摘要：目的 分析和探討液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)在胸腹水標(biāo)本中的有效運(yùn)用。方法 收集我院病理科2010年10月～2014年5月的胸腹水標(biāo)本380例，然后分別采取傳統(tǒng)涂片技術(shù)和液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)對(duì)胸腹水標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查，最后對(duì)檢查的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比和分析。結(jié)果 傳統(tǒng)涂片技術(shù)的腫瘤細(xì)胞檢出率為11.32%；液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)腫瘤細(xì)胞檢出率為22.63%，而且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)腫瘤細(xì)胞檢出率比較高，可以進(jìn)行臨床推廣應(yīng)用。

關(guān)鍵詞：液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)；胸腹水標(biāo)本；運(yùn)用 胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)檢查由于對(duì)患者損傷較小，操作方法簡(jiǎn)單，檢查周期較短，已成為診斷腫瘤的重要方法[1]。由于多種因素的影響，傳統(tǒng)的涂片技術(shù)的腫瘤細(xì)胞檢出率并不是很高，因此使很多疾病不能得到及時(shí)有效的治療。隨著細(xì)胞學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)作為一種新的細(xì)胞學(xué)檢查方式克服了傳統(tǒng)涂片技術(shù)的缺點(diǎn)，逐漸成為細(xì)胞學(xué)病理技術(shù)的研究熱點(diǎn)。本次研究選擇我院2010年10月～2014年5月的胸腹水標(biāo)本380例，然后分別采取傳統(tǒng)涂片技術(shù)和液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)對(duì)胸腹水標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查，并對(duì)最終的結(jié)果進(jìn)行回顧性比較分析，現(xiàn)總結(jié)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選擇我院2010年10月～2014年5月的胸腹水標(biāo)本380例，其中胸水275例，腹水105例，分別采取傳統(tǒng)涂片技術(shù)和液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)對(duì)胸腹水標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查。其中，男210例，女170例，年齡為22～89歲。

1.2方法

1.2.1傳統(tǒng)涂片技術(shù) 取新鮮胸腹水置于2個(gè)10 mL 離心管內(nèi)，每管8 mL，2000 r/min，離心10～15 min，棄上清液，然后把沉淀物仔細(xì)涂抹在涂片上（血性標(biāo)本取紅細(xì)胞沉淀與上清液之間的細(xì)胞層），通常涂片的數(shù)量以3張為宜，接下來(lái)使用濃度為95%的乙醇對(duì)涂片進(jìn)行固定，大約10 min以后再進(jìn)行巴氏染色，中性樹(shù)膠對(duì)涂片進(jìn)行封固，最后將處理好的涂片送至顯微鏡下進(jìn)行觀察。

1.2.2液基薄層細(xì)胞制片技術(shù) 取新鮮胸腹水置于2個(gè)10 mL 離心管內(nèi)，每管8 mL，2000 r/min，離心10～15 min，棄去上清液，保留管底有用細(xì)胞，再加入大約細(xì)胞團(tuán)體積3倍的細(xì)胞基液。在漩渦混勻器上混勻10 s后，用移液器吸取15 ml在脫脂載玻片上涂片，涂片面積直徑為1.5 cm。涂片干燥后用95% 乙醇固定30 min，巴氏染色，中性樹(shù)膠封固，最后將處理好的涂片送至顯微鏡下進(jìn)行觀察。

1.3診斷方法 采取傳統(tǒng)涂片技術(shù)和液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)對(duì)胸腹水標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢查以后，由同一組細(xì)胞學(xué)專(zhuān)家來(lái)進(jìn)行閱片，對(duì)涂片的細(xì)胞進(jìn)行相應(yīng)的分級(jí)和分型。本次實(shí)驗(yàn)研究采用3級(jí)診斷法，將實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分為陽(yáng)性、陰性和可疑。檢出率=陽(yáng)性的例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2結(jié)果

傳統(tǒng)涂片技術(shù)的腫瘤細(xì)胞檢出率為11.32%；液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)腫瘤細(xì)胞檢出率為22.63%，因此液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)腫瘤細(xì)胞檢出率比傳統(tǒng)涂片技術(shù)的腫瘤細(xì)胞檢出率高，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

3討論

液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)通過(guò)薄層細(xì)胞處理來(lái)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行保存，這種技術(shù)的操作過(guò)程比較簡(jiǎn)單，同時(shí)它在細(xì)胞標(biāo)本的采集和制片方面也比傳統(tǒng)涂片技術(shù)有了明顯的進(jìn)步[2]。某腫瘤患者的細(xì)胞傳統(tǒng)涂片和液基薄層細(xì)胞制片，見(jiàn)圖1、圖2。一般情況下，外傷和腫瘤等都會(huì)引起胸腹腔出現(xiàn)積液，而胸腹水是很好的培養(yǎng)基，即使將胸腹水抽出體外以后，仍然能夠在較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)保持細(xì)胞的原有形態(tài)。為了保持細(xì)胞的原有形態(tài)，胸腹水應(yīng)當(dāng)及時(shí)送檢并進(jìn)行制片，假如胸腹水不能及時(shí)送檢和制片，可以采用低溫保持和加入適量酒精的方法來(lái)保持細(xì)胞的原有形態(tài)，使胸腹水細(xì)胞的質(zhì)量能夠滿(mǎn)足診斷的要求。巴氏染色是一種符合細(xì)胞學(xué)質(zhì)控要求的染色方法，它最大的優(yōu)點(diǎn)是能夠?qū)?xì)胞核的結(jié)構(gòu)進(jìn)行精確清晰的顯示[3]。

圖1 某腫瘤患者的細(xì)胞傳統(tǒng)涂片 圖2 某腫瘤患者的液基薄層細(xì)胞制片

肺癌、乳腺癌、淋巴瘤和胃腸道腫瘤等是胸腹水中最為常見(jiàn)的幾種轉(zhuǎn)移癌類(lèi)型[4]。在進(jìn)行胸腹水細(xì)胞的制片過(guò)程中，深紅色和暗紅色的樣本對(duì)制片的最終效果有更加明顯的影響，且此類(lèi)樣本用于制片中的量以16～30 ml為宜[5]。一般情況下，中間層為腫瘤細(xì)胞的聚集區(qū)域[6]。所以胸腹水細(xì)胞的制片過(guò)程的最關(guān)鍵的步驟在于中間層細(xì)胞的提取，此時(shí)必須把握好離心力，高速離心能夠使樣本中的細(xì)胞達(dá)到良好的分層效果。在實(shí)際的操作過(guò)程中，胸腹水液基細(xì)胞學(xué)診斷有三個(gè)要素，①在形態(tài)學(xué)上盡量對(duì)良惡性進(jìn)行區(qū)分，②與病史密切結(jié)合，③利用IHC對(duì)細(xì)胞塊進(jìn)行輔助診斷。大量的研究應(yīng)用證實(shí)，液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)可以有效避免涂片的厚薄不均現(xiàn)象，并且能夠及時(shí)清除雜質(zhì)的干擾，提高涂片的質(zhì)量，保證了樣本細(xì)胞的完整性，液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)增強(qiáng)了診斷時(shí)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的辨識(shí)度。因此，液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)可以大大提高腫瘤的確診率，使遺漏率降低。

本次實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果表明，傳統(tǒng)涂片技術(shù)的腫瘤細(xì)胞檢出率為11.32%；液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)腫瘤細(xì)胞檢出率為22.63%，因此液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)腫瘤細(xì)胞檢出率比傳統(tǒng)涂片技術(shù)的腫瘤細(xì)胞檢出率高，且差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，液基薄層細(xì)胞制片技術(shù)腫瘤細(xì)胞檢出率比較高，可以進(jìn)行臨床推廣應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)：

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編輯/張燕