗萍等結(jié)果有差異，這種差異可能來自豬種、飼養(yǎng)區(qū)域的差異，還可能是IMO的純度差異。

3.2 IMO和Gln對斷奶仔豬腸道微生物的影響

健康動物的腸道中有害菌和有益菌應(yīng)該處于一個動態(tài)平衡狀態(tài)，當(dāng)機體處于應(yīng)激狀態(tài)時（斷奶、氣候變化等），各段腸道內(nèi)有害菌量就會增加，有益菌量會降低。因此，控制好腸道菌群平衡是很關(guān)鍵的[5]。低聚糖對有害菌起到抑制作用，對有益菌（雙歧桿菌和乳酸菌）起到促進作用[5]。研究表明，斷奶仔豬日糧中添加Gln也能夠促進有益菌和有害菌的增長。

雙歧桿菌在腸道中的代謝產(chǎn)物可以抑制腸道內(nèi)致病菌，加速腸蠕動，有利于腸道內(nèi)致病菌的排出，可以維持腸道菌群平衡[6]。低聚異麥芽糖有助于腸道雙歧桿菌生長。趙玉蓉等[7]發(fā)現(xiàn)，在日糧添加1%的Gln可以使斷奶仔豬各段腸中大腸桿菌的數(shù)量顯著降低，同時會使各段腸中有益菌(雙歧桿菌和乳酸菌)數(shù)量明顯增加。劉婷婷等[8]研究表明，日糧中添加谷氨酰胺和丁酸梭菌，會顯著提高斷奶后7日齡和14日齡仔豬盲腸中的乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量，降低盲腸中大腸桿菌的數(shù)量。張宏福等[9]研究也表明，日糧中添加低聚異麥芽糖可以抑制大腸桿菌的增長，同時，能促進雙歧桿菌和乳酸菌的增長。本試驗結(jié)果表明，在日糧中添加10 g/kgIMO會顯著降低斷奶仔豬盲腸、空腸和回腸中大腸桿菌數(shù)量。日糧中添加10 g/kgGln顯著提高斷奶仔豬盲腸和空腸的雙歧桿菌和乳酸菌的數(shù)量，日糧中添加15 g/kgGln顯著提高仔豬空腸和回腸中雙歧桿菌和乳酸菌的數(shù)量。

4 結(jié)論

①在日糧中添加Gln(10 g/kg或15 g/kg)和IMO(10 g/kg)顯著提高斷奶仔豬的平均日增重和平均日采食量，Gln(10 g/kg)和IMO(10 g/kg)的組合時對斷奶仔豬的生長性能提高更加顯著。

②在日糧中添加Gln(10 g/kg或15 g/kg)和IMO(10 g/kg)能顯著提高斷奶仔豬的盲腸、空腸和回腸內(nèi)容物中乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量，降低大腸桿菌的數(shù)量。