摘要：目的 對梅毒酶聯(lián)免疫吸附測定（TP-EIISA）法假陽性結(jié)果進(jìn)行分析。方法 采用TP-ELISA法對2924例標(biāo)本進(jìn)行梅毒特異性抗體檢測。陽性標(biāo)本分為吸光度/臨界值比值低值組（1～2）和S/CO（>2）高值組；同時(shí)所有標(biāo)本用TPPA法復(fù)檢，對結(jié)果進(jìn)行對比分析。結(jié)果 TP-ELISA法與TPPA法2種方法梅毒抗體檢測結(jié)果無顯著差別，但S/CO低值組與高值組結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 TP-ELISA檢測梅毒特異抗體可行；但對于S/CO低值標(biāo)本應(yīng)加用TPPA方法以排除假陽性。

關(guān)鍵詞：梅毒；假陽性；分析

梅毒的血清學(xué)檢測是診斷梅毒的重要依據(jù)之一，它在梅毒的診斷、治療及研究方面均有重要意義[1]。目前檢測梅毒螺旋體感染的血清學(xué)方法主要是酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA），但常常遇到出現(xiàn)假陽性。梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（treponema pallidum particle assay，TPPA）特異性好、靈敏度高，是日前公認(rèn)的梅毒血清確證試驗(yàn)[2]。本研究通過以TPPA法與EIISA結(jié)果對比，試圖對ELISA檢測假陽性結(jié)果進(jìn)行分析。

1資料與方法

1.1一般資料 2012年1月～2014年12月在兵團(tuán)第七師人民醫(yī)院住院做輸血前篩查的患者血清標(biāo)本2924例，其中男1778例，女1146例，年齡17～75歲。均采用常規(guī)靜脈采血。

1.2 儀器和試劑 TP-ELISA試劑由珠海麗珠試劑有限公司提供，TPPA試劑為日本富士株式會社產(chǎn)品。酶標(biāo)儀，Anthos 2010型（奧地利生產(chǎn)）。洗板機(jī)，Anthos fluido 24200型（奧地利生產(chǎn)）。試劑檢測臨界值（cutoff）為0.20+陰性對照平均吸光度值，使用Wellscan MK3酶標(biāo)儀讀取吸光度值，以吸光度/臨界值比值[吸光度/臨界值（absorbance of sample/cut-off rate，S/CO）]為判定標(biāo)準(zhǔn)，S/CO≥1為陽性，S/C0<1為陰性。每例標(biāo)本用2種試劑同時(shí)檢測，兩法按說明書操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果

以TP-EIISA與TPPA檢測2924例標(biāo)本結(jié)果對比，相對于TPPA，TP-ELISA的靈敏度達(dá)100%（109/109），特異度達(dá)99.9%（2812/2815），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表1。112例ELISA陽性標(biāo)本中，按S/CO分成S/CO低值組（1～2）和高值組（>2）兩組。其中S/C0低值組38例，S/CO高值組74例，兩法差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。

3討論

血清學(xué)檢測一直是梅毒診斷的主要方法，目前常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗體明膠凝集試驗(yàn)具有高敏感性的特點(diǎn)。但是在臨床工作中，經(jīng)常遇見假陰性與假陽性，需要仔細(xì)分析研究。造成檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽性或假陰性的原因是多方面的，包括實(shí)驗(yàn)室操作、試劑、檢驗(yàn)方法等。為提高檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性和可靠性，需要患者、臨床醫(yī)生、實(shí)驗(yàn)室醫(yī)生甚至患者家屬的密切配合。

實(shí)驗(yàn)室對梅毒螺旋體特異性抗體檢測最常用的檢測方法是TP-ELISA和TPPA（或梅毒螺旋體血細(xì)胞凝集試驗(yàn)TPHA）。TPPA（或TPHA）已被美國疾病控制中心（CDC）定為確診方法，而TP-ELISA對IgM和IgG都具有很好的檢測能力，并且具有靈敏度高、價(jià)格低、結(jié)果客觀的優(yōu)點(diǎn)，易于自動化操作已被廣泛使用[3]。酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對IgG、IgM都有很好的檢測能力，因其靈敏度高、價(jià)格低廉、操作方便、結(jié)果客觀在國內(nèi)廣泛使用。梅毒抗體假陽性的主要原因有：①生物學(xué)假陽性反應(yīng)。由非密螺旋體疾病的病原體和其它致病因素所引起的反應(yīng)素反應(yīng)。如急性傳染病中的瘧疾、巨細(xì)胞病毒性肺炎。慢性傳染病中的已型肝炎、麻風(fēng)或免疫系統(tǒng)疾病中的系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。②標(biāo)本因素：血液標(biāo)本溶血、離心處理不徹底、細(xì)菌污染引起的假陽性[4]。鑒于篩檢試驗(yàn)對靈敏度的要求高于特異度的特點(diǎn)，TP-ElISA法替代TPPA法作為日常梅毒抗體篩選是可行的[5]。

本文通過2924例梅毒抗體檢測結(jié)果分析還表明，158例TP-ELISA陽性標(biāo)本經(jīng)過TPPA復(fù)檢有3例呈陰性，且均出現(xiàn)在S/CO低值組。證實(shí)在在此組標(biāo)本中2種方法檢測結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此我們認(rèn)為：為提高梅毒檢測的準(zhǔn)確性，在做梅毒抗體檢測時(shí)，可以先用TP-ELISA法，若為陽性再用TP-PA法確認(rèn)，這樣既減少了醫(yī)療支出，又減少了因假陽性帶來的隱患，避免不必要的醫(yī)療糾紛。

綜上所述，為提高實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們應(yīng)該加強(qiáng)以下方面的工作：①作為實(shí)驗(yàn)室的工作人員應(yīng)嚴(yán)格檢查試劑、儀器等確保能夠掌握能夠正常工作，杜絕認(rèn)為操作因素導(dǎo)致的檢驗(yàn)結(jié)果的錯誤。②強(qiáng)烈呼吁臨床醫(yī)生在對患者進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查前，對患者進(jìn)行詳細(xì)的檢查及相關(guān)病史及服藥情況的詢問。③呼吁患者要嚴(yán)格遵醫(yī)囑，比如：檢查前空腹、停藥等。只有三方共同努力，密切配合，才能降低實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的假陽性與假陰性率。才能為臨床診斷的可靠依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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[3]黃冬梅，鄒雪松，楊慧敏，等.血清梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)假陽性結(jié)果分析[J].中國綜合臨床，2013，29（13）：37-38

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[4]邰平，王進(jìn)江.ELISA法檢測梅毒抗體假陽性原因分析及其對策[J].江蘇預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，3（21）：56-57.

[5]王露楠，鄧巍.李金明.梅毒螺旋體感染不同血清學(xué)診斷方法的臨床評價(jià)[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2002，25（6）：353.

編輯/王海靜