，，建斌，，

(1.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖南 衡陽(yáng) 421001；2.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院麻醉科)

·臨床醫(yī)學(xué)·

血清瘦素及脂聯(lián)素水平對(duì)子宮內(nèi)膜癌的臨床價(jià)值探討

周杰1，曾志英2*，周建斌1，張群鋒1，劉玨1

(1.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科，湖南 衡陽(yáng) 421001；2.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院麻醉科)

目的探討血清中瘦素濃度及脂聯(lián)素濃度與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系以及聯(lián)合檢測(cè)兩者對(duì)子宮內(nèi)膜癌診斷的價(jià)值。方法利用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附法)測(cè)定41例正常健康婦女(對(duì)照組)、40例子宮內(nèi)膜良性病變患者(良性組)及38例子宮內(nèi)膜癌患者(惡性組)血清瘦素及脂聯(lián)素的含量。結(jié)果惡性組在治療前血清瘦素含量(8.40±2.88 ng/mL)顯著高于良性組(4.97±1.90 ng/mL)、對(duì)照組(4.78±2.12 ng/mL)(P<0.01)。惡性組治療前血清脂聯(lián)素含量(2.50±1.76 μg/mL)顯著低于良性組(5.12±2.20 μg/mL)、對(duì)照組(5.18±2.19 μg/mL)(P<0.01)。患者的血清瘦素與脂聯(lián)素比值檢測(cè)敏感度及特異度優(yōu)于單一檢測(cè)瘦素或脂聯(lián)素時(shí)的敏感度及特異度。血清瘦素、脂聯(lián)素濃度水平與子宮內(nèi)膜癌患者的臨床手術(shù)分期、病理分化程度有關(guān)(P<0.05)。血清中出現(xiàn)瘦素水平升高及血清脂聯(lián)素水平降低是子宮內(nèi)膜癌發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)論子宮內(nèi)膜癌患者血清中出現(xiàn)瘦素水平升高的同時(shí)伴有脂聯(lián)素水平的降低。血清中出現(xiàn)瘦素水平的升高及脂聯(lián)素水平的降低為子宮內(nèi)膜癌患病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。聯(lián)合測(cè)定血清脂聯(lián)素及瘦素可為子宮內(nèi)膜癌的診斷提供相應(yīng)的參考價(jià)值。

血清； 瘦素； 脂聯(lián)素； 子宮內(nèi)膜癌； 酶聯(lián)免疫吸附法

過去，我國(guó)婦女子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率一直很低，但近年來隨著我國(guó)居民生活條件逐漸改善，子宮內(nèi)膜癌的患病率也呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，嚴(yán)重危害著我國(guó)婦女的身體健康。但由于其病因及發(fā)病機(jī)制并不完全明確，早期發(fā)現(xiàn)及治療該病對(duì)于改善子宮內(nèi)膜癌患者的預(yù)后來說就至關(guān)重要，近期國(guó)外有研究報(bào)道子宮內(nèi)膜癌Ⅰ期患者如得到早期有效的診治，其5年生存率可高達(dá)95%[1]，因此尋找子宮內(nèi)膜癌早期診斷和治療手段已成為近期一個(gè)熱點(diǎn)。此前的研究證實(shí)，子宮內(nèi)膜癌為代謝綜合征中的一種表現(xiàn)，目前代謝綜合征已包括肥胖、糖尿病、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、高血脂、乳腺癌及子宮內(nèi)膜癌等多種疾病。瘦素及脂聯(lián)素作為脂肪細(xì)胞因子的重要組成部分，與肥胖、動(dòng)脈粥樣硬化、糖尿病及高血壓等多種臨床常見疾病緊密聯(lián)系，同時(shí)也被證實(shí)參與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程[2-7]。本文通過觀察子宮內(nèi)膜癌患者血清瘦素及脂聯(lián)素水平的變化，探討它們與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展之間的相互關(guān)系。

1 資料與方法

1.1病例來源所有血清標(biāo)本均來源于南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年6月～2014年10月住院并經(jīng)病理學(xué)檢查確診的子宮內(nèi)膜癌患者、子宮內(nèi)膜良性病變患者以及正常健康婦女。本研究經(jīng)過本院倫理委員會(huì)審批，并經(jīng)患者同意。研究對(duì)象包括：(1)惡性組：子宮內(nèi)膜癌38例(包括內(nèi)膜樣腺癌29例、漿液性癌及透明細(xì)胞癌等其他類型惡性子宮內(nèi)膜癌9例)，其中Ⅰ～Ⅱ期病例28例、Ⅲ～Ⅳ期病例10例；平均年齡為 48.5±15.6 歲。(2)良性組：子宮內(nèi)膜良性病變40例(包括功能失調(diào)性子宮出血26例，子宮內(nèi)膜息肉10例，子宮內(nèi)膜炎4例)；平均年齡 46.5±17.1 歲。(3) 對(duì)照組：正常健康婦女41例均來自2013年婦科普查對(duì)象，平均年齡 47.2±13.2 歲，在常規(guī)體檢時(shí)都已排除高血壓、乳腺癌及糖尿病等各種相關(guān)疾病。以上各待檢測(cè)病例在年齡、生育狀況、血壓、體重、肥胖指數(shù)等各方面的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2標(biāo)本采集惡性組及良性組患者在治療前24～48 h抽取外周靜脈血4 mL(空腹?fàn)顟B(tài)下)。對(duì)照組婦女則在體檢時(shí)同樣于空腹?fàn)顟B(tài)下抽取外周靜脈血4 mL。所有血液標(biāo)本采集后給予離心(3 000 r/min)5 min，于-80 ℃冰箱內(nèi)冰凍保存，用于下一步測(cè)定血清中瘦素及脂聯(lián)素含量。

1.3方法運(yùn)用ELISA法檢測(cè)所有待測(cè)血清中瘦素及脂聯(lián)素的含量水平(采用復(fù)管檢測(cè)所有檢測(cè)標(biāo)本)。瘦素ELISA試劑盒和脂聯(lián)素 ELISA試劑盒均購(gòu)自美國(guó)R&D公司。操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)需配戴口罩和手套。以瘦素及脂聯(lián)素標(biāo)準(zhǔn)抗原(標(biāo)準(zhǔn)品)的濃度值作為X軸，以兩總標(biāo)準(zhǔn)品相應(yīng)的OD450吸光值作為Y軸，建立出瘦素及脂聯(lián)素的標(biāo)準(zhǔn)曲線，各個(gè)待檢樣品的濃度即可通過相應(yīng)的OD450吸光值通過標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)化獲得。

1.4統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 16.0軟件處理數(shù)據(jù)。血清瘦素及脂聯(lián)素檢測(cè)結(jié)果采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)和方差分析，采用Logistic回歸模型進(jìn)行子宮內(nèi)膜癌患病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。繪制血清瘦素及脂聯(lián)素的受試者工作特性曲線(ROC曲線)，找出血清瘦素及脂聯(lián)素檢測(cè)的最佳閾值(敏感度和特異度之和最高值)。

2 結(jié) 果

2.1 3組患者治療前血清瘦素及脂聯(lián)素的含量見表1。在惡性組中，治療前血清瘦素含量明顯高于良性組和對(duì)照組，差異具有顯著性(P<0.01)。而血清脂聯(lián)素含量明顯低于良性組和對(duì)照組，差異具有顯著性(P<0.01)。

表1各組患者治療前血清瘦素及脂聯(lián)素含量比較

組別n瘦素含量(ng/mL)脂聯(lián)素含量(μg/mL)對(duì)照組414.78±2.125.18±2.19良性組404.97±1.90a5.12±2.20a惡性組388.40±2.88a2.50±1.76a

與對(duì)照組比較，a：P<0.01

2.2血清瘦素及脂聯(lián)素水平與子宮內(nèi)膜癌患病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系Logistic回歸分析中顯示，血清瘦素水平升高及脂聯(lián)素水平降低則發(fā)生子宮內(nèi)膜癌的風(fēng)險(xiǎn)對(duì)應(yīng)增加(均P<0.01；瘦素OR=1.69，95% CI為1.259～2.27；脂聯(lián)素OR=0.426，95% CI為0.307～0.590 9)。

2.3不同臨床病理指標(biāo)的子宮內(nèi)膜癌患者治療前血清瘦素及脂聯(lián)素的含量在惡性組中，不同病理分化程度及不同臨床分期子宮內(nèi)膜癌患者之間的血清瘦素及脂聯(lián)素的含量比較差異均有顯著性(P<0.05)，而不同組織學(xué)類型、有無宮頸受累、有無附件轉(zhuǎn)移、不同腹腔細(xì)胞學(xué)情況及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的子宮內(nèi)膜癌患者之間的血清瘦素及脂聯(lián)素含量之間差異均無顯著性(P>0.05)。見表2。

表2不同臨床病理指標(biāo)的子宮內(nèi)膜癌患者治療前血清瘦素及脂聯(lián)素的含量

類別n瘦素含量(ng/mL)脂聯(lián)素含量(μg/mL)P值臨床分期 Ⅰ～Ⅱ期287.81±2.932.86±1.78<0.05 Ⅲ～Ⅳ期1010.05±2.041.49±1.30病理分化程度* 高、中分化187.77±3.262.87±1.74<0.05 低分化1110.21±1.991.28±1.13組織學(xué)類型 內(nèi)膜樣腺癌298.69±3.052.27±1.71>0.05 非內(nèi)膜樣腺癌97.44±2.103.24±1.80宮頸是否受累 是78.63±2.972.13±1.16>0.05 否318.34±2.902.58±1.87附件是否受累 是89.70±1.481.65±1.38>0.05 否308.05±3.072.72±1.79腹腔細(xì)胞學(xué) 陽(yáng)性69.52±2.192.09±1.26>0.05 陰性328.19±2.972.57±1.84淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移 是610.36±2.261.50±1.16>0.05 否328.03±2.862.68±1.80

*：透明細(xì)胞癌及其他類型惡性子宮內(nèi)膜癌9例病例無法區(qū)分病理分化程度

2.4 ROC曲線在受試者工作特性曲線當(dāng)中，當(dāng)敏感度與特異度總和最高時(shí)的對(duì)應(yīng)檢測(cè)值一般為最佳診斷閾值，從ROC曲線(圖1～3)中可以看出，當(dāng)血清瘦素取值為7.11 ng/mL時(shí)，敏感度為76.3%，特異度為87.7%，敏感度與特異度之和最高，故血清瘦素用來診斷子宮內(nèi)膜癌最佳閾值為7.11 ng/mL。脂聯(lián)素取值3.05 μg/mL時(shí)，敏感度為76.3%，特異度為80.2%，敏感度與特異度之和最高，故血清脂聯(lián)素用來診斷子宮內(nèi)膜癌的最佳閾值則為3.05 μg/mL。而用對(duì)應(yīng)患者的血清瘦素與脂聯(lián)素比值(L/A)所做出的ROC曲線中，當(dāng)比值取最佳檢測(cè)閾值2.34時(shí)，其檢測(cè)敏感度為78.9%，而特異度達(dá)到了92.6%；明顯高于單一檢測(cè)瘦素或脂聯(lián)素時(shí)的敏感度及特異度。

圖1 血清瘦素濃度預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌的ROC曲線

圖2 血清脂聯(lián)素濃度預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌的ROC曲線

圖3 血清瘦素/脂聯(lián)素比值預(yù)測(cè)子宮內(nèi)膜癌的ROC曲線

3 討 論

子宮內(nèi)膜癌在婦科惡性腫瘤中比較常見，眾所周知，肥胖是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生中的一個(gè)危險(xiǎn)因素。由脂肪細(xì)胞分泌的一系列具有生物活性的激素及因子統(tǒng)稱為脂肪細(xì)胞因子，其中主要包括瘦素、脂聯(lián)素、內(nèi)脂素、腫瘤壞死因子α及抵抗素等。如果女性的子宮內(nèi)膜組織過度地暴露于脂肪組織所產(chǎn)生的多種生物活性物質(zhì)當(dāng)中，可以促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生及發(fā)展。瘦素最初由Friedman等發(fā)現(xiàn)，它由位于人類染色體7q32當(dāng)中的肥胖基因所編碼，是一種分泌型蛋白質(zhì)(由167個(gè)氨基酸組成)。最初的研究認(rèn)為瘦素主要起到調(diào)控機(jī)體食物攝取和能量平衡的作用，與糖尿病、肥胖等疾病密切相關(guān)。近年來的研究則發(fā)現(xiàn)瘦素與惡性腫瘤也有著密切聯(lián)系，它對(duì)多種不同的腫瘤細(xì)胞具有促有絲分裂及抗凋亡等相關(guān)作用[8]。脂聯(lián)素是另一種主要由脂肪細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)(由244個(gè)氨基酸組成)，它由Scherer等發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素基因全長(zhǎng)約16 kb(位于3q27染色體)，由apM1編碼，人類脂聯(lián)素包括N-端分泌信號(hào)肽、膠原樣結(jié)構(gòu)域、氨基端非螺旋功能區(qū)以及C-端球形結(jié)構(gòu)域。正常人類血清中就有脂聯(lián)素的大量表達(dá)(占血漿總蛋白的0.01%)，它通過調(diào)節(jié)腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)等多種途徑在限制癌細(xì)胞的增殖方面起著重要的作用[9]。

本研究發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜癌患者治療前血清瘦素呈異常高表達(dá)，其濃度水平均顯著高于對(duì)照組及良性組；子宮內(nèi)膜癌患者治療前血清脂聯(lián)素呈異常低表達(dá)，濃度水平均顯著低于對(duì)照組及良性組；而良性組與正常組之間的血清瘦素及脂聯(lián)素含量比較則未發(fā)現(xiàn)差異；提示血清瘦素及脂聯(lián)素含量的檢測(cè)可能有助于子宮內(nèi)膜癌的判斷，這與Ashizawa、Ma等[10-11]的研究結(jié)果一致。本文根據(jù)各組血清瘦素及脂聯(lián)素值繪制出ROC曲線，瘦素檢測(cè)曲線下面積為0.843，脂聯(lián)素檢測(cè)曲線下面積為0.840，說明測(cè)定血清瘦素及脂聯(lián)素含量對(duì)子宮內(nèi)膜癌有相應(yīng)的診斷價(jià)值。以最佳診斷閾值(敏感度與特異度之和最高：瘦素為7.11 ng/mL、脂聯(lián)素為3.05 μg/mL)為界限，瘦素檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌的敏感度及特異度分別達(dá)到了76.3%和87.7%，脂聯(lián)素檢測(cè)的敏感度及特異度分別達(dá)到了76.3%和87.7%，而用對(duì)應(yīng)患者的血清瘦素與脂聯(lián)素比值所做出的ROC曲線中，當(dāng)比值取最佳檢測(cè)閾值2.34時(shí)，其檢測(cè)敏感度達(dá)到78.9%，特異度達(dá)到92.6%，明顯高于單一檢測(cè)血清瘦素或脂聯(lián)素時(shí)的檢測(cè)敏感度及特異度[12-13]?？梢娧迨菟刂?.11 ng/mL、脂聯(lián)素值3.05 μg/mL可作為診斷子宮內(nèi)膜癌的閾值，而兩者聯(lián)合檢測(cè)所計(jì)算出來的L/A比值更加有利于子宮內(nèi)膜癌的診斷，由此也得出臨床上聯(lián)合檢測(cè)血清瘦素與脂聯(lián)素含量對(duì)治療前診斷子宮內(nèi)膜癌有更高的應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)發(fā)現(xiàn)血清高瘦素水平及低脂聯(lián)素水平是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，這與多項(xiàng)國(guó)外學(xué)者研究結(jié)果相同[14-17]，進(jìn)一步證實(shí)了血清高瘦素水平及低脂聯(lián)素水平與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病有相關(guān)性，血清高瘦素水平及低脂聯(lián)素水平能通過多種途徑增高罹患子宮內(nèi)膜癌的可能性。通過同時(shí)檢測(cè)不同臨床病理指標(biāo)子宮內(nèi)膜癌患者治療前的血清瘦素及脂聯(lián)素含量，發(fā)現(xiàn)在惡性組中不同病理分化程度及不同臨床分期患者的瘦素及脂聯(lián)素的含量間差異均有顯著性(P<0.05)，而不同組織學(xué)類型、是否存在宮頸受累、是否存在附件轉(zhuǎn)移、腹腔細(xì)胞學(xué)情況及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者之間的瘦素和脂聯(lián)素含量之間差異均無顯著性(P>0.05)，此結(jié)果與Rzepka-Gorska等[18]的研究結(jié)果類似。說明血清瘦素含量可能隨著子宮內(nèi)膜癌惡性程度增加而增加，瘦素促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)病程的不斷進(jìn)展，與子宮內(nèi)膜癌的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)；而血清脂聯(lián)素含量可能隨著子宮內(nèi)膜癌惡性程度增加而降低，脂聯(lián)素抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖，抑制病程進(jìn)展，對(duì)女性子宮內(nèi)膜組織發(fā)揮了保護(hù)作用。

總之，本文發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌患者中血清瘦素水平升高，同時(shí)血清脂聯(lián)素水平出現(xiàn)降低。血清中出現(xiàn)瘦素水平升高、脂聯(lián)素水平降低則是子宮內(nèi)膜癌患病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。血清瘦素、脂聯(lián)素水平測(cè)定及其生成的瘦素/脂聯(lián)素比值可為子宮內(nèi)膜癌診斷提供參考價(jià)值，從而為子宮內(nèi)膜癌的防治提供了新的線索和策略。當(dāng)然，本文的研究樣本量仍較小，研究結(jié)果仍需要在長(zhǎng)時(shí)間及大樣本的進(jìn)一步研究中得到相應(yīng)的證實(shí)。

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InvestigationabouttheClinicalValueofSerumLeptinandAdiponectinLevelstoEndometrialCancer

ZHOU Jie，ZENG Zhiying，ZHOU Jianbin，et al

(TheSecondAffiliatedHospital,UniversityofSouthChina，Hengyang，Hunan421001，China)

ObjectiveTo discuss the relationship between serum leptin and adiponectin with endometrial cancer，and to explore the clinical value of combined detection in diagnosis of endometrial cancer.MethodsSerum levels of leptin，adiponectin in 38 patients with endometrial cancer，40 patients with endometrial benign lesion and 41 healthy controls were measured by ELISA.ResultsThe serum level of leptin in patients with endometrial cancer(8.40±2.88 ng/mL) was significantly higher than that in patients with endometrial benign lesion (4.97±1.90ng/mL) and healthy group (4.78±2.12 ng/mL) (P<0.01).The serum level of adiponectin in patients with malignant ovarian tumors (2.50±1.76 μg/mL) was significantly lower than that in patients with endometrial benign lesion (5.12±2.20 μg/mL) and healthy group (5.18±2.19 μg/mL) (P<0.01).The sensitivity and specificity of the ratio of serum leptin and adiponectin were superior to single detection of leptin or adiponectin.The levels of serum leptin and adiponectin was in correlation with various FIGO stage and histopathologic grade (P<0.05).Increased serum leptin levels，decreased adiponectin levels were independent risk factors for endometrial cancer.ConclusionsIncreased serum leptin levels accompanied with decreased adiponectin levels occurs in Endometrial cancer patients.Increased serum leptin levels，decreased adiponectin levels were independent risk factors for endometrial cancer.Combined determination of serum adiponectin and leptin may have some value in the diagnosis of endometrial cancer.

serum；leptin；adiponectin；endometrial cancer；ELISA

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.04.018

2015-04-16；

2015-05-05

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R737.33

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(此文編輯：蔣湘蓮)