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        不同頻率電針對(duì)抑郁模型大鼠血清BDNF及CRH含量的影響

        2015-12-27 05:49:48王敏丹
        關(guān)鍵詞:電針神經(jīng)元針刺

        王敏丹,燕 平

        (山西中醫(yī)學(xué)院,山西太原030024)

        不同頻率電針對(duì)抑郁模型大鼠血清BDNF及CRH含量的影響

        王敏丹,燕 平

        (山西中醫(yī)學(xué)院,山西太原030024)

        目的:研究“解郁方”的不同頻率對(duì)抑郁模型大鼠血清腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)和促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)含量的影響,探討抑郁癥的機(jī)制。方法:清潔級(jí)SD雄性大鼠40只隨機(jī)分為空白對(duì)照組(A組)、模型對(duì)照組(B組)、針刺干預(yù)組(設(shè)3組,分別編號(hào)C組、D組、E組)5組,每組8只。除A組外,其他各組動(dòng)物接受21 d各種不同的應(yīng)激,造模的同時(shí)分別對(duì)針刺干預(yù)組進(jìn)行不同頻率電針干預(yù)。21 d后測(cè)定5組血清中BDNF和CRH含量。結(jié)果:與A組比較,B、C、D、E組BDNF含量均降低,CRH含量均升高,表明造模成功;與B組比較,C、D、E組BDNF含量升高,CRH含量降低;D、E組與C組BDNF及CRH含量比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:針刺頻率2 Hz效果最好,其作用機(jī)制可能與針刺調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺(HPA軸)的功能有關(guān)。

        抑郁癥;解郁方;針刺;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子;促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素

        抑郁癥是一種以持久的情緒低落,活動(dòng)能力減退,思維與認(rèn)知功能遲緩為主要臨床特征的一類心理障礙,其主要癥狀包括焦躁情緒、快感缺失、睡眠障礙、負(fù)罪感和反復(fù)自殺念頭等,是一種嚴(yán)重影響人類身心健康的精神性疾病。普通人群中抑郁癥的年發(fā)病率約為200/10萬(wàn),且發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì),目前中國(guó)的抑郁癥患者已超過(guò)2 600萬(wàn)[1-2]。由于抑郁癥表現(xiàn)多樣,病因、發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜,藥物治療是目前主要的治療方法,但藥物治療的副作用較大,療效不佳以及治療費(fèi)用昂貴等限制了其臨床應(yīng)用。中醫(yī)藥,尤其是針灸在治療該病種上優(yōu)勢(shì)突出,特色明顯。本文在前期實(shí)驗(yàn)“解郁方”(百會(huì)、神門、太沖)的基礎(chǔ)上,研究“解郁方”的不同頻率電針對(duì)抑郁模型大鼠血清BDNF及CRH含量的影響,進(jìn)一步探討抑郁癥的機(jī)制,為臨床研究和治療抑郁癥提供依據(jù)。

        1 材料和方法

        1.1 實(shí)驗(yàn)材料

        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)SD大鼠[合格證號(hào)SCXK-(軍)2007-004]40只,雄性,體重(220~240)g,購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。

        1.1.2 試劑與儀器 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒(批號(hào)10-42-513)、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒(批號(hào)10-42-514),均購(gòu)于美國(guó)Becton,Dickinson and Company公司。LH-202型HANS電針治療儀、毫針、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 分組與造模 40只SD大鼠隨機(jī)分為空白組(A組)、模型組(B組)、針刺干預(yù)組(設(shè)3組,分別編號(hào)C組、D組、E組)。除A組外,其他各組動(dòng)物接受21 d各種不同的應(yīng)激,包括束縛(3 h)、冰水游泳(4℃,5 min)、熱應(yīng)激(45℃,5 min)、夾尾(3 min)、禁水(24 h)、禁食(24 h)和晝夜顛倒等,用隨機(jī)軟件每天安排一種應(yīng)激,平均每種刺激使用3次[3]。同時(shí)配合單籠飼養(yǎng)。

        1.2.2 針刺方法 A組不予任何干預(yù)措施,B組雖經(jīng)抓取、固定,但不做針刺,其他處理同針刺組。針刺干預(yù)組于造模第1天開始取百會(huì)、神門、太沖穴(參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[4]大鼠穴位定位方法取穴),各組穴位常規(guī)消毒,選用華佗牌0.25 mm×25 mm針灸針進(jìn)行針刺,百會(huì)向前平刺2 mm,神門直刺1 mm,太沖斜刺1 mm。連接到LH-202型HANS電刺激儀。刺激強(qiáng)度以大鼠微顫為準(zhǔn),每次電針20 min,每日上午9時(shí)進(jìn)行,共21 d。C組電針刺激頻率設(shè)置為2 Hz,D組為30 Hz,E組為100 Hz。

        1.2.3 指標(biāo)檢測(cè) 21 d后腹腔注入1%戊巴比妥鈉(40~50 mg/kg體重)將動(dòng)物麻醉,麻醉后開腹充分暴露腹腔,腹主動(dòng)脈取血,按BDNF及CRH試劑盒方法要求分離血清,采用ELISA法測(cè)定BDNF和CRH。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        所得數(shù)據(jù)使用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),計(jì)量資料用單因素方差分析。

        2 結(jié)果

        與A組比較,B、C、D、E組BDNF含量均降低,CRH含量均升高,表明造模成功。與B組比較,C、D、E組BDNF含量升高,CRH含量降低。D、E組與C組BDNF含量降低、CRH含量升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表明針刺頻率2 Hz效果最好。結(jié)果見表1。

        表1 各組大鼠血清BDNF、CRH含量比較 (ng/L,x±s)

        3 討 論

        前期實(shí)驗(yàn)探討了針灸治療抑郁癥的選穴配伍,確立了最佳組方百會(huì)、神門、太沖,命名“解郁方”[5]。本實(shí)驗(yàn)建立在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,研究“解郁方”的不同頻率對(duì)抑郁癥的影響,進(jìn)一步探討抑郁癥的機(jī)制,為臨床研究和治療抑郁癥提供依據(jù)。

        BDNF是在腦內(nèi)合成的一種蛋白質(zhì),它廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi),在中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中,對(duì)神經(jīng)元的存活、分化、生長(zhǎng)發(fā)育起重要作用,并能防止神經(jīng)元受損傷死亡、改善神經(jīng)元的病理狀態(tài)、促進(jìn)受損傷神經(jīng)元再生及分化等生物效應(yīng),而且也是成熟的中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元維持生存及正常生理功能所必需。充足的BDNF能夠使大腦不斷重寫覆蓋痛苦的記憶,并在重寫的過(guò)程中建立信心和安全感。大腦自然分泌BDNF,能夠起到調(diào)節(jié)痛苦和恐懼的作用,BDNF缺乏會(huì)導(dǎo)致創(chuàng)傷后壓力紊亂,繼發(fā)加重抑郁癥。BDNF屬于神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素家族,對(duì)發(fā)育過(guò)程中神經(jīng)元的存活、分化以及成年神經(jīng)元的存活和功能起重要作用。近年來(lái)研究表明,神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子尤其是BDNF在抑郁癥發(fā)病和治療中起著重要作用,神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)不足可引起腦區(qū)功能受損,抗抑郁治療可以上調(diào)BDNF并翻轉(zhuǎn)這種損害[6]。

        血清CRH為神經(jīng)垂體及下丘腦中含有的能刺激促腎上腺皮質(zhì)激素釋放的物質(zhì),在垂體門脈血液及末梢血中發(fā)現(xiàn)也有此類因子。其合成部位尚不太清楚。由于其不太穩(wěn)定,影響了純化過(guò)程。主要作用于促垂體的促腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞受體,通過(guò)cAMP系統(tǒng)促進(jìn)促腎上腺皮質(zhì)激素的合成與釋放。其活性以下丘腦正中隆起最高。電刺激杏仁核區(qū)下丘腦結(jié)節(jié)部、乳頭部,可引起促腎上腺皮質(zhì)激素釋放。各種傳入性影響主要通過(guò)改變下丘腦CRH的合成和釋放來(lái)改變腺垂體-腎上腺皮質(zhì)的功能,組成下丘腦-腺垂體-腎上腺皮質(zhì)軸(HPAA)。電刺激杏仁核可引起CRH釋放,而刺激海馬則抑制CRH釋放。調(diào)節(jié)CRH的興奮性遞質(zhì)主要有乙酰膽堿和5-羥色胺,抑制性遞質(zhì)為兒茶酚胺和γ-氨基丁酸。電針能夠使慢性應(yīng)激抑郁大鼠的CRH水平明顯下降,起到抑制或治療抑郁癥的效果。

        目前研究結(jié)果表明,抑郁癥的病理生理和發(fā)病機(jī)制不限于神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)肽及其受體數(shù)量和密度異常等神經(jīng)生物化學(xué)的改變[7],同時(shí)與下丘腦-垂體-腎上腺(HPA軸)之間的功能、海馬發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能改變等有著密切的交互作用。抑郁癥的神經(jīng)內(nèi)分泌研究開始于20世紀(jì)80年代,研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者HPA軸存在功能亢進(jìn)。近年來(lái)對(duì)于內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病如皮質(zhì)醇增多的研究中發(fā)現(xiàn)抑郁癥患病率明顯增高,進(jìn)一步提示神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能改變可能同抑郁癥存在某些相關(guān)性,尤其是HPA軸功能損害[8]。HPA軸具有調(diào)節(jié)食欲、睡眠、性欲和對(duì)應(yīng)激的適應(yīng)等功能,這些功能障礙與抑郁癥的癥狀密切相關(guān)。臨床研究顯示約有50%的抑郁癥患者有明顯的晝夜節(jié)律改變[9],有半數(shù)以上的抑郁癥患者呈現(xiàn)HPA軸功能亢進(jìn)[10]。本研究顯示,抑郁癥大鼠血清BDNF含量低于正常對(duì)照組,血清CRH含量高于空白組,這說(shuō)明抑郁癥大鼠的HPA軸存在明顯的功能亢進(jìn)。據(jù)本研究推斷抑郁癥可能與HPA軸的失衡有關(guān)。

        [1]毛慶秋,黃真.中藥治療抑郁癥的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志,2007,23(10):877.

        [2]姚李吉,沈洪.抗抑郁中醫(yī)方藥的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].光明中醫(yī),2008,23(5):696.

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        [4]李忠仁.實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)[M].北京:中國(guó)中醫(yī)藥出版社,2003:360.

        [5]喬瑞瑞,燕平,劉明菲,等.電針“百會(huì)”“神門”“太沖”穴對(duì)慢性應(yīng)激抑郁模型大鼠血清ACTH、CORT的影響[J].世界中西醫(yī)結(jié)合雜志,2014,9(2):156-158.

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        [7]彭桂軍.腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子與抑郁癥的研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)·精神病學(xué)分冊(cè),2004,31(3):152-154.

        [8]陽(yáng)瓊,李萍,關(guān)靖,等.難治性抑郁癥與HPA軸的關(guān)系研究[J].臨床醫(yī)學(xué)工程,2013,20(7):815-816.

        [9]崔青,孫麗亞,肖紅,等.抑郁癥患者神經(jīng)內(nèi)分泌節(jié)律變化的對(duì)照研究[J].中華行為醫(yī)學(xué)與腦科學(xué)雜志,2010,19(1):33-35.

        [10]Holsboer F.Prospects for antidepressant drug discovery[J].Biol Psy-chol,2001,57(1-3):47.

        (編輯:翟春濤)

        Effect of different frequency electric acupuncture on the content of BDNF and CRH in serum with depressed model rats

        Wang Mindan,Yan Ping
        (Shanxi college of TCM,Taiyuan Shanxi 030024)

        Objective:To research the effect of different frequency electric acupuncture on the contents of BDNF and CRH in serum with depressed model rats so as to explore the mechanism of depression.Methods:40 SD male rats were divided into blank control group(A group),model group(B group)and acupuncture intervening group(C、D、E group)with 8 rats in each group.Except A group,other groups were accepted the different stress and acupuncture intervening group were intervened by using different frequency electric acupuncture at the same time.After 21 days,the contents of BDNF and CRH in serum were measured.Results:Compared to A group,the content of BDNF were decreased and the content of CRH were increased in B、C、D、E group.Compared to B group,the content of BDNF were increased and the content of CRH were decreased in C、D、E group.The content of BDNF and CRH in C group had significant difference comparing with D、E group.Conclusion:The electric acupuncture have an effect on the depression,especially the 2 Hz.It is possible relationship with HPA axis function regulated by acupuncture.

        depression;antideprssion prescription;acupuncture;BDNF;CRH

        R245

        A

        1671-0258(2015)01-0021-03

        山西省自然科技基金資助項(xiàng)目(2012011041-3)

        王敏丹,在讀碩士,E-mail:867094585@qq.com

        燕平,教授,碩士研究生導(dǎo)師,E-mail:yanp83@sina.com

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