馬榮光，曹　茜，尤忠孝*，張俊平，徐林強，劉偉杰

(1.河北省定興縣醫(yī)院檢驗科，河北 定興 072650；

2.河北省容城縣人民醫(yī)院檢驗科，河北 容城 071700)

·論著·

兒童腦脊液病原菌分布和抗生素敏感性分析

馬榮光1，曹茜2，尤忠孝2*，張俊平2，徐林強2，劉偉杰2

(1.河北省定興縣醫(yī)院檢驗科，河北 定興 072650；

2.河北省容城縣人民醫(yī)院檢驗科，河北 容城 071700)

[摘要]目的觀察兒童化膿性腦膜炎腦脊液病原菌分布及細菌耐藥性，為臨床診治兒童型腦膜炎提供實驗依據(jù)。方法選擇年齡<14歲的臨床確診化膿性腦膜炎患兒46例，回顧性分析其腦脊液細菌培養(yǎng)及抗生素敏感性試驗結(jié)果。結(jié)果46例細菌培養(yǎng)陽性的兒童腦膜炎患者中，病原菌以革蘭陰性桿菌為主58.7%(27/46株)，主要菌種為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血桿菌、陰溝腸桿菌；革蘭陽性球菌28.3%(27/46株)，主要菌種凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、糞腸球菌、無乳鏈球菌；白色念珠菌13.0%(6/46株)。三代頭孢菌素對革蘭陰性桿菌的敏感性較高，氨芐西林、哌拉西林、氯霉素的敏感率較差。革蘭陰性桿菌中共檢出產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶菌株7株，未檢出對美羅培南和亞安培南耐藥的革蘭陰性菌。青霉素對革蘭陽性球菌的的敏感性較高，未檢出對萬古霉素耐藥的革蘭陽性菌。結(jié)論兒童化膿性腦膜炎腦脊液病原菌分布廣泛，臨床應以參照實驗室結(jié)果為依據(jù)，合理選擇抗生素。

[關(guān)鍵詞]腦膜炎；病原；抗菌藥

doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2015.04.037

兒童化膿性腦膜炎是兒童嚴重的感染性疾病，臨床癥狀不典型，實驗室診斷延誤，常導致患兒治療不及時，病死率高。近年來由于抗生素的廣泛應用，耐藥菌和難治性化膿性腦膜炎有逐年增高的趨勢。因此，了解兒童腦膜炎病原學的分布對于指導臨床診斷治療至關(guān)重要。本研究對46例腦膜炎患兒腦脊液細菌培養(yǎng)的結(jié)果進行回顧性分析，旨在了解菌群分布特點及細菌耐藥性，報告如下。

1資料與方法

1.1一般資料選擇2004年1月—2014年12月在河北省定興縣醫(yī)院住院臨床診斷為化膿性腦膜炎并腦脊液細菌培養(yǎng)陽性的患兒46例,男性28例，女性18例，年齡1~14 歲，平均(5±2)歲。

1.2實驗菌株嚴格無菌操作后抽取腦脊液，注入增菌瓶中置于血培養(yǎng)儀(山東新科公司生產(chǎn))中增菌培養(yǎng)，培養(yǎng)陽性標本進行細菌鑒定及藥物敏感試驗。質(zhì)控菌株:采用質(zhì)控菌株大腸埃希菌(ATCC25922)、金黃色葡萄球菌(ATCC25923)、綠膿假單胞菌(ATCC27853)，進行細菌鑒定和藥物敏感質(zhì)量控制。

1.3β內(nèi)酰胺酶的檢測頭孢硝噻吩紙片蘸取菌落，1 min內(nèi)變紅為陽性。

1.4產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamases,ESBLs)的確證試驗頭孢噻肟/克拉維酸和頭孢噻肟、頭孢他啶/克拉維酸和頭孢他啶2組藥物敏感紙片檢測ESBLs。

2結(jié)果

2.1兒童化膿性腦膜炎病原菌分布共檢出腦脊液培養(yǎng)陽性標本46例，其中革蘭陰性細菌27株(58.7%)、革蘭陽性細菌13株(28.3%)、真菌6株(13.0%)，見表1。

表1　兒童腦膜炎病原菌分布

2.2細菌對抗生素的敏感性分析革蘭陰性細菌以腸桿菌科細菌占多數(shù)，對頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢他啶敏感性均在70%以上。對氨芐西林、哌拉西林敏感性較差。大腸桿菌ESBLs陽性菌株5株，分離率為50%；肺炎克雷伯菌ESBLs陽性菌株為2株，分離率為22.2%。未發(fā)現(xiàn)對亞胺培南和美羅培南耐藥的菌株。流感嗜血桿菌中未發(fā)現(xiàn)β內(nèi)酰胺酶的陽性菌株。

革蘭陽性細菌中，肺炎鏈球菌相對較多，對抗生素青霉素、氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢曲松敏感率在80%以上。青霉素對金黃色葡萄球菌和糞腸球菌的敏感率在70%左右，未發(fā)現(xiàn)萬古霉素耐藥的金黃色葡萄球菌和腸球菌。無乳鏈球菌對青霉素的敏感性為100%。

2.3預后與并發(fā)癥完全治愈36例(78.3%)，并發(fā)癥5例(10.9%)，病情危重、家屬放棄治療后死亡5例(10.9%),住院治療時間20~65 d。

3討論

兒童化膿性腦膜炎臨床表現(xiàn)不典型，顱內(nèi)壓增高出現(xiàn)晚，常缺乏腦膜刺激征，給早期診斷帶來困難?；颊叱跗谕鶓昧丝股?，造成病原學診斷更加困難。當前細菌耐藥性日益泛濫，更增加了治療的困難。因此，及時了解腦膜炎患兒病原學并掌握當?shù)夭≡哪退幪攸c對于指導臨床診斷和治療非常有幫助。腦脊液常規(guī)檢查和腦脊液細菌培養(yǎng)是診斷兒童化膿性腦膜炎的金標準，也是指導應用抗生素并關(guān)系到預后的重要實驗室指標。約25%敗血癥患兒并發(fā)化膿性腦膜炎，故國外多主張任何懷疑敗血癥的患兒應常規(guī)做腦脊液檢查[1]。由于大部分患兒在進行腰椎穿刺之前已經(jīng)應用了抗生素，腦脊液中細菌培養(yǎng)的陽性率較低。雖然降鈣素原和C反應蛋白對敗血癥早期診斷有一定價值，但是腦脊液細菌培養(yǎng)陽性結(jié)果不容忽視，了解兒童化膿性腦膜炎病原菌分布特點和藥物敏感分析結(jié)果有助于指導臨床合理應用抗生素。

本研究結(jié)果顯示，腦脊液病原學的分布種類廣泛，涉及革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌和真菌，涉及的種屬達10多個，革蘭陰性菌占58.7%，其中居首位的大腸埃希菌占21.7%，其次為肺炎克雷伯菌占19.6%。在革蘭陰性桿菌中值得關(guān)注的是流感嗜血桿菌，此菌主要定植在上呼吸道、鼻咽部等，最易侵犯顱腦部位引起感染，而且此菌培養(yǎng)困難，需要培養(yǎng)的條件苛刻，時間較長，需要的培養(yǎng)基要求較高，因此特別容易漏診，應該引起各實驗室的高度關(guān)注。在革蘭陽性球菌中，主要以凝固酶陰性葡萄球菌為主，其次為肺炎鏈球菌和糞腸球菌。各地報道的兒童腦膜炎病原學差異較大，各個國家和地區(qū)病原菌分布不同。西方國家以B族鏈球菌為主[2]，而亞洲兒童感染以革蘭陰性桿菌為主[3]。李鴻等[4]報道病原菌主要以凝固酶陰性葡萄球菌和大腸埃希菌為主。謝永強等[5]報道革蘭陽性菌比例為64.18%，主要以凝固酶陰性葡萄球菌和肺炎鏈球菌為主。而新生兒病原學略有不同。Martins等[6]報道腦膜炎主要以B族鏈球菌為主。趙永靜[7]報道革蘭陽性菌占69.1%,革蘭陰性菌占8.9%,真菌占22.0%。特別提到的是酵母型真菌目前在臨床的分布非常廣泛，易定植在人的上呼吸道、泌尿道、消化道引起二重感染，在臨床的分離率呈逐年上升趨勢，但是據(jù)報道兒童真菌性腦膜炎主要以新型隱球菌為主[8]。本研究未分離出新型隱球菌，可能是實驗室條件限制導致的漏檢。白色念珠菌的致病性較弱，特別容易通過各種診療性的操作引起繼發(fā)感染，本研究中的白色念珠菌是否為原發(fā)感染，未進一步深入研究。對所分離的病原菌進行藥物敏感性試驗結(jié)果顯示，大多數(shù)革蘭陰性桿菌對三代頭孢菌素較敏感，對氨芐西林、哌拉西林的耐藥率較高，未檢出對美羅培南和亞安培南耐藥的革蘭陰性細菌。革蘭陽性細菌中，常見致病菌對青霉素敏感率在70%以上，未檢出對萬古霉素耐藥的革蘭陽性細菌。

兒童化膿性腦膜炎臨床表現(xiàn)不典型，發(fā)熱、反應差為首發(fā)癥狀，常缺乏腦膜刺激征等典型癥狀，因此早期診斷較困難。準確地分析病原學數(shù)據(jù)，深入地掌握細菌的動態(tài)變化，可對兒童腦膜炎的診斷及治療提供有力的保證[9]。不同地區(qū)病原學的分布存在差異[10]。應根據(jù)本地區(qū)尤其是本單位細菌分布及耐藥資料經(jīng)驗選擇抗菌藥物，再結(jié)合臨床具體分離株的藥物敏感結(jié)果制定合理抗菌藥物方案，這樣可以節(jié)約醫(yī)療成本，減少細菌耐藥性的產(chǎn)生。

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(本文編輯：趙麗潔)

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《河北醫(yī)科大學學報》編輯部

[收稿日期]2015-01-19；[修回日期]2015-02-04

[作者簡介]馬榮光(1964-)，男，河北定興人，河北省定興縣醫(yī)院主管檢驗技師，從事微生物免疫檢驗研究。 *通訊作者。E-mail:78805021@qq.com

[中圖分類號]R515.2

[文獻標志碼]B

[文章編號]1007-3205(2015)04-0482-03